Le développement d’anticorps contre <em>Cowdria ruminantium</em> chez la souris et leur rôle dans la cowdriose

B. Byrom; Suman M. Mahan; Anthony F. Barbet

doi:10.19182/remvt.9361

Le développement d’anticorps contre Cowdria ruminantium chez la souris et leur rôle dans la cowdriose

Revue d’élevage et de médecine vétérinaire des pays tropicaux ◽

10.19182/remvt.9361 ◽

1993 ◽

Vol 46 (1-2) ◽

pp. 197-201

Author(s):

B. Byrom ◽

Suman M. Mahan ◽

Anthony F. Barbet

Keyword(s):

Cowdria Ruminantium

Les réponses immunitaires contre Cowdria ruminantium ont été étudiées en utilisant des souris DBA/2 et Balb/c comme modèle. Les deux souches de souris ont été inoculées avec 1, 10 ou 100 DL50 de C. ruminantium (stock Crystal Springs). Des anticorps contre C. ruminantium ont commencé à se développer dans la deuxième semaine après l'inoculation et le titre d'anticorps dépendait de la dose de C. ruminantium inoculée. Le rôle possible des anticorps sur la maladie a été recherché au moyen des tests de neutralisation in vitro, utilisant des sérums de souris et de bovins. Les résultats ont montré que les sérums hyperimmuns des souris DBA/2 et Balb/c étaient capables de neutraliser l'infection in vitro, celui des souris DBA/2 montrant l'effet neutralisant le plus fort. Deux sérums de bovins, l'un d'un animal infecté au laboratoire et l'autre provenant d'un mélange de sérums de deux animaux infectés naturellement, ont également montré un effet neutralisant.

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Expression d’interleukine 6 après infection par Cowdria ruminantium de cellules endothéliales de cerveau bovin

Revue d’élevage et de médecine vétérinaire des pays tropicaux ◽

10.19182/remvt.9360 ◽

1993 ◽

Vol 46 (1-2) ◽

pp. 195-195

Author(s):

Albert Bensaïd ◽

S. Bourdoulous ◽

D. Lerhun ◽

D. Calvez ◽

L. Droogman ◽

...

Keyword(s):

Cowdria Ruminantium ◽

Phase Aiguë ◽

Cellules T

Les interleukines sont des médiateurs protéiques solubles qui peuvent déclencher une activation cellulaire. D’abord impliquée dans l’activation des cellules T dans la production d’immunoglobulines par les cellules B, l’interleukine 6 (IL6) provoque aussi l’induction de protéines de la phase aiguë par les hépatocytes. Ainsi, l’IL6 est impliquée dans les processus inflammatoires qui sont en grande partie responsables de la pathogénie de la cowdriose. Originellement produit par des macrophages et des cellules endothéliales activées, l’IL6 agit comme un stimulant de la réponse immunitaire. Néanmoins, quand elle est produite constamment et en grandes quantités, l’IL6 provoque des réactions inflammatoires non contrôlées. Afin de tester si l’IL6 est impliquée dans la cowdriose, une culture primaire de cellules endothéliales de cerveau bovin (BBEC) a été infectée in vitro par C. ruminantium. Les cellules infectées ont été récoltées tous les jours et ce jusqu’au sixième jour où toutes les cellules sont lysées. La même expérience a été effectuée sur des BBEC qui ont été simultanément infectées et traitées avec de l’INFγ. De l’ARN a été purifié à partir de ces cellules et après électrophorèse sur gel d’agarose transféré sur un filtre de nylon. Ce filtre a été sondé avec un ADNc radiomarqué codant pour l’IL6 bovine. Des signaux à 1 kb ont été détectés seulement sur les ARN de cellules après le quatrième jour de l’infection, que celles-ci aient été traitées ou non par l’INFγ. Tous les autres échantillons, incluant l’ARN de cellules qui n’ont pas été infectées mais traitées à l’INFγ, se sont révélés négatifs pour l’expression d’IL6. Ainsi, après infection par C. ruminantium, l’expression d’IL6 est induite peu avant que l’effet cytopathogène n’apparaisse. A l’heure actuelle, des surnageants de milieu de culture de ces cellules sont testés pour leur capacité à induire des réponses prolifératives des cellules T.

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Une étude in vitro du cycle de vie de Cowdria ruminantium

Revue d’élevage et de médecine vétérinaire des pays tropicaux ◽

10.19182/remvt.9373 ◽

1993 ◽

Vol 46 (1-2) ◽

pp. 247-247

Author(s):

L. Prozesky ◽

A. Hart ◽

M.S. Brett

Keyword(s):

Post Inoculation ◽

Cowdria Ruminantium ◽

Cycle De Vie

Le cycle de vie de Cowdria ruminantium a été étudié dans des cellules SBE 189 par microscopie classique et électronique. Des cultures ont été infectées avec un inoculum synchronisé et fixées et préparées entre 15 min et 111 h post-inoculation (PI). Après 12 h, de grands corps réticulaires seuls ou en petits groupes ont été identifiés dans des vacuoles intracytoplasmatiques entourées de membranes. Ils se développaient graduellement dans des corps réticulaires plus petits avec une structure interne plus granuleuse. De 66 à 75 h PI, il y avait une augmentation importante de la taille des colonies. La plupart des colonies contenaient des corps réticulaires, bien que quelques corps intermédiaires et opaques aux électrons aient été visibles. Des corps réticulaires solitaires extracellulaires avec une couche ressemblant au peptidoglycan ont été observés 84 h PI. Après 90 h, des corps intermédiaires et opaques aux électrons fussent présents en abondance et cela coïncidait avec la lyse des cellules de culture. Le cycle de développement de Cowdria ruminantium durait donc environ 4 jours, dans cette étude.

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Protective immunity to heartwater (Cowdria ruminantium infection) is acquired after vaccination with in vitro-attenuated rickettsiae.

Infection and Immunity ◽

10.1128/iai.59.2.729-731.1991 ◽

1991 ◽

Vol 59 (2) ◽

pp. 729-731 ◽

Cited By ~ 52

Author(s):

F Jongejan

Keyword(s):

Protective Immunity ◽

Cowdria Ruminantium

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In vitro isolation and cultivation of Cowdria ruminantium under serum-free culture conditions

Research in Veterinary Science ◽

10.1016/s0034-5288(97)90011-4 ◽

1997 ◽

Vol 63 (2) ◽

pp. 161-164 ◽

Cited By ~ 8

Author(s):

E Zweygarth ◽

S.W Vogel ◽

A.I Josemans ◽

E Horn

Keyword(s):

Culture Conditions ◽

Serum Free ◽

Cowdria Ruminantium

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Comparaison de trois antigènes pour le sérodiagnostic de la cowdriose par immunofluorescence indirecte

Revue d’élevage et de médecine vétérinaire des pays tropicaux ◽

10.19182/remvt.8836 ◽

1990 ◽

Vol 43 (2) ◽

pp. 159-166

Author(s):

Dominique Martinez ◽

J. Swinkels ◽

Emmanuel Camus ◽

Frans Jongejan

Keyword(s):

Cowdria Ruminantium

Les auteurs évaluent la possibilité d'utiliser comme antigène une lignée de cellules endothéliales bovines (E5) infectées in vitro par trois stocks de Cowdria ruminantium pour le sérodiagnostic de la cowdriose par immunofluorescence indirecte. Cette méthode est comparée à celles utilisant des macrophages de souris infectés par le stock Kümm ou des neutrophiles de chèvres infectés par quatre stocks de Cowdria. La culture en cellules endothéliales permet de produire aisément et en continu de grandes quantités d'antigène à un faible coût. La lecture de la réaction est très rapide, comparée à la lecture souvent fastidieuse des lames de neutrophiles ou de macrophages. L'antigène E5 semble être plus spécifique que l'antigène Kümm, et les problèmes de sérotypes différents rencontrés lors de l'utilisation des neutrophiles semblent moins grands.

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Identification of Cowdria ruminantiumAntigens That Stimulate Proliferation of Lymphocytes from Cattle Immunized by Infection and Treatment or with Inactivated Organisms

Infection and Immunity ◽

10.1128/iai.68.2.603-614.2000 ◽

2000 ◽

Vol 68 (2) ◽

pp. 603-614 ◽

Cited By ~ 11

Author(s):

Mirinda Van Kleef ◽

Nico J. Gunter ◽

Henriette Macmillan ◽

Basil A. Allsopp ◽

Varda Shkap ◽

...

Keyword(s):

Mononuclear Cells ◽

Peripheral Blood Mononuclear ◽

Cowdria Ruminantium ◽

Cell Immunity ◽

Molecular Masses ◽

Proliferation Of Lymphocytes ◽

Obligate Intracellular Pathogen ◽

Proliferation Assays ◽

Proliferation In Vitro

ABSTRACT Cowdria ruminantium is an obligate intracellular pathogen that causes heartwater in ruminants. Several findings suggest that T cells play an important role in protection against the disease. In order to identify which proteins are involved in T-cell immunity,C. ruminantium proteins were fractionated by continuous-flow electrophoresis and tested for their ability to stimulate lymphocyte proliferation in vitro. C. ruminantium-infected endothelial cell lysates were fractionated at between 11 and 38 kDa and 50 and 168 kDa on 15 and 7% acrylamide gels, respectively. In an attempt to stimulate the natural infective process, peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were obtained from two cattle rendered immune by infection and treatment and assayed in proliferation assays with fractionated proteins. In a parallel study, four cattle were immunized with inactivated C. ruminantiumto determine whether their lymphocytes also responded to fractionated proteins. Proliferation assays after immunization by infection and treatment detected no C. ruminantium-specific proliferation in vitro after one vaccination. Proliferation was observed, however, between 1 and 4 weeks after challenge. This was followed by a period of no detectable response, after which the response reappeared. PBMC from animals immunized with inactivated organisms proliferated specifically in response to antigen soon after the first immunization. Only C. ruminantium proteins with low molecular masses of 11, 12, 14 to 17, and 19 to 23 kDa induced proliferative responses by lymphocytes from all six animals. These protein fractions may have potential as vaccine antigens.

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