Distribution of red-spotted grouper nervous necrosis virus (RGNNV) antigens in nervous and non-nervous organs of European seabass (Dicentrarchus labrax) during the course of an experimental challenge

: This work describes immunization of European sea bass (Dicentrarchus labrax) juveniles against viral nervous necrosis virus (VNNV), a betanodavirus causing worldwide mortalities in many fish species. Protection was obtained with the so-called spinycterin vehicles consisting of irreversibly DNA-damaged DNA-repair-less Escherichia coli displaying at their surface a downsized VNNV coat antigen. In this work we have i) maximized bacterial expression levels by downsizing the coat protein of VNNV to a fragment (frgC91–220) containing most of its previously determined antigenicity, ii) developed a scalable autoinduction culture media for E.coli based in soy-bean rather than in casein hydrolysates, iii) enriched surface expression by screening different anchors from several prokaryotic sources (anchor + frgC91–220 recombinant products), iv) preserved frgC91–220 antigenicity by inactivating bacteria by irreversible DNA-damage by means of Ciprofloxacin, and v) increased safety using a repair-less E.coli strain as chassis for the spinycterins. These spinycterins protected fish against VNNV challenge with partial (Nmistic + frgC91–220) or total (YBEL + frgC91–220) levels of protection, in contrast to fish immunized with frgC91–220 spinycterins. The proposed spinycterin platform has high levels of environmental safety and cost effectiveness and required no adjuvants, thus providing potential to further develop VNNV vaccines for sustainable aquaculture.

Download Full-text

Sea bass Dicentrarchus labrax nervous necrosis virus isolates with distinct pathogenicity to sea bass larvae

Diseases of Aquatic Organisms ◽

10.3354/dao045025 ◽

2001 ◽

Vol 45 ◽

pp. 25-31 ◽

Cited By ~ 34

Author(s):

G Breuil ◽

O Mouchel ◽

C Fauvel ◽

JF Pepin

Keyword(s):

Dicentrarchus Labrax ◽

Sea Bass ◽

Nervous Necrosis Virus ◽

Necrosis Virus ◽

Sea Bass Larvae ◽

Virus Isolates

Download Full-text

Different survival of three populations of European sea bass (Dicentrarchus labrax) following challenge with two variants of nervous necrosis virus (NNV)

Aquaculture Reports ◽

10.1016/j.aqrep.2021.100621 ◽

2021 ◽

Vol 19 ◽

pp. 100621

Author(s):

Sofie Barsøe ◽

François Allal ◽

Alain Vergnet ◽

Marc Vandeputte ◽

Niels Jørgen Olesen ◽

...

Keyword(s):

Dicentrarchus Labrax ◽

Sea Bass ◽

Nervous Necrosis Virus ◽

Necrosis Virus ◽

European Sea Bass

Download Full-text

Sea Bass Immunization to Downsized Betanodavirus Protein Displayed in The Surface of Dna-Damaged Repair-Less Bacteria

10.20944/preprints201907.0299.v1 ◽

2019 ◽

Author(s):

Raquel Lama ◽

Patricia Pereiro ◽

Beatriz Novoa ◽

Julio Coll

Keyword(s):

Dicentrarchus Labrax ◽

Sea Bass ◽

Surface Expression ◽

Environmental Safety ◽

Small Fish ◽

Nervous Necrosis Virus ◽

Necrosis Virus ◽

European Sea Bass ◽

C Protein ◽

Viral Nervous Necrosis

This work describes practical immunization of European sea bass (Dicentrarchus labrax) juveniles against viral nervous necrosis virus (VNNV), a betanodavirus causing worldwide mortalities in many fish species. Protection was obtained with the so called spinycterin vehicles consisting in irreversibly DNA-damaged DNA-repair-less E.coli displaying at their surface a downsized antigen. In this work we, i) maximized bacterial expression levels by downsizing the C protein to a fragment (frgC91-220) containing most of its antigenicity, ii) developed an scalable autoinduction bacterial media based in soy-bean increasing membrane display and reproducibility, iii) enriched surface expression by screening different anchors from several prokaryotic origins (anchor+frgC91-220), iv) preserved frgC91-220 antigenicity by inactivating bacteria by irreversible DNA-damage by means of Ciprofloxacin, and v) increased safety using a repair-less E.coli strain as spinycterin chassis. These second generation of spinycterins protected fish against VNNV challenge with partial (Nmistic+frgC91-220) or 100 % (YBEL+frgC91-220 ) protection, in contrast to those fish immunized with frgC91-220 spinycterins. The proposed spinycterin platform has high levels of environmental safety and cost effectiveness, thus providing potential for small fish vaccines for sustainable aquaculture.

Download Full-text

New RT-qPCR assay for viral nervous necrosis virus detection in sea bass, Dicentrarchus labrax (L.): application and limits for hatcheries sanitary control

Fish & Shellfish Immunology ◽

10.1016/j.fsi.2010.08.015 ◽

2011 ◽

Vol 30 (1) ◽

pp. 27-32 ◽

Cited By ~ 17

Author(s):

L. Mazelet ◽

J. Dietrich ◽

J.L. Rolland

Keyword(s):

Dicentrarchus Labrax ◽

Virus Detection ◽

Sea Bass ◽

Qpcr Assay ◽

Nervous Necrosis Virus ◽

Necrosis Virus ◽

Viral Nervous Necrosis

Download Full-text

Επιδημιολογική μελέτη του ιού Noda σε αλιεύματα, δίθυρα και ιχθείς και μελέτη της παθογένειας του ιού στο λαβράκι σε σχέση με τον εντοπισμό της πύλης εισόδου του ιού στον οργανισμό και τον τρόπο εξάπλωσής του στους ιστούς του ψαριού

10.12681/eadd/40051 ◽

2017 ◽

Author(s):

Ειρήνη Λάμπου

Keyword(s):

Real Time ◽

Real Time Pcr ◽

Dicentrarchus Labrax ◽

Nervous Necrosis Virus ◽

Necrosis Virus ◽

Viral Encephalopathy And Retinopathy

Η ιογενής εγκεφαλοπάθεια και αμφιβληστροειδοπάθεια (Viral Encephalopathy and Retinopathy, VER) είναι μία νευροπαθολογική νόσος των ψαριών που έχει θεωρηθεί ως η πιο σοβαρή ιογενής απειλή στην εκτροφή ειδών θαλασσινού νερού στην περιοχή της Μεσογείου. Αιτιολογικός παράγοντας της νόσου είναι ένας RNA-ιός, που ανήκει στο γένος Betanodavirus της οικογένειας Nodaviridae (Carstens et al., 2000). Σκοπός της παρούσας διατριβής ήταν η μελέτη στοιχείων επιδημιολογίας των Betanoda-ιών σε άγρια και εκτρεφόμενα είδη ψαριών και δίθυρων που απαντώνται στα ελληνικά θαλάσσια ύδατα και η διερεύνηση πτυχών της παθογένειας του ιού σε ένα εξαιρετικά ευαίσθητο είδος, το ευρωπαϊκό λαβράκι, Dicentrarchus labrax. Για το σκοπό αυτό διενεργήθηκαν πειραματισμοί που περιγράφονται σε δύο κεφάλαια. Στο πρώτο κεφάλαιο παρατίθενται αναλυτικά οι δειγματοληψίες που πραγματοποιήθηκαν για τον εντοπισμό του ιού σε άγριους και εκτρεφόμενους πληθυσμούς και το πρωτόκολλο της δοκιμής real-time PCR που χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση γενώματος Betanoda-ιών. Τα αποτελέσματα φανέρωσαν ότι μεγάλο εύρος ειδών τελεόστεων ιχθύων και δίθυρων αποτελούν ξενιστές Betanoda-ιών και συγκεκριμένα στελεχών που στην πλειοψηφία τους κατατάσσονται στον γενότυπο RGNNV. Ο ιός εντοπίστηκε σε 10 είδη για πρώτη φορά διεθνώς, ενώ ιδιαίτερο ενδιαφέρον παρουσιάζει η ανίχνευση ενός RGNNV/SJNNV ανασυνδυασμού σε σαφρίδι. H φυλογενετική ανάλυση των αλληλουχιών τμήματος του γονιδίου της πολυμεράσης (pol) και της καψιδιακής πρωτεΐνης (cp) του ιού στα θετικά δείγματα, κατέδειξε ότι η γενετική παραλλακτικότητα μεταξύ των απομονώσεων ήταν μικρή, ακόμα και μεταξύ άγριων και εκτρεφόμενων πληθυσμών διαφορετικών περιοχών αλίευσης. Το γεγονός αυτό αποτελεί ισχυρή ένδειξη ότι πολλά είδη άγριων ψαριών αποτελούν δεξαμενή του ιού RGNNV, από όπου ο ιός μπορεί να μεταδοθεί στα ευαίσθητα, ελεύθερα ή εκτρεφόμενα, είδη. Στο δεύτερο κεφάλαιο αξιολογήθηκε η λοιμογόνος ικανότητα και διασπορά του ιού Red-spotted Grouper Nervous Necrosis Virus (RGNNV) στον οργανισμό, μετά από ενοφθαλμισμό του ιού στον οφθαλμό, τα βράγχια, την πλευρική γραμμή και τον οισοφάγο ιχθυδίων ευρωπαϊκού λαβρακιού, Dicentrarchus labrax. Η εκδήλωση θνησιμότητας και κλινικής συμπτωματολογίας τυπικής ιογενούς εγκεφαλοπάθειας και αμφιβληστροειδοπάθειας σε συνδυασμό με την παρατήρηση κενοτoπιώδους εκφύλισης στον εγκέφαλο και τον αμφιβληστροειδή και την ανίχνευση του ιικού γενώματος σε ιστούς λαβρακιών από όλες τις πειραματικές ομάδες, υποδηλώνουν ότι ο ιός RGNNV εισέρχεται στον οργανισμό μέσω πολλών διαφορετικών οδών. Παρόλο που ο αρχικός εντοπισμός και το μοτίβο διασποράς του στους ιστούς διέφερε μεταξύ των πειραματικών ομάδων, η εξάπλωση του ιού RGNNV στον εγκέφαλο και τον οφθαλμό φαίνεται ότι επιτυγχάνεται νευρογενώς. Ιαιμία εκδηλώθηκε μόνο μετά την εγκατάσταση της μόλυνσης στον εγκέφαλο και ενώ ο ιός είχε ήδη ανιχνευθεί σε νευρικούς ιστούς.

Download Full-text