scholarly journals Μελέτη της επίδρασης πολυμορφισμών και της έκφρασης γονιδίων στις αναπαραγωγικές παραμέτρους των χοιρινών

2014 ◽  
Author(s):  
Απόστολος Μαραντίδης
Keyword(s):  
Polymerase Chain Reaction ◽  
Restriction Fragment Length Polymorphism ◽  
Length Polymorphism ◽  
Fragment Length Polymorphism ◽  
Chain Reaction ◽  
Large White ◽  
Pcr Rflp ◽  
Polymerase Chain ◽  
Restriction Fragment Length

Σκοπός της παρούσας διδακτορικής διατριβής ήταν η μελέτη της αναπαραγωγής των χοίρων και η εν δυνάμει βελτίωση της παραγωγικότητας τους, όσων αφορά τη βελτίωση των αναπαραγωγικών χαρακτηριστικών των χοιρομητέρων με σκοπό την αύξηση των παραγόμενων χοιριδίων και την προστασία του αναπαραγωγικού συστήματος των αρσενικών και θηλυκών χοίρων από διάφορες ασθένειες. Η δομή της παρούσας διδακτορικής διατριβής χωρίζεται σε δύο Μέρη. To ΜΕΡΟΣ Α περιλαμβάνει τη μελέτη της έκφρασης γονιδίων σε διάφορα αναπαραγωγικά όργανα των χοίρων, σε σειρές κυττάρων και σε έμβρυα χοίρων παραγόμενα in vitro. Πραγματοποιήθηκε προσδιορισμός της έκφρασης των γονιδίων της οικογένειας TLR και της οικογένειας των β-defensins. Μελετήθηκε το πρότυπο έκφρασης τους στην ωοθήκη, τον ωαγωγό, τον όρχι και την επιδιδυμίδα των χοίρων, στα κοκκώδη κύτταρα που περιβάλλουν το ωάριο καθώς επίσης και σε έμβρυα χοίρων παραγόμενα in vitro. Επίσης έγινε προσδιορισμός της επίδρασης της επώασης με LPS στα επίπεδα έκφρασης των παραπάνω γονιδίων στα κοκκώδη κύτταρα για διαφορετικά χρονικά διαστήματα (0, 6, 12 και 24 ώρες) παρουσία ή μη του συστατικού LPS (Lipopolysaccharide). Το ΜΕΡΟΣ Β περιλαμβάνει τον προσδιορισμό των πολυμορφισμών γονιδίων που σχετίζονται με την αναπαραγωγή και την πιθανή τους σχέση με παραγωγικά χαρακτηριστικά των χοιρομητέρων που εκτρέφονται στην ελληνική επικράτεια. Η τεχνική που εφαρμόστηκε για την διερεύνηση των συγκεκριμένων πολυμορφισμών (SNPs) ονομάζεται PCR – RFLP (Polymerase Chain Reaction – Restriction Fragment Length Polymorphism). Συνολικά επιλέχθηκαν τρία γονίδια που σχετίζονται με αναπαραγωγικά χαρακτηριστικά σε χοιρομητέρες (γονίδιο BF, γονίδιο RBP4 και γονίδιο ESR2) τα οποία μελετήθηκαν σε 420 χοιρομητέρες που προέρχονταν από τρεις εμπορικές χοιροτροφικές μονάδες της Ελλάδας. Οι 400 προέρχονταν από μεγάλες εμπορικές μονάδες και ήταν διασταυρώσεις των φυλών Landrace/Large White ενώ τα αρσενικά Duroc/Pietrain/Landrace/Large White σε διάφορες αναλογίες. Στην πρώτη μονάδα έγινε εξαγωγή DNA σε 120 χοιρομητέρες και σε 8 αρσενικούς χοίρους ενώ στη δεύτερη μονάδα σε 280 χοιρομητέρες και σε 8 αρσενικούς χοίρους. 20 χοιρομητέρες προέρχονταν από μια εκτατική μονάδα χοίρων (ελληνικής αυτόχθονης φυλής, μαύρα ή διασταυρώσεις τους με αγριόχοιρους των ορεινών περιοχών της Μακεδονίας). Τα παραγωγικά χαρακτηριστικά που συσχετίστηκαν με τους πολυμορφισμούς των γονιδίων αφορούν το μέγεθος της τοκετομάδας και τον Αριθμό Απογαλακτισθέντων χοιριδίων.

scholarly journals Análise de polimorfismo do gene da somatotropina em vacas Nelore e seu efeito sobre o peso à desmama de suas progênies

1999 ◽  
Vol 51 (6) ◽  
pp. 565-570
Author(s):  
F.J.C. Faria ◽  
S.E.F. Guimarães ◽  
R.M.G. Lima ◽  
G.B. Mourão ◽  
L.E.L. Pinheiro
Keyword(s):  
Polymerase Chain Reaction ◽  
Restriction Fragment Length Polymorphism ◽  
Restriction Fragment ◽  
Length Polymorphism ◽  
Fragment Length ◽  
Fragment Length Polymorphism ◽  
Chain Reaction ◽  
Pcr Rflp ◽  
Polymerase Chain ◽  
Restriction Fragment Length

Informações sobre peso à desmama de um rebanho Nelore foram utilizadas após ajuste para idade padrão de 205 dias, sexo da cria, idade da mãe, touro e mês de desmama, para separar as reprodutrizes em dois grupos, cujos filhos diferiam nesse peso. As médias ajustadas pelo método dos quadrados mínimos foram para os grupos pesado (P) e leve (L) de 163,21± 2,18kg e 134,44± 2,18kg, respectivamente, com 41 animais em cada grupo. Essas reprodutrizes foram submetidas à coleta de sangue para estudo de polimorfismos do gene da somatotropina bovina, pela técnica de PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism). A amplificação de uma região entre o éxon III e V do gene da somatotropina permitiu analisar dois sítios de restrição. Para o sítio do éxon V, todos os animais foram identificados como monomórficos (Leu-Leu). Quanto ao sítio do íntron 3, foi possível identificar os seguintes genótipos 21 (+/-) e 60 (-/-), com as freqüências de 0,13 e 0,87 para os alelos (+) e (-), respectivamente. O peso dos filhos dos animais com o genótipo +/- foi de 152,42± 4,41kg e os -/- 147,60± 2,61kg. Os grupos P e L não diferiram entre si quanto às freqüências alélicas apresentadas. O genótipo das reprodutrizes não afetou o peso à desmama de suas crias, existindo portanto outros efeitos genéticos e não genéticos de maior magnitude.

scholarly journals Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism Authentication of Raw Meats from Game Birds

2008 ◽  
Vol 91 (6) ◽  
pp. 1416-1422 ◽  
Author(s):  
María Rojas ◽  
Isabel González ◽  
Violeta Fajardo ◽  
Irene Martín ◽  
Pablo E Hernández ◽  
...  
Keyword(s):  
Polymerase Chain Reaction ◽  
Restriction Fragment Length Polymorphism ◽  
Restriction Fragment ◽  
Length Polymorphism ◽  
Fragment Length ◽  
Fragment Length Polymorphism ◽  
Chain Reaction ◽  
Pcr Rflp ◽  
Polymerase Chain ◽  
Restriction Fragment Length

Abstract Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis has been applied to the identification of meats from quail (Coturnix coturnix), pheasant (Phasianus colchicus), red-legged partridge (Alectoris rufa), guinea fowl (Numida meleagris), capercaillie (Tetrao urogallus), Eurasian woodcock (Scolopax rusticola), woodpigeon (Columba palumbus), and song thrush (Turdus philomelos). PCR amplification was performed using a set of primers flanking a conserved region of approximately 720 base pairs (bp) from the mitochondrial 12S rRNA gene. Restriction site analysis based on sequence data from this DNA fragment permitted the selection of Alul and BfaI endonucleases for species identification. The restriction profiles obtained when amplicons were digested with the chosen enzymes allowed the unequivocal identification of all game bird species analyzed. However, the use of the PCR-RFLP technique described is limited to raw meat authentication. It is not suitable for cooked products because thermal treatment strongly accelerates DNA degradation leading to difficulties in amplifying the 720 bp fragment.

Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document