Проведен сравнительный морфофункциональный мониторинг популяции донорских ооцитов, выделенных из яичников коров post mortem на разных стадиях овариального цикла, с учетом статуса хроматина и интрацитоплазматической локализации митохондрий ооцит-кумулюсных комплексов. Анализу подвергались ооциты, полученные из антральных фолликулов (Ø 2—6 мм), окруженные не менее, чем 5—6 слоями клеток кумулюса. Показано, что 45% и 50% ооцитов, выделенных из яичников на стадии фолликулярного роста и развитого жёлтого тела, соответственно, имеют периферическую локализацию митохондрий в ооплазме. Доля созревших ооцитов с периферической и равномерной локализацией митохондрий на момент аспирации их из яичников составила 88 и 85% соответственно, а уровень созревших ооцитов в группе с кластерным типом локализации достиг лишь 66%. В группе ооцитов с кластерной локализацией митохондрий отмечен высокий уровень ооцитов с дегенерированным хроматином после 24 ч культивирования (90%) по сравнению с группами с периферической и равномерной локализацией митохондрий (2 и 41% соответственно, P < 0,001). Ооциты с периферической локализацией митохондрий характеризовались гомогенной ооплазмой (58%). Гаметы с кластерным распределением митохондрий в основном имели гетерогенную ооплазму (52%), а клетки с равномерным распределением — гомо- и гетерогенную ооплазму (29 и 36% соответственно).
A comparative monitoring of the population of cow donor oocytes isolated from ovaries at different stages of the ovarian cycle was carried out, the chromatin status and the intracytoplasmic localization of mitochondria of oocyte-cumulus complexes were evaluated. Oocytes obtained from antral follicles (Ø 2-6 mm) were analyzed. Gametes were cultured at a temperature of 38.5°C, in an atmosphere with 5% CO2, 90% humidity for 24 hours in T-199 medium supplemented with 10% fetal bovine serum, 106 granulosa cells/ml, 50 ng/ml bovine prolactin. Mitochondria were visualized with using of vital dye rhodamine 123, the chromatin status was assessed by Tarkowski`s cytogenetic method. It was demonstrated that 45% and 50% of oocytes isolated from the ovaries in the stage of follicular growth and developed corpus luteum had a peripheral localization of mitochondria in ooplasm. The proportion of mature oocytes with the peripheral and spread localizations of mitochondria were 88% and 85%, respectively, while the maturation rate of oocytes with the mitochondrial clusters reached only 66%. Among oocytes with cluster distribution of mitochondria a high percent of cells with signs of chromatin degeneration after 24 h culture was noted (90%) compared with groups of oocutes with peripheral and spread distribution (2% and 41%, respectively, P<0,001). Oocytes with the peripheral localization of mitochondria were characterised by homogeneous ooplasm (58%). Gametes with the clusters mostly had a heterogeneous ooplasm (52%), and cells with the spread distribution – homo- and heterogeneous ooplasm (29% and 36%, respectively).
Having a baby in your 40s with assisted reproductive technology: The reproductive dilemma of autologous versus donor oocytes
