scholarly journals Molecular Identification of Nocardia Strains from the Soil by hsp65 Gene: Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) and Analysis of Sequence 16S rRNA Gene

2018 ◽  
Vol 13 (4) ◽  
Author(s):  
Masoumeh Rasouli nasab ◽  
Shadi Habibnia ◽  
Parvin Heidarieh ◽  
Mehdi Fatahi-Bafghi ◽  
Abdolrazagh Hashemi-Shahraki ◽  
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2002 ◽  
Vol 65 (4) ◽  
pp. 692-695 ◽  
Author(s):  
ALICIA FERNÁNDEZ ◽  
TERESA GARCÍA ◽  
ISABEL GONZÁLEZ ◽  
LUIS ASENSIO ◽  
MIGUEL ÁNGEL RODRÍGUEZ ◽  
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Specific identification of four clam species, Ruditapes decussatus (grooved carpet shell), Venerupis pullastra (pullet carpet shell), Ruditapes philippinarum (Japanese carpet shell), and Venerupis rhomboides (yellow carpet shell), was achieved by polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism analysis of a fragment of the mitochondrial 16S rRNA gene. Amplification of DNA isolated from the foot muscle produced fragments of 511 bp for V. pullastra, 523 bp for R. decussatus, 545 bp for R. philippinarum, and 502 bp for V. rhomboides. The restriction profiles obtained by agarose gel electrophoresis when amplicons were digested with endonucleases BsmAI and BsrI allowed unequivocal identification of the four clam species. This approach would be less costly, simpler, and quicker than conventional sequencing of polymerase chain reaction products followed by detailed comparison of individual sequences, especially when large numbers of samples need to be analyzed.


2003 ◽  
Vol 38 (8) ◽  
pp. 911-920 ◽  
Author(s):  
Marcelo Ferreira Fernandes ◽  
Roberta Pereira Miranda Fernandes ◽  
Mariangela Hungria

O objetivo deste trabalho foi caracterizar geneticamente sete estirpes de rizóbios nativos dos tabuleiros costeiros de Sergipe com alta eficiência de fixação biológica do N2 em associação com guandu (Cajanus cajan) e caupi (Vigna unguiculata). A amplificação do DNA pela técnica de PCR (polymerase chain reaction) com o oligonucleotídeo específico BOX indicou um grau elevado de diversidade genética, uma vez que todas as estirpes apresentaram perfis únicos de DNA. A análise por BOX-PCR revelou, ainda, que essa metodologia é eficiente para diferenciar estirpes, mas não para a diferenciação de espécies de rizóbio. Pela técnica do RFLP (restriction fragment length polymorphism) da região do DNA que codifica o gene 16S rRNA e da região intergênica entre os genes 16S e 23S rRNA, com cinco enzimas de restrição, bem como pelo seqüenciamento parcial da região do 16S rRNA, foi possível classificar as estirpes nos gêneros Bradyrhizobium e Rhizobium. Houve coerência entre as análises envolvendo a região do 16S rRNA, mas o agrupamento com uma das estirpes diferiu pela análise do espaço intergênico. Os resultados obtidos com a estirpe R11 indicam variabilidade genética elevada em relação às espécies de rizóbios descritas, inclusive diferindo em diversas bases da região do 16S rRNA, e podem indicar uma nova espécie.


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