Evaluación de la actividad inmunogénica de una vacuna para profilaxis de la anaplasmosis bovina

<p>El objetivo de este trabajo fue formular una vacuna criopreservada para la prevención de la anaplasmosis y evaluar su actividad inmunogénica. Se utilizó una vacuna monovalente de 2,5x107 eritrocitos bovinos infectados con Anaplasma centrale, criopreservada en glicerol en dosis de 0,5 ml. Para ello se seleccionaron 20 terneros entre 4-10 meses de edad, libres de anaplasmosis, de un establecimiento ubicado en la Provincia de Corrientes, Argentina. El lote fue dividido en dos grupos iguales, uno recibió la vacuna criopreservada y el otro se utilizó como grupo control sin vacunación. Se tomaron muestras de suero a los 0, 30 y 60 días post-vacunación (dpv) y se evaluó la inmunidad inducida por la vacuna mediante ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) en suero. A los 15-30-45 y 60 dpv se analizaron muestras de sangre de 3 terneros de cada grupo para la identificación y diferenciación de Anaplasma sp mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR). ELISA resultó negativa para los 20 terneros analizados en el día de la vacunación; a los 30 dpv dos terneros del grupo vacunado resultaron positivos mientras que los terneros del grupo control fueron negativos. A los 60 dpv el 80% de los terneros del grupo vacunado fue positivo al ELISA y dos animales del grupo control resultaron sospechosos. La PCR reveló la presencia de A. centrale a los 60 dpv no solo en los tres terneros del grupo vacunado sino también en los tres del grupo control, hecho que podría atribuirse a la transmisión horizontal por iatrogenia o a través de vectores. A. marginale no fue identificado. La falta de detección de anticuerpos específicos a los 60 dpv en dos terneros vacunados, no analizados por PCR, podría responder a un período de incubación más prolongado, y hubiera requerido un control posterior. Se concluye que la vacuna monovalente de A. centrale criopreservada confirió una inmunidad adecuada para la profilaxis de la anaplasmosis en terneros, resultando una alternativa válida para establecimientos de zonas libres de garrapatas. Se confirmó la ausencia de A. marginale en el rodeo analizado y la transmisión horizontal de la cepa vacunal.</p>

Prevalence of Tick Borne Haemoparasites in Some Breeds of Cattle and Goats Slaughtered in Some Abattoirs within Makurdi, Nigeria

This study was carried out to compare the prevalence of tick-borne hemiparasite in some variety of cattle and goat in Makurdi. The thin blood film technique was used in the study. Chi-square (X2) test was used to compare the prevalence rates. Breed of cattle examined was: White Fulani (45.2%), N'dama (35.5%) and Muturu (19.3%); While those of goats were: West African Dwarf (16.7%), Adamawa Red (37.3%) and Red Sokoto (46.1%). Haemoparasites of cattle and goats and their prevalence were: Anaplasma centrale (22.4%), A. marginale (21.1%), Bebesia bovis (11.4%); A. centrale (16.7%), A. marginale (12.3%), B. ovis (11.4%) and Theileria ovis (7.8%) respectively. The prevailing tick-borne hemiparasites detected were A. central, A. marginale and B. bovis, in cattle and A. central, A. marginale, B. ovis and T. ovis in goats.

Controle de anaplasmose bovina através de imunização com Anaplasma centrale

RESUMO: A anaplasmose bovina é uma das principais causas de perdas produtivas e mortes no Rio Grande do Sul em rebanhos bovinos. O Anaplasma marginale é o principal agente causador da enfermidade e provoca hipertermia, anemia, prostração, abortos e perdas produtivas nos bovinos acometidos. Tendo em vista o controle deste hemoparasita em uma propriedade leiteira localizada no município de Eldorado do Sul no Rio Grande do Sul, na qual a incidência da doença era alta, 471 animais foram imunizados com Anaplasma centrale na busca de desenvolvimento cruzado para Anaplasma marginale. No experimento foi verificado que a incidência que normalmente era acima de 30% na propriedade passou para níveis inferiores a 5%. No entanto, foram verificados abortos decorrentes da imunização, principalmente nos animais que possuíam menos de 90 dias de prenhes. Já o número de mortes globais na fazenda caiu consideravelmente tendo em vista que a principal causa de morte era a anaplasmose bovina. Dos animais inoculados com A. centrale em torno de 15% apresentaram sintomatologia clínica da enfermidade e precisaram ser tratados com oxitetraciclina no período entre 15 e 30 dias após a imunização. O custo com tratamento empregado na propriedade posterior à imunização caiu em torno de 85% o que provocou impacto significativo economicamente na propriedade.

Comparison of three nucleic acid-based tests for detecting Anaplasma marginale and Anaplasma centrale in cattle

Several nucleic acid-based assays have been developed for detecting Anaplasma marginale and Anaplasma centrale in vectors and hosts, making the choice of method to use in endemic areas difficult. We evaluated the ability of the reverse line blot (RLB) hybridisation assay, two nested polymerase chain reaction (nPCR) assays and a duplex real-time quantitative polymerase chain reaction (qPCR) assay to detect A. marginale and A. centrale infections in cattle (n = 66) in South Africa. The lowest detection limits for A. marginale plasmid DNA were 2500 copies by the RLB assay, 250 copies by the nPCR and qPCR assays and 2500, 250 and 25 copies of A. centrale plasmid DNA by the RLB, nPCR and qPCR assays respectively. The qPCR assay detected more A. marginale- and A. centrale-positive samples than the other assays, either as single or mixed infections. Although the results of the qPCR and nPCR tests were in agreement for the majority (38) of A. marginale-positive samples, 13 samples tested negative for A. marginale using nPCR but positive using qPCR. To explain this discrepancy, the target sequence region of the nPCR assay was evaluated by cloning and sequencing the msp1β gene from selected field samples. The results indicated sequence variation in the internal forward primer (AM100) area amongst the South African A. marginale msp1β sequences, resulting in false negatives. We propose the use of the duplex qPCR assay in future studies as it is more sensitive and offers the benefits of quantification and multiplex detection of both Anaplasma spp.