<p><strong>Introducción.</strong> La producción de proteínas recombinantes es fundamental para el estudio funcional de proteínas de <em>Plasmodium</em> <em>falciparum</em>. Sin embargo, las proteínas recombinantes de <em>P</em>. <em>falciparum</em> están entre las más difíciles de expresar y cuando lo hacen usualmente se agregan dentro de cuerpos de inclusión insolubles.</p><p><strong>Objetivo.</strong> Evaluar la producción de cuatro proteínas de <em>P. falciparum</em>, usando como sistema de expresión dos cepas de <em>Escherichia coli </em>genéticamente modificadas para favorecer la producción de proteínas heterólogas y establecer una reserva de proteínas recombinantes puras y solubles y producir anticuerpos policlonales a partir de ellas.<strong></strong></p><p><strong>Materiales y métodos.</strong> Las proteínas recombinantes, las cuales correspondían a secuencias parciales de PfMyoA (Miosina-A) y PfGAP50 (proteína-asociada a glideosoma-50 kDa) y a las secuencias completas de PfMTIP (proteína de interacción con Miosina-A) y PfGAP45 (proteína asociada a glideosoma-45 kDa), fueron expresadas como proteínas de fusión con GST y luego purificadas y usadas para producir anticuerpos policlonales en ratón.</p><p><strong>Resultados.</strong> La expresión de las proteínas recombinantes fue mucho más eficiente en la cepa BL21-CodonPlus (la cual expresa tRNAs escasos en las bacterias silvestres), que en la cepa BL21-pG-KJE8. En contraste, aunque la cepa BL21-pG-KJE sobreexpresa chaperonas, no redujo la formación de cuerpos de inclusión. <strong>Conclusión.</strong> El uso de cepas de <em>E</em>. <em>coli</em> genéticamente modificadas fue fundamental para alcanzar altos niveles de expresión de las cuatro proteínas recombinantes evaluadas y permitió obtener dos de ellas en forma soluble. La estrategia utilizada permitió expresar cuatro proteínas recombinantes de <em>P</em>. <em>falciparum</em> en cantidad suficiente para inmunizar ratones y producir anticuerpos policlonales, y además conservar proteína pura y soluble de dos de ellas, para ensayos futuros.</p>
Construction and use of new cloning vectors for the rapid isolation of recombinant proteins from Escherichia coli