Phytochrome-Controlled Fern-Spore Germination, Kinetics of Pfr Action

1989 ◽  
Vol 135 (1) ◽  
pp. 31-36 ◽  
Author(s):  
Wolfgang Haupt ◽  
George K. Psaras
2012 ◽  
Author(s):  
Μαρία Γουγουλή

Η επιμόλυνση και η αποίκηση της γιαούρτης με μύκητες είναι ίσως το πιο σημαντικό πρόβλημα ποιότητας για τα προϊόντα γιαούρτης με σημαντικές οικονομικές επιπτώσεις για τη βιομηχανία γάλακτος. Το βασικό αντικείμενο της παρούσας διδακτορικής έρευνας ήταν η ανάπτυξη αποτελεσματικών εργαλείων ποσοτικής μυκητολογίας, τα οποία μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη βελτίωση των συστημάτων ελέγχου μυκήτων στην παραγωγή γιαούρτης. Το πρώτο μέρος της έρευνας επικεντρώθηκε στην ανάπτυξη μαθηματικών μοντέλων για την πρόβλεψη της επίδρασης της θερμοκρασίας και του επιπέδου εμβολίου στην ανάπτυξη 12 στελεχών διαφορετικών ειδών μυκήτων οι οποίοι απομονώθηκαν από το περιβάλλον παραγωγής γιαούρτης. Σημαντικές διαφορές παρατηρήθηκαν μεταξύ των στελεχών σχετικά με τη θερμοκρασιακή εξάρτηση της μυκηλιακής τους αύξησης. Με βάση τα αποτελέσματα, αναπτύχθηκε ένα λεπτομερές σχέδιο εφαρμογής των μοντέλων για την επιλογή των κατάλληλων συνθηκών των δοκιμών ελέγχου για την παρουσία μυκήτων στη γιαούρτη. Λαμβάνοντας υπόψη ότι οι διακυμάνσεις της θερμοκρασίας κατά τη διάρκεια της διανομής και αποθήκευσης της γιαούρτης αποτελούν συχνό φαινόμενο, τα μοντέλα που αναπτύχθηκαν αξιολογήθηκαν περαιτέρω σε δυναμικές συνθήκες θερμοκρασίας. Μετά τις παραπάνω μελέτες που διεξήχθησαν σε υψηλό επίπεδο πληθυσμού σπορίων, η έρευνα επεκτάθηκε στην αξιολόγηση και περιγραφή της συμπεριφοράς μυκήτων σε επίπεδο μεμονωμένων σπορίων. Μοντέλα που περιγράφουν τη συμπεριφορά μεμονωμένων σπορίων μυκήτων μπορεί να οδηγήσουν σε πιο ρεαλιστικές προβλέψεις, δεδομένου ότι στην πράξη η επιμόλυνση των τροφίμων με μύκητες συμβαίνει από πολύ χαμηλούς αριθμούς σπορίων. Η εκβλάστηση σπορίων μυκήτων παρατηρήθηκε μικροσκοπικά και τα δεδομένα εκβλάστησης μοντελοποιήθηκαν με τη βοήθεια πρωτογενών και δευτερογενών μοντέλων. Η εκβλάστηση των σπορίων μελετήθηκε, επίσης, σε διάφορες δυναμικές θερμοκρασιακές συνθήκες. Η σύγκριση μεταξύ των προβλεπόμενων και παρατηρούμενων δεδομένων έδειξαν ότι η εκβλάστηση των σπορίων επηρεάζεται έντονα από το βαθμό της θερμοκρασιακής μεταβολής, το ποσοστό των εκβλαστημένων σπορίων τη στιγμή της μεταβολής της θερμοκρασίας, καθώς και από το είδος του μύκητα. Η σχέση μεταξύ του χρόνου εκβλάστησης και του χρόνου φάσης προσαρμογής της μυκηλιακής ανάπτυξης μεμονωμένων σπορίων μελετήθηκε επίσης με συνδυασμό μικροσκοπικών και μακροσκοπικών τεχνικών. Η αύξηση ενός μεγάλου αριθμού μυκηλίων που προέρχονται από μεμονωμένα σπόρια μελετήθηκε μακροσκοπικά για τον προσδιορισμό του χρόνου φάσης προσαρμογής. Παρατηρήθηκε πως οι κατανομές των χρόνων φάσης προσαρμογής παρουσίασαν μία σημαντική χρονική καθυστέρηση σε σχέση με τις κατανομές του χρόνου εκβλάστησης. Προκειμένου να διερευνηθεί η πηγή της παραπάνω διαφοράς αναπτύχθηκε μια μικροσκοπική μέθοδος συνεχούς παρατήρησης παρέχοντας βίντεο με την συμπεριφορά των μεμονωμένων σπορίων μυκήτων από την εκβλάστηση μέχρι το σχηματισμό μυκήλιων. Εκτός από το επιστημονικό ενδιαφέρον για την κατανόηση της συμπεριφοράς των μυκήτων, τα ευρήματα αυτής της έρευνας μπορούν να εφαρμοστούν άμεσα από τη βιομηχανία γιαούρτης για τη βελτίωση των συστημάτων ελέγχου της ποιότητας. Για παράδειγμα, τα μοντέλα που αναπτύχθηκαν μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως βάση για την επιλογή των κατάλληλων συνθηκών των δοκιμών πρόκλησης για την ανίχνευση μυκήτων σε γιαούρτη. Μέτρα ελέγχου ποιότητας βασισμένα σε επιστημονικά δεδομένα μπορούν να οδηγήσουν σε μια επιτυχημένη διαδικασία λήψης αποφάσεων για τη βελτίωση της ποιότητας. Επιπλέον, η ποσοτική περιγραφή της παραλλακτικότητας στη συμπεριφορά μεμονωμένων σπορίων μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εκτίμηση επικινδυνότητας της αλλοίωσης και την ανάπτυξη δραστικών συστημάτων διαχείρισης ποιότητας για προϊόντα τύπου γιαούρτης.


2018 ◽  
Vol 84 (7) ◽  
Author(s):  
Lin He ◽  
Zhan Chen ◽  
Shiwei Wang ◽  
Muying Wu ◽  
Peter Setlow ◽  
...  

ABSTRACTDNA damage kills dry-heated spores ofBacillus subtilis, but dry-heat-treatment effects on spore germination and outgrowth have not been studied. This is important, since if dry-heat-killed spores germinate and undergo outgrowth, toxic proteins could be synthesized. Here, Raman spectroscopy and differential interference contrast microscopy were used to study germination and outgrowth of individual dry-heat-treatedB. subtilisandBacillus megateriumspores. The major findings in this work were as follows: (i) spores dry-heat-treated at 140°C for 20 min lost nearly all viability but retained their Ca2+-dipicolinic acid (CaDPA) depot; (ii) in most cases, dry-heat treatment increased the average times and variability of all major germination events inB. subtilisspore germination with nutrient germinants or CaDPA, and in one nutrient germination event withB. megateriumspores; (iii)B. subtilisspore germination with dodecylamine, which activates the spore CaDPA release channel, was unaffected by dry-heat treatment; (iv) these results indicate that dry-heat treatment likely damages spore proteins important in nutrient germinant recognition and cortex peptidoglycan hydrolysis, but not CaDPA release itself; and (v) analysis of single spores incubated on nutrient-rich agar showed that while dry-heat-treated spores that are dead can complete germination, they cannot proceed into outgrowth and thus not to vegetative growth. The results of this study provide new information on the effects of dry heat on bacterial spores and indicate that dry-heat sterilization regimens should produce spores that cannot outgrow and thus cannot synthesize potentially dangerous proteins.IMPORTANCEMuch research has shown that high-temperature dry heat is a promising means for the inactivation of spores on medical devices and spacecraft decontamination. Dry heat is known to killBacillus subtilisspores by DNA damage. However, knowledge about the effects of dry-heat treatment on spore germination and outgrowth is limited, especially at the single spore level. In the current work, Raman spectroscopy and differential interference contrast microscopy were used to analyze CaDPA levels in and kinetics of nutrient- and non-nutrient germination of multiple individual dry-heat-treatedB. subtilisandBacillus megateriumspores that were largely dead. The outgrowth and subsequent cell division of these germinated but dead dry-heat-treated spores were also examined. The knowledge obtained in this study will help understand the effects of dry heat on spores both on Earth and in space, and indicates that dry heat can be safely used for sterilization purposes.


2001 ◽  
Vol 91 (4) ◽  
pp. 179-186 ◽  
Author(s):  
E. Sheffield ◽  
G. E. Douglas ◽  
S. J. Hearne ◽  
S. Huxham ◽  
J. M. Wynn

2015 ◽  
Vol 10 (4) ◽  
pp. 358-376 ◽  
Author(s):  
Jinwei Suo ◽  
Sixue Chen ◽  
Qi Zhao ◽  
Lei Shi ◽  
Shaojun Dai

1965 ◽  
Vol 89 (5) ◽  
pp. 1180-1185 ◽  
Author(s):  
Neil G. McCormick

1969 ◽  
Vol 64 (3) ◽  
pp. 835-842 ◽  
Author(s):  
E. S. Weinberg ◽  
B. R. Voeller

2011 ◽  
Vol 77 (10) ◽  
pp. 3368-3379 ◽  
Author(s):  
Guiwen Wang ◽  
Pengfei Zhang ◽  
Peter Setlow ◽  
Yong-qing Li

ABSTRACTRaman spectroscopy and differential interference contrast (DIC) microscopy were used to monitor the kinetics of nutrient and nonnutrient germination of multiple individual untreated and wet-heat-treated spores ofBacillus cereusandBacillus megaterium, as well as of several isogenicBacillus subtilisstrains. Major conclusions from this work were as follows. (i) More than 90% of these spores were nonculturable but retained their 1:1 chelate of Ca2+and dipicolinic acid (CaDPA) when incubated in water at 80 to 95°C for 5 to 30 min. (ii) Wet-heat treatment significantly increased the time,Tlag, at which spores began release of the great majority of their CaDPA during the germination ofB. subtilisspores with different nutrient germinants and also increased the variability ofTlagvalues. (iii) The time period, ΔTrelease, betweenTlagand the time,Trelease, at which a spore germinating with nutrients completed the release of the great majority of its CaDPA, was also increased in wet-heat-treated spores. (iv) Wet-heat-treated spores germinating with nutrients had higher values ofIrelease, the intensity of a spore's DIC image atTrelease, than did untreated spores and had much longer time periods, ΔTlys, for the reduction inIreleaseintensities to the basal value due to hydrolysis of the spore's peptidoglycan cortex, probably due at least in part to damage to the cortex-lytic enzyme CwlJ. (v) Increases inTlagand ΔTreleasewere also observed when wet-heat-treatedB. subtilisspores were germinated with the nonnutrient dodecylamine, while the change inIreleasewas less significant. (vi) The effects of wet-heat treatment on nutrient germination ofB. cereusandB. megateriumspores were generally similar to those onB. subtilisspores. These results indicate that (i) some proteins important in spore germination are damaged by wet-heat treatment, (ii) the cortex-lytic enzyme CwlJ is one germination protein damaged by wet heat, and (iii) the CaDPA release process itself seems likely to be the target of wet-heat damage which has the greatest effect on spore germination.


Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document