scholarly journals White pupae phenotype of tephritids is caused by parallel mutations of a MFS transporter

2021 ◽  
Vol 12 (1) ◽  
Author(s):  
Christopher M. Ward ◽  
Roswitha A. Aumann ◽  
Mark A. Whitehead ◽  
Katerina Nikolouli ◽  
Gary Leveque ◽  
...  

AbstractMass releases of sterilized male insects, in the frame of sterile insect technique programs, have helped suppress insect pest populations since the 1950s. In the major horticultural pests Bactrocera dorsalis, Ceratitis capitata, and Zeugodacus cucurbitae, a key phenotype white pupae (wp) has been used for decades to selectively remove females before releases, yet the gene responsible remained unknown. Here, we use classical and modern genetic approaches to identify and functionally characterize causal wp− mutations in these distantly related fruit fly species. We find that the wp phenotype is produced by parallel mutations in a single, conserved gene. CRISPR/Cas9-mediated knockout of the wp gene leads to the rapid generation of white pupae strains in C. capitata and B. tryoni. The conserved phenotype and independent nature of wp− mutations suggest this technique can provide a generic approach to produce sexing strains in other major medical and agricultural insect pests.

Author(s):  
CM Ward ◽  
RA Aumann ◽  
MA Whitehead ◽  
K Nikolouli ◽  
G Leveque ◽  
...  

AbstractMass releases of sterilized male insects, in the frame of sterile insect technique programs, have helped suppress insect pest populations since the 1950s. In the major horticultural pests Bactrocera dorsalis, Ceratitis capitata, and Zeugodacus cucurbitae, a key phenotype white pupae (wp) has been used for decades to selectively remove females before releases, yet the gene responsible remained unknown. Here we use classical and modern genetic approaches to identify and functionally characterize causal wp− mutations in these distantly related fruit fly species. We find that the wp phenotype is produced by parallel mutations in a single, conserved gene. CRISPR/Cas9-mediated knockout of the wp gene leads to the rapid generation of novel white pupae strains in C. capitata and B. tryoni. The conserved phenotype and independent nature of the wp− mutations suggest that this technique can provide a generic approach to produce sexing strains in other major medical and agricultural insect pests.


Author(s):  
Rubén Sancho ◽  
Ana Guillem-Amat ◽  
Elena López-Errasquín ◽  
Lucas Sánchez ◽  
Félix Ortego ◽  
...  

AbstractThe sterile insect technique (SIT) is widely used in integrated pest management programs for the control of the Mediterranean fruit fly (medfly), Ceratitis capitata. The genetic interactions between the released individuals from the genetic sexing strains (GSS), used for SIT applications worldwide, and wild individuals have not been studied. Under the hypothesis that a number of Vienna GSS individuals released to the field might not be completely sterile and may produce viable offspring, we have analyzed medfly Spanish field populations to evaluate the presence of Vienna strain genetic markers. To this goal, we have used contrasted nuclear and mitochondrial genetic markers, and two novel sets of nuclear polymorphisms with the potential to be markers to discriminate between Vienna and wild individuals. Nuclear Vienna markers located on the 5th chromosome of Vienna males have been found in 2.2% (19 from 875) of the Spanish wild medfly females captured at the area where SIT is applied. In addition, a female-inherited mitochondrial Vienna marker has been found in two from the 19 females showing nuclear Vienna markers. The detection of several of these markers in single individuals represents evidence of the introgression of Vienna strain into natural populations. However, alternative explanations as their presence at low frequency in wild populations in the studied areas cannot be fully discarded. The undesired release of non-fully sterile irradiated GSS individuals into the field and their interactions with wild flies, and the potential environmental implications should be taken into account in the application of the SIT.


2019 ◽  
Vol 22 (2) ◽  
pp. 458-470 ◽  
Author(s):  
Peter A. Follett ◽  
Jaime Pinero ◽  
Steve Souder ◽  
Lisa Jamieson ◽  
Barbara Waddell ◽  
...  

Insects ◽  
2020 ◽  
Vol 11 (11) ◽  
pp. 802
Author(s):  
Farhan J.M. Al-Behadili ◽  
Manjree Agarwal ◽  
Wei Xu ◽  
Yonglin Ren

The Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae), is one of the most damaging horticultural insect pests. This study used a low-oxygen/high-nitrogen bioassay to control C. capitata. Two low-oxygen treatments were applied (0.5% O2 + 99.5 N2 and 5% O2 + 95% N2) to C. capitata eggs and 1st, 2nd and 3rd instar larvae from 0 to nine days on a carrot diet at 25 °C; 70—75% RH. The pupariation, adult emergence, and sex ratios of survived flies were examined. The results demonstrate that increased mortality of all tested life stages correlated with increased exposure times at both levels of low-oxygen treatments. Complete control of eggs was achieved after eight days and nine days for larvae using 0.5% O2 at 25 °C; 70–75% RH. The 3rd instar was the most tolerant stage, while the egg was the most susceptible stage to the low-oxygen environment. There were no significant differences in sex ratios between emerged adults after low-oxygen and control treatments. The present work demonstrates and confirms the mortalities of C. capitata caused by low-oxygen treatment, which may help develop new postharvest strategies to control this destructive fruit fly pest.


Insects ◽  
2021 ◽  
Vol 13 (1) ◽  
pp. 42
Author(s):  
Rudsamee Wasuwan ◽  
Natnapha Phosrithong ◽  
Boonhiang Promdonkoy ◽  
Duangjai Sangsrakru ◽  
Chutima Sonthirod ◽  
...  

Five isolates of Metarhizium sp. were evaluated for their pathogenicity against the spider mite (Tetranychus truncatus Ehara) (Acari: Tetranychidae) and Metarhizium sp. BCC 4849 resulted in the highest mortality (82%) on the 5th day post-inoculation (DPI). Subsequent insect bioassay data indicated similar high virulence against five other insects: African red mites (Eutetranychus africanus Tucker) (Acari: Tetranychidae), bean aphid (Aphis craccivora Koch) (Hemiptera: Aphididae), cassava mealybug (Phenacoccus manihoti Matile-Ferrero) (Hemiptera: Pseudococcidae), sweet potato weevil (Cylas formicarius Fabricius) (Coleoptera: Brentidae), and oriental fruit fly (Bactrocera dorsalis Hendel) (Diptera: Tephritidae), at mortalities of 92–99%, on 3rd–6th DPI, and in laboratory conditions. The pathogenicity assay against E. africanus in hemp plants under greenhouse conditions indicated 85–100% insect mortality on 10th DPI using the fungus alone or in combination with synthetic acaricide. Genome sequencing of Metarhizium sp. BCC 4849 revealed the high abundance of proteins associated with zinc-, heme-, and iron-binding; oxidation-reduction; and transmembrane transport, implicating its versatile mode of interaction with the environment and adaptation to various ion homeostasis. The light and scanning electron microscopy indicated that at 24 h post inoculation (PI), adhesion and appressorial formation occurred, notably near the setae. Most infected mites had stopped moving and started dying by 48–72 h PI. Elongated hyphal bodies and oval blastospores were detected in the legs. At 96–120 h PI or longer, dense mycelia and conidial mass had colonized the interior and exterior of dead mites, primarily at the bottom than the upper part. The shelf-life study also indicated that conidial formulation combined with an oxygen-moisture absorber markedly enhanced the viability and germination after storage at 35 °C for four months. The fungus was tested as safe for humans and animals, according to our toxicological assays.


2019 ◽  
Vol 112 (6) ◽  
pp. 2808-2816 ◽  
Author(s):  
Suhana Yusof ◽  
Ahmad Zainuri Mohamad Dzomir ◽  
Salmah Yaakop

Abstract The aim of this study was to investigate the effect of gamma irradiation on survivability (adult emergence, sex ratio, adult longevity), fecundity (eggs hatchability, number of eggs produced), and morphological differences in the size of the ovary and testes of unirradiated and irradiated adults of Oriental fruit fly [Bactrocera dorsalis (Hendel)]. A dose of 100 Gy was determined as the minimum needed for inhibitory effects against B. dorsalis that would not deter adult emergence, sex ratio (male:female), and adult longevity, with 82.6 ±7.02, 1:1.09, and 107 ± 24.5, respectively. Doses from 50 to 400 Gy range did not completely prevent the adult emergence; however, the emergence decreased by increasing the radiation dose. Adult survivability significantly decreased among all the treatment groups of B. dorsalis, except for the 50 Gy and unirradiated flies. At a dose of 50 Gy, fertile females showed a significant reduction in fecundity by not producing eggs after mating with the sterile males. Meanwhile, the number of eggs laid decreased with increasing dose and no fertile egg was hatched starting at 100 Gy of irradiation. Testes and ovaries of 20-d old flies irradiated as pupae were smaller than those of control flies. In this study, 100 Gy was concluded as the minimum effective dose for the disinfestation and sterilization of B. dorsalis puparia. Results represent new findings used as a basis for sterile insect technique and quarantine programs for managing B. dorsalis, particularly in Malaysia.


2016 ◽  
Vol 13 (2) ◽  
pp. 50-60 ◽  
Author(s):  
A Zahan ◽  
MA Latif ◽  
MA Hossain ◽  
SA Khan ◽  
MJ Rahman

The study was conducted to establish the Sterile Insect Technique (SIT) method of controlling oriental fruit fly, Bactrocera dorsalis (Hendel). The sterile male ratio of oriental fruit fly was optimized for possible field application of Sterile Insect Technique. Several batches of 5 and 6-dayold pupae were irradiated at 30, 40, 50 and 60 Gray (Gy) to optimize the radiation dose of sterilization. Highest pupal duration and abnormal adults were found after imposing gamma radiation in 5-day-old pupae treated with 60 Gy dose. Radiation significantly increased the nonemergence percentage and decreased the normal emergence of oriental fruit fly. The sterilizing doses were recorded as 60 Gy for 5-dayold pupae. Fixed number of virgin females of oriental fruit flies were allowed to mate with unirradiated and irradiated males at 1:1, 1:2, 1:5 and 1:9 ratios in different cages to find out the rate of suppression against wild population. Minimum pupal recovery and percent normal emergence observed at 1:9 ratio. Deformed and undeveloped (not emerged) population increased with the ratio of irradiated males. The 1:9 ratio was found as the best for suppression of wild population of B. dorsalis.SAARC J. Agri., 13(2): 50-60 (2015)


2016 ◽  
Author(s):  
Γεώργιος Κυρίτσης

Μελετήθηκε η επίδραση του ενδοκυτταρικού βακτηρίου Wolbachia pipientis σε βασικές παραμέτρους της ζωής της μύγας της Μεσογείου, Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae), καταγράφηκε η σύσταση της βακτηριακής κοινότητας του πεπτικού της συστήματος και μελετήθηκε η προβιοτική δράση του απομονωθέντος βακτηριακού είδους Enterobacter sp. στη φυλή Vienna 8 GSS του εντόμου, η οποία εκτρέφεται μαζικά για την κάλυψη των αναγκών των προγραμμάτων εξαπόλυσης στειρωμένων εντόμων (Sterile Insect Technique). Στην πρώτη ενότητα πειραμάτων που πραγματοποιήθηκαν στο εργαστήριο Εντομολογίας και Γεωργικής Ζωολογίας του Πανεπιστημίου Θεσσαλίας μελετήθηκαν σε εργαστηριακές συνθήκες και με έντομα αποικιών που εκτρέφονταν σε μικρούς πληθυσμούς, βασικές βιολογικές και συμπεριφορικές προσαρμογές του εντόμου συνεπεία της βακτηριακής μόλυνσης με Wolbachia. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η μόλυνση με Wolbachia: α) δεν επηρέασε την πρόοδο της αναπαραγωγικής ωρίμανσης των θηλυκών ούτε το συνολικό αριθμό ώριμων αυγών στις ωοθήκες τους, τόσο εκείνων που τράφηκαν στο στάδιο του ενηλίκου με υδρολυμένη μαγιά και ζάχαρη όσο και εκείνων που τράφηκαν μόνο με ζάχαρη, β) μείωσε τη συχνότητα του σεξουαλικού καλέσματος των αρσενικών της μύγας της Μεσογείου. Η αρνητική επίδραση της μόλυνσης με Wolbachia ήταν εντονότερη στα αρσενικά που είχαν πρόσβαση σε πρωτεΐνη (υδρολυμένη μαγιά) σε σχέση με τα αρσενικά που τρέφονταν αποκλειστικά με ζάχαρη. Επίσης, η εκδήλωση του σεξουαλικού καλέσματος ως ένδειξη της ταχύτητας αναπαραγωγικής ωρίμανσης των αρσενικών έδειξε ότι η βακτηριακή μόλυνση καθυστέρησε τη σεξουαλική ωρίμανση των αρσενικών τόσο σε εκείνα που τράφηκαν με υδρολυμένη μαγιά και ζάχαρη όσο και εκείνων που τράφηκαν μόνο με ζάχαρη, γ) μείωσε δραστικά την ανταγωνιστικότητα σύζευξης των αρσενικών όταν μελετήθηκε σε μικρά ατομικά κλουβιά (όγκου 400 cm3), και τέλος δ) δεν επηρέασε σημαντικά την αποθήκευση σπέρματος στις σπερματοθήκες των θηλυκών. Επίσης, στο πλαίσιο της πρώτης ενότητας πειραμάτων μελετήθηκε η επίδραση της μόλυνσης με Wolbachia των αρσενικών και των θηλυκών ατόμων της μύγας της Μεσογείου στη δεκτικότητα σύζευξης και επανασύζευξης, καθώς και η επίδραση του ιστορικού των συζεύξεων στα δημογραφικά χαρακτηριστικά (ωοπαραγωγή, εκκόλαψη των αυγών, διάρκεια ζωής) μολυσμένων και μη-μολυσμένων με Wolbachia θηλυκών της μύγας της Μεσογείου. Εν συντομία, τα αποτελέσματα έδειξαν ότι: α) η μόλυνση είτε των θηλυκών είτε των αρσενικών τροποποίησε τα ποσοστά σύζευξης και επανασύζευξης, β) τα μολυσμένα με Wolbachia θηλυκά απόθεσαν περισσότερα αυγά σε σύγκριση με τα μη-μολυσμένα θηλυκά. Η μολυσματική κατάσταση των αρσενικών δεν επηρέασε την ωοπαραγωγή. Ο αριθμός των συζεύξεων (μία ή δύο) των θηλυκών δεν επηρέασε την ωοπαραγωγή τους, γ) η μόλυνση των θηλυκών με Wolbachia μείωσε δραματικά τα ποσοστά εκκόλαψης των προνυμφών. Επιπλέον, το σπέρμα των μολυσμένων αρσενικών έδειξε πως ανταγωνίζεται επιτυχώς το σπέρμα των μη-μολυσμένων αρσενικών για τη γονιμοποίηση των αυγών των μη-μολυσμένων θηλυκών, δ) τα μολυσμένα με Wolbachia επανασυζευγμένα θηλυκά έζησαν περισσότερο από τα μη-μολυσμένα επανασυζευγμένα θηλυκά, παρότι η διάρκεια ζωής δεν διέφερε μεταξύ των μολυσμένων και μη-μολυσμένων θηλυκών που συζεύχθηκαν μόνο μία φορά. Επιπλέον, η επανασύζευξη των θηλυκών επέφερε κόστος στη διάρκεια ζωής μόνο των μη-μολυσμένων θηλυκών. Αντίθετα, η επανασύζευξη των μολυσμένων θηλυκών αύξησε τη διάρκεια ζωής τους σε σύγκριση με τα μολυσμένα θηλυκά που συζεύχθηκαν μόνο μία φορά. Η μολυσματική κατάσταση των αρσενικών δεν επηρέασε τη επιβίωση των θηλυκών σεξουαλικών συντρόφων τους. Η δεύτερη πειραματική ενότητα επικεντρώθηκε στην αξιολόγηση της προοπτικής συνεισφοράς των συμβιωτικών οργανισμών (Wolbachia, βακτήρια του πεπτικού συστήματος) στη μαζική παραγωγή εντόμων υψηλής βιολογικής ποιότητας για εφαρμογή σε προγράμματα καταπολέμησης εντόμων. Τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν στους χώρους του εργαστηρίου FAO/IAEA Insect Pest Control Laboratory (IPCL), στο Seibersdorf της Αυστρίας. Χρησιμοποιήθηκαν έντομα αποικιών της μύγας της Μεσογείου που εκτρέφονταν σε συνθήκες μαζικής εκτροφής μικρής κλίμακας και εξετάσθηκε η επίδραση του Wolbachia σε βασικές βιολογικές παραμέτρους της αρμοστικότητας των εντόμων καθώς και η προβιοτική δράση του Enterobacter sp.. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το βακτήριο Wolbachia επηρέασε σημαντικά αρκετές παραμέτρους της αρμοστικότητας (fitness) της μύγας της Μεσογείου σε συνθήκες μαζικής εκτροφής μικρής κλίμακας. Η μείωση των ποσοστών εκκόλαψης των προνυμφών και συνεπώς ο μειωμένος αριθμός ανακτηθέντων ενηλίκων, αποτέλεσε το πιο αξιοσημείωτο των ευρημάτων. Επιπλέον, διαπιστώθηκε μείωση στη διάρκειας ανάπτυξης των ανηλίκων σταδίων του πληθυσμού Vienna 8 GSS ως συνέπεια της μόλυνσης. Η φυλή wCer2 του βακτηρίου δεν επηρέασε ούτε τη διάρκεια ζωής ούτε την ωοπαραγωγή των θηλυκών της μύγας της Μεσογείου, παρότι η φυλή wCer4 φαίνεται να επάγει μείωση τόσο της διάρκειας ζωής όσο και της ωοπαραγωγής των μολυσμένων θηλυκών. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν επίσης, ότι η ανταγωνιστικότητα σύζευξης των αρσενικών σε κλωβούς υπαίθρου, η ικανότητα πτήσης των ενηλίκων και η ικανότητα επιβίωσης υπό συνθήκες έλλειψης νερού και τροφής επηρεάζονται σημαντικά από τη φυλή του εντόμου καθώς και από τη φυλή του βακτηρίου (αλληλεπίδραση των δύο γενοτύπων). Τα αποτελέσματα της μελέτης των βακτηρίων του πεπτικού συστήματος συνοψίζονται ως εξής: α) από το πεπτικό σύστημα προνυμφών και ενηλίκων εντόμων (αρσενικών και θηλυκών) απομονώθηκαν τα γένη των βακτηρίων Providencia, Enterobacter, και Acinetobacter, β) η προσθήκη Enterobacter sp., ιδιαίτερα με τη μορφή ζωντανών βακτηρίων στην τροφή των προνυμφών, οδήγησε σε αυξημένο αριθμό νυμφών και ενηλίκων καθώς και σε ταχύτερη ανήλικη ανάπτυξη, κυρίως των αρσενικών, γ) η προσθήκη βακτηρίων στην προνυμφική τροφή δεν επηρέασε το βάρος των νυμφών, την αναλογία φύλου, την ανταγωνιστικότητα σύζευξης των αρσενικών, την ικανότητα πτήσης των ενηλίκων και την ικανότητα επιβίωσης υπό συνθήκες έλλειψης νερού και τροφής. Τα δεδομένα των παραπάνω πειραμάτων συμβάλλουν στην πληρέστερη κατανόηση των βιολογικών μηχανισμών δράσης του συμβιωτικού βακτηρίου Wolbachia και των αλλαγών που επιφέρει η μόλυνση σε βασικές παραμέτρους της βιολογίας και συμπεριφοράς της μύγας της Μεσογείου. Επιπλέον, υπό το πρίσμα των ιδιαίτερων συνθηκών που συνεπάγεται η μαζική εκτροφή των εντόμων, αξιολογήθηκε η επίδραση της βακτηριακής μόλυνσης με Wolbachia και της χορήγησης Enterobacter sp. μέσω της τροφής των προνυμφών σε βασικές βιολογικές παραμέτρους, οι οποίες είναι ενδεικτικές της «ποιότητας» των παραγόμενων εντόμων. Συζητείται η προοπτική συνεισφοράς των συμβιωτικών οργανισμών (Wolbachia, βακτήρια του πεπτικού συστήματος) στην καταπολέμηση της μύγας της Μεσογείου μέσω των προγραμμάτων εξαπόλυσης στειρωμένων εντόμων (Sterile Insect Technique, Incompatible Insect Technique) και προτείνονται δυνατότητες περαιτέρω έρευνας.


2017 ◽  
Vol 7 (1) ◽  
Author(s):  
Muhammad Waqar Ali ◽  
Wenping Zheng ◽  
Summar Sohail ◽  
Qingmei Li ◽  
Weiwei Zheng ◽  
...  

2020 ◽  
Vol 20 (1) ◽  
Author(s):  
Qiu-Li Hou ◽  
Er-Hu Chen ◽  
Wei Dou ◽  
Jin-Jun Wang

Abstract Bactrocera dorsalis (Hendel) is a notorious insect pest that attacks diverse vegetables and fruits worldwide. The sterile insect technique has been developed as an environmentally friendly and effective control method that depends on the mass production of target flies. Because dietary yeast (protein) and sucrose (carbohydrate) are important in adult diets, yeast:sucrose (Y:S) mixtures are crucial for the mass-rearing of B. dorsalis. In this study, we found adult diets with different ratios of yeast to sucrose-influenced fecundity, and an extremely high or low Y:S ratios significantly decreased egg production of B. dorsalis. Additionally, the maximum oviposition efficiency was realized at dietary yeast to sucrose ratios of 1:1 and 1:3, suggesting their potential use to produce more eggs for the mass production of B. dorsalis. Here, new gel diets having different yeast concentrations (g/L water) were also assessed for rearing B. dorsalis larvae. Gel diets containing 20 g/L yeast led to a higher pupation, pupal weight and adult eclosion rate, and a shorter developmental time than other yeast concentrations. Moreover, the present gel diet also resulted in greater pupal production and adult emergence rates than previously used liquid and solid artificial diets, revealing that it is suitable for rearing B. dorsalis larvae. This research provides a useful reference on artificial diets mixtures for mass rearing B. dorsalis, which is critical for employing the sterile insect technique.


Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document