scholarly journals PCR en tiempo real: una metodología útil para la detección y cuantificación de granulovirus

2016 ◽  
Vol 18 (2) ◽  
pp. 24 ◽  
Author(s):  
Gloria Patricia Barrera Cubillos ◽  
Jazmín Murcia ◽  
Jorge Luis Cerón Pérez ◽  
Paola Emilia Cuartas Otálora ◽  
Cristian Alexander Guzmán Santofimio ◽  
...  
Keyword(s):  
Spodoptera Frugiperda ◽  
Phthorimaea Operculella ◽  
Tuta Absoluta ◽  
Viral Control ◽  
Diatraea Saccharalis ◽  
Tecia Solanivora ◽  
Para Determinar ◽  
Erinnyis Ello

El uso de baculovirus como agentes de control biológico de insectos plaga, se ha convertido en una estrategia efectiva que se ha implementado gradualmente en diferentes sistemas productivos a nivel mundial. Para el desarrollo de un bioplaguicida a base de baculovirus, es necesario contar con una metodología para determinar el título viral en el producto en proceso y terminado. Para tal fin, en este trabajo se diseñó y optimizó una técnica de cuantificación viral (Betabaculovirus) mediante PCR cuantitativo (q-PCR). Se utilizó una sonda TaqMan diseñada sobre el gen de granulina, altamente conservado. Para la técnica de q-PCR se determinó la especificidad, sensibilidad y reproducibilidad, encontrando que puede detectar y cuantificar aislamientos del género Betabaculovirus provenientes de cinco especies diferentes de insectos (granulovirus de Tecia solanivora, Phthorimaea operculella, Erinnyis ello, Tuta absoluta y Spodoptera frugiperda) incluso de diferente origen geográfico, pero no detecta aislamientos del género Alphabaculovirus (nucleopoliedrovirus de Spodoptera ornithogalli, Diatraea saccharalis o S. frugiperda). El límite mínimo de detección de la técnica fue de 6,4 x 10-4 ng de ADN, lo que equivale a 1,25 x 105 copias del gen. Así mismo, la variación intra e inter ensayos fue mínima, demostrando la reproducibilidad de la misma. La aplicabilidad de la técnica fue evaluada para la detección de granulovirus en muestras de larva, suelo, y para determinar la concentración viral en un bioplaguicida formulado como concentrado emulsionable. En conclusión, la técnica de q-PCR desarrollada fue reproducible, sensible y específica, con aplicabilidad en estudios de persistencia viral en campo, control de infecciones en crías de insectos y control de calidad de bioplaguicidas a base de betabaculovirus.Palabras clave: Granulovirus, PCR cuantitativa, persistencia viral, control de calidad.

scholarly journals Biologia do ectoparasitóide Bracon hebetor Say, 1857 (Hymenoptera: Braconidae) em sete espécies de lepidópteros

2001 ◽  
Vol 58 (4) ◽  
pp. 693-698 ◽  
Author(s):  
Sandra Regina Magro ◽  
José Roberto Postali Parra
Keyword(s):  
Spodoptera Frugiperda ◽  
Heliothis Virescens ◽  
Corcyra Cephalonica ◽  
Anticarsia Gemmatalis ◽  
Sitotroga Cerealella ◽  
Anagasta Kuehniella ◽  
Diatraea Saccharalis ◽  
Bracon Hebetor ◽  
Para Determinar

Bracon hebetor Say, 1857 é um ectoparasitóide larval de várias espécies de piralídeos que atacam grãos armazenados, sendo considerado um agente potencial de controle biológico dessas pragas. Assim, a biologia de B. hebetor foi estudada em condições controladas de temperatura (25 ± 2°C), umidade relativa (60 ± 10%) e fotoperíodo (fotofase de 14 horas), sobre sete espécies de lepidópteros, Anagasta kuehniella (Zeller), Corcyra cephalonica Stainton e Sitotroga cerealella (Olivier) (hospedeiros naturais) e Diatraea saccharalis (Fabricius), Heliothis virescens (Fabricius), Anticarsia gemmatalis Hübner, Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (insetos criados rotineiramente no laboratório de Biologia de Insetos da ESALQ/USP), para determinar o melhor hospedeiro para sua criação em laboratório. A duração e a viabilidade do ciclo biológico (ovo-adulto) foram afetadas, dependendo do hospedeiro utilizado. A. kuehniella e C. cephalonica foram hospedeiros semelhantes para a criação de B. hebetor, produzindo insetos com duração de ciclo de 12,8 dias, viabilidade em torno de 90% e ótima capacidade de paralisação e parasitismo. D. saccharalis foi o único hospedeiro não natural que proporcionou resultados semelhantes àqueles obtidos sobre as três traças hospedeiras naturais. Quanto à agressividade, D. saccharalis produziu insetos com capacidade de paralisação e parasitismo semelhantes àqueles criados sobre as traças S. cerealella e C. cephalonica.

scholarly journals Macromorfología y crecimiento radial de cepas de hongos entomopatógenos suplementado con polvo de lepidópteros

2020 ◽  
Vol 46 (1) ◽  
pp. e10164
Author(s):  
Cipriano García-Gutiérrez ◽  
Marina Isabel García-Guajardo ◽  
Guadalupe Vejar-Cota ◽  
Lorenzo Meza-García ◽  
Jesús Alicia Chávez-Medina
Keyword(s):  
Beauveria Bassiana ◽  
Spodoptera Frugiperda ◽  
Metarhizium Anisopliae ◽  
Galleria Mellonella ◽  
Para Determinar

Se estudió la macromorfología de cepas de Beauveria bassiana (B1), Metarhizium anisopliae (M1) e Isaria javanica (HPI-210) y se determinó su crecimiento radial a temperaturas de 25, 28, 30, 35 y 40 °C en medio PDA suplementado con polvos de Diatraea considerata, Spodoptera frugiperda y Galleria mellonella. Los hongos se inocularon adicionando 2 µl de una suspensión con 1 x 107 esporas/ml. Después de 15 días se midió el crecimiento radial de las cepas en mm/d. Para determinar la interacción entre las tres cepas con el polvo de los tres insectos más el control PDA y las cinco temperaturas, se usó un análisis factorial 3 x 4 x 5; los datos del crecimiento de los hongos fueron analizados mediante un ANOVA y una prueba de Tukey. Se encontraron diferencias estadísticas significativas en el crecimiento a diferente temperatura, respecto al control; el crecimiento óptimo en los tres hongos fue a 28 °C, la cepa B1 suplementada con polvo de D. considerata creció 2,76 ± 0,06 mm/d, M1 con G. mellonella 2,77 ± 0,02 mm/d, y HPI-210 con D. considerata 3,27 ± 0,06 mm/d. La cepa B1 creció 0,45 ± 0,03 mm/d, M1 1,22 ± 0,0 mm/d a 30 °C, mientras que HPI-210 no creció después de 28 °C. Estos resultados sugieren que las tres cepas fueron inducidas a crecer mejor por efecto de los medios suplementados con los insectos; a 28 °C, HPI-210 presentó el mayor crecimiento/d (F = 25,24, E8, P = 0,0001) seguido de M1 y B1, mientras que M1 con suplemento de S. frugiperda creció mejor a 30 °C (F = 38,33, E8, P = 0,0001). Estos resultados de crecimiento radial, desarrollo macromorfológico y tolerancia a la temperatura permiten seleccionar a las mejores cepas para evaluar su virulencia en insectos plaga.

scholarly journals Antecedentes y perspectivas para el manejo integrado de Tuta Absoluta Meyrick 1917 (Lepidoptera: gelechiidae)

2018 ◽  
pp. 73-81
Author(s):  
Maria Piedad Herrera ◽  
Daniel Rodríguez Caicedo ◽  
Fernando Cantor Rincón
Keyword(s):  
Tuta Absoluta ◽  
Para Determinar

En los últimos años se han realizado diversos avances en términos de investigación para un manejo adecuado de Tuta absoluta, una de las principales plagas de tomate en el mundo. En los cultivos convencionales, el método de control químico ha sido el más utilizado.  Actualmente se buscan estrategias sostenibles, para ser implementadas en el manejo integrado de plagas (MIP). Apanteles gelechiidivoris parasitoide especifico de Tuta absoluta, encontrado de forma natural en Colombia, es considerado como una estrategia promisoria para su implementación en un programa de manejo integrado en tomate. A pesar de esto, exposiciones a pesticidas pueden afectar su efectividad de control dentro del cultivo. La evaluación de los efectos de la exposición a estos pesticidas sobre los enemigos naturales permite anticipar sus perspectivas de éxito. Dentro de los ensayos realizados frecuentemente para determinar la compatibilidad, se llevan a cabo evaluaciones de dosis letal media DL50, exposición directa y exposición indirecta. En la actualidad también se realizan trabajos sobre aspectos que van más allá de la mortalidad inducida directamente sobre los individuos, pero que afectan la biología de los controladores como, por ejemplo: evaluaciones de fecundidad, emergencia de adultos, capacidad parasítica, longevidad y proporción sexual. En este trabajo se revisan los avances más significativos en el control de Tuta absoluta mediante el empleo de A. gelechiidivoris y se discuten aspectos relativos a la necesidad de adelantar estudios de compatibilidad del parasitoide con estrategias de manejo químico.

scholarly journals Actividad entomopatogénica de aislamientos autóctonos de beauveria spp. sobre premnotrypes vorax (hustache) in vitro.

2016 ◽  
Vol 20 (1) ◽  
pp. 19-33
Author(s):  
Jorge Villamil ◽  
John Martínez ◽  
Elberth Pinzón
Keyword(s):  
Phthorimaea Operculella ◽  
Tecia Solanivora

El gusano blanco (Premnotrypes vorax Hustache.) es una plaga clave en el cultivo de papa en Colombia, debido a las pérdidas en calidad del tubérculo las cuales pueden llegar hasta el 100% dependiendo del nivel de población y manejo del cultivo. La investigación tuvo como fialidad evaluar in vitro aislamientos autóctonos de Beauveria sp. sobre P. vorax . Los aislamientos fueron obtenidos de larvas y adultos infectados de Premnotrypes vorax, Tecia solanivora, Phthorimaea operculella, Aepytus sp., Hypotenemus hampei y Rynchophorus palmarum, colectados en campo y aislados con técnicas In vitro. De ocho aislamientos obtenidos de Beauveria sp, se seleccionaron cinco (Bv01, Bv02, Bv05, Bv07 y Bv08) por presentar un porcentaje de mortalidad superior al 60% sobre larvas de P. vorax. La evaluación de efiacia se realizó en diez larvas de P. vorax . Las larvas se desinfectaron y sumergieron en una suspensión de 1x107 esporas.mL-1, se realizaron observaciones por 16 días, cada 48 horas evaluando porcentaje de mortalidad. Se empleó un diseño completamente al azar, con seis tratamientos y cuatro repeticiones. Los resultados mostraron que 16 días después de la inoculación, se presentó el 100% de mortalidad de las larvas para los cinco aislamientos, siendo el aislamiento Bv07 el que presentó la mayor actividad patogénica sobre P. vorax In vitro.Palabras clave: hongos, larvas, entomopatógeno, mortalidad, cultivo de papa.

scholarly journals Evaluación de aislamientos nativos de Beauveria Spp. sobre Tecia solanivora (Lepidoptera: Gelechiidae) in vitro

2014 ◽  
Vol 31 (1) ◽  
pp. 92
Author(s):  
Jorge Enrique Villamil C. ◽  
John Wilson Martínez O.
Keyword(s):  
Phthorimaea Operculella ◽  
Hypothenemus Hampei ◽  
La Palma ◽  
Tecia Solanivora

Se evaluó la eficacia de hongos entomopatógenos nativos en el biocontrol de Tecia solanivora (Lepidoptera: Gelechiidae) in vitro. Los aislamientos fueron obtenidos de larvas y adultos de gusano blanco Premmotrypes vorax, barrenador del curubo Aepytus sp, picudo de la palma Rinchophorus palmarum, broca del café Hypothenemus hampei, polilla guatemalteca Tecia solanivora y palomilla de la papa Phthorimaea operculella infectados, de los municipios de Ventaquemada, Umbita, Coper (Boyacá) y San gil (Santander). El trabajo se realizó en el laboratorio de control biológico del Grupo Manejo Biológico de Cultivos en Tunja, Colombia. Se seleccionaron in vitro, de forma preliminar cinco de los siete aislamientos de hongos obtenidos: Bv01, Bv03, Bv04, Bv05 y Bv07, los cuales ocasionaron mortalidades superiores al 10%. De acuerdo con la caracterización morfológica realizada, los hongos encontrados pertenecen al género Beauveria. La evaluación de su eficacia se realizó con 10 larvas de T. solanivora desinfectadas y sumergidas en suspensión de 1x107esporas.mL-1, las cuales se observaron durante 32 días, registrando cada 8 días la mortalidad. Se empleó un diseño completamente al azar, con 6 tratamientos, 4 repeticiones y una prueba de separación de medias de Tukey. Los resultados mostraron que 32 días después de la inoculación los aislamientos Bv03 y Bv05 fueron los que produjeron la mayor mortalidad acumulada (7,4 y 8,5%, respectivamente). Se confirma el bajo potencial de los hongos entomopatógenos nativos para el control de larvas de T. solanivora.

scholarly journals ACTION SPECTRUM OF Baculovirus spodoptera ON LEPIDOPTERA PESTS

2017 ◽  
Vol 16 (1) ◽  
pp. 52
Author(s):  
CAMILA DA SILVA FERNANDES SOUZA ◽  
FERNANDO HERCOS VALICENTE ◽  
MARCOS ANTÔNIO MATIELLO FADINI ◽  
RICARDO ANTÔNIO POLANCZYK
Keyword(s):  
Spodoptera Frugiperda ◽  
Sugar Cane ◽  
Helicoverpa Zea ◽  
First Generation ◽  
Action Spectrum ◽  
Fall Armyworm ◽  
Corn Earworm ◽  
Corn Borer ◽  
Egg Masses ◽  
Diatraea Saccharalis

ABSTRACT - This work evaluated the spectrum of action of Baculovirus spodoptera (SfMNVP) - 6NR on the fall armyworm Spodoptera frugiperda, corn earworm Helicoverpa zea and the sugar cane borer Diatraea saccharalis, species of economic importance in maize. For the bioassays, corn leaves immersed in a baculovirus suspension were used for baculovirus inoculation in fall armyworm and earworm and pieces of sugar cane for the corn borer. The foods were immersed in viral solutions of different baculovirus concentrations determined in a Neubauer chamber. The control only distilled water was used instead of the baculovirus suspension. The larvae fed for 48 hours and were then transferred to an artificial diet, without the baculovirus. After evaluating mortality, the development of the offspring (F1) was accompanied, evaluating the parameters: mortality, pupation and the number of egg masses in the first generation. The baculovirus was specific to fall armyworm and innocuous to earworm and the corn borer in the first generation. In the second generation, baculovirus was innocuous for all three species. The percentage of pupation showed an inverse relation with mortality for the three species in two generations. The number of egg masses in F1 was lower in S. frugiperda, did not change for D. saccharalis and higher in H. zea.Keywords: Helicoverpa zea, Spodoptera frugiperda, Diatraea saccharalis, entomopathogenie virus.ESPECTRO DE AÇÃO DE Baculovirus spodoptera A LEPIDÓPTEROS PRAGARESUMO - Neste trabalho foi avaliado o espectro de ação do Baculovirus spodoptera (SfMNVP) - 6NR à lagarta-do-cartucho Spodoptera frugiperda, à lagarta-da-espiga Helicoverpa zea e à broca-da-milho Diatraea saccharalis, espécies de importância econômica na cultura do milho. Para a realização dos bioensaios foram utilizadas folhas de milho imersas em suspensão com o baculovírus em concentrações determinadas em câmara de Neubauer, para lagarta-do-cartucho e para lagarta-da-espiga. Para broca-do-milho o substrato utilizado foi colmo de cana-de-açúcar. Na testemunha foi utilizada somente água destilada ao invés da suspensão com o baculovírus. As lagartas se alimentaram por 48 horas, após este período, foram transferidas para dieta artificial sem o bacilovírus. Após a avaliação da mortalidade,odesenvolvimento da prole (F1) foi acompanhado sendo avaliados os parâmetros: mortalidade, pupação e o número de massas de ovos na primeira geração. O baculovírus foi especifico para lagarta-do-cartucho e inócuo tanto para lagarta-da-espiga quanto para broca-do-milho na primeira geração. Na segunda geração, o baculovírus foi inócuo para as três espécies. A porcentagem de pupação apresentou relação inversa com a mortalidade para as três espécies nas duas gerações. O número de massas de ovos na F1 foi menor em S. frugiperda, não alterado para D. saccharalis e maior em H. zea.Palavras-chave: Helicoverpa zea, Spodoptera frugiperda, Diatraea saccharalis, vírus entomopatogênico.

scholarly journals Manejo de lepidópteros-praga na cultura do milho com o evento Bt piramidado Cry1A.105 e Cry2Ab2

2013 ◽  
Vol 48 (12) ◽  
pp. 1529-1537 ◽  
Author(s):  
José Magid Waquil ◽  
Patrick Marques Dourado ◽  
Renato Assis de Carvalho ◽  
Wladecir Salles Oliveira ◽  
Geraldo Ubirajara Berger ◽  
...  
Keyword(s):  
Spodoptera Frugiperda ◽  
Diatraea Saccharalis ◽  
Mon 810

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do evento piramidado (MON 89034), que expressa as proteínas Cry1A.105 e Cry2Ab2, no controle dos principais lepidópteros-praga da cultura do milho no Brasil, Spodoptera frugiperda, Helicoverpa spp. e Diatraea saccharalis. Os ensaios foram conduzidos em quatro regiões do país, com o híbrido DKB 390, submetido a seis tratamentos: híbrido com o evento piramidado, híbrido com o evento que expressa apenas a proteína Cry1A(b) (MON 810) e híbrido convencional (não Bt), todos com e sem manejo integrado de S. frugiperda. Para o evento piramidado, não foi necessário o controle químico em nenhum dos locais avaliados. Diferenças significativas foram observadas entre os tratamentos quanto aos danos e à presença de lagartas. Em geral, essas variáveis foram mais baixas no híbrido com o evento piramidado e mais altas no híbrido convencional, sem controle químico. Sob alta infestação, o controle químico reduziu os danos causados por S. frugiperda e D. saccharalis, tanto no evento que expressa apenas uma proteína, como no híbrido convencional. Com base nos danos causados pelos insetos, o evento piramidado Cry1A.105 e Cry2Ab2 é eficiente no controle dos principais lepidópteros-pragas do milho no Brasil.

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