Τα φλαβονοειδή είναι μια κατηγορία πολυφαινολικών μορίων που περιέχονται σε τρόφιμα, όπως φρούτα, λαχανικά και παράγωγα φυτικών χυμών.Αντιπροσωπεύουν μία από τις πιο σημαντικές κατηγορίες βιολογικών ενώσεων με ενδιαφέρουσα δράση.Στην παρούσα εργασία, εξετάστηκε η τύχη και οι βιοχημικές επιδράσεις της ναργινίνης και εσπεριδίνης μετά τη χορήγηση τους μέσω της τροφής σε Ross308 κοτόπουλα, μελετώντας την αύξηση της αντιοξειδωτικής ικανότητα τους στους ιστούς.Δύο πλήρως επικυρωμένες μεθοδολογίες αναπτύχθηκαν για την ταυτόχρονη ποσοτικοποίηση της εσπεριδίνης, ναργινίνης, εσπερετίνης και ναριγενίνης σε δείγματα πλάσματος και ιστών. Σύμφωνα με τα αποτελέσματα, στα δείγματα πλάσματος μόνο τα επίπεδα συγκέντρωσης της ναργινίνης ήταν πάνω από το κατώτατο όριο ποσοτικοποίησης (LLOQ) μετά από 30 ημέρες χορήγησης,ενώ στα δείγματα ιστών δεν ανιχνεύτηκαν οι ουσίες.Λόγω των χαμηλών επιπέδων συγκέντρωσης των ουσιών στο πλάσμα,διεξήχθη μελέτη μεταβολισμού βασιζόμενη σε υψηλής ανάλυσης φασματομετρία μάζας, με σκοπό να μελετηθεί η πιθανότητα γρήγορου κι εκτεναμένου μεταβολισμού των ουσιών. Δύο μεταβολικές τροποποιήσεις εντοπίστηκαν για τη ναργινίνη, ναριγενίνη και εσπεριδίνη, αντίστοιχα. Καθώς και καμία μεταβολική τροποποίηση δεν ανιχνεύθηκε για την εσπερετίνη. Στο επόμενο στάδιο, διερευνήθηκε η επίδραση των ουσιών στο ολικό βιοχημικό προφίλ του οργανισμού. Λόγω της πολυπλοκότητας των αναλύσεων αυτών, κρίνεται αναγκαία η ανάπτυξη και η επικύρωση καινούργιων μεθοδολογιών επεξεργασίας των δεδομένων. Κάτω από αυτό το πλαίσιο, μια νέα στρατηγική για την επεξεργασία των μεταβολομικών δεδομένων από φασματόμετρο μάζας αναπτύχθηκε, με στόχο να αυξηθεί ο αριθμός των μεταβολιτών που ανιχνεύονται με αξιοπιστία. Αυτή η μεθοδολογία εφαρμόστηκε στη μεταβολομική μελέτη των δειγμάτων πλάσματος κοτόπουλου, στα οποία χορηγήθηκαν εσπεριδίνη ή ναργινίνη για 30 ημέρες. Τέσσερις μεταβλητές εμφανίστηκαν να διαχωρίζουν την ομάδα ελέγχου από την ομάδα χορήγησης της ναργινίνης, ενώ μόνο μία μεταβλητή συνέβαλλε στο διαχωρισμό της ομάδας ελέγχου από την ομάδα χορήγησης της εσπεριδίνης. Επιπλέον, δυο μεταβολομικές μελέτες πραγματοποιήθηκαν (μια για την αργινίνη και μια για την εσπεριδίνη) σε δείγματα ιστών. Μελετήθηκαν οι μεταβολομικές αλλαγές της απόκρισης που συμβαίνουν στους ιστούς, λόγω της χορήγησης της ναργινίνης και εσπεριδίνης μέσω της τροφής. Έξι μεταβλητές εντοπίστηκαν να διαχωρίζουν την ομάδα ελέγχου από την ομάδα χορήγησης της ναργινίνης και δώδεκα μεταβλητές να διαχωρίζουν την ομάδα ελέγχου από την ομάδα χορήγησης της εσπεριδίνης.
Development of state-of-the-art mass spectrometry-based analytical methodologies for the study of bioactive natural products fate after dietary administration