Directs effects of erythropoietin on functional properties of human monocytes/macrophages

Цель. Исследовали прямые эффекты эритропоэтина (erythropoietin, Epo) на функциональную активность моноцитов/макрофагов (Мц/Мф) человека in vitro. Методы. Популяцию CD14 клеток получали из мононуклеарных клеток (МНК) крови человека методом позитивной магнитной колоночной сепарации. Мц/Мф культивировали без липополисахарида (ЛПС) или с ЛПС в течение 24 ч. Мембранную экспрессию CD14 ( гликозилфосфатидилинозитол-связанный белок), CD16 (низкоафинный Fc-рецептор), CD119 (рецептор интерферона-g), СD124 (рецептор интерлейкина-4) и CD197 (хемокиновый рецептор CCR7) оценивали методом проточной цитофлюорометрии. Содержание фактора некроза опухоли-a (tumor necrosis factor-a, TNF-a), интерлейкина-1b (interleukin-1b, IL-1b), IL-6 и IL-10 в культуральных супернатантах определяли иммуноферментным методом. Результаты. Показано, что Epo достоверно снижал количество CD14, CD124 и CD197 клеток, но не CD16 клеток среди неактивированных Мф. Epo также заметно уменьшал количество CD197 клеток, но не СD14, CD124 и CD197 клеток, среди Мф, активированных ЛПС. Кроме того, Epo был способен умеренно усиливать продукцию интерлейкина-1b (interleukin-1b, IL-1b) и IL-6, неактивированными Мф и, наоборот, снижать продукцию этих цитокинов, осуществляемую активированными Мф. В то же время, Epo не оказывал существенного влияния на макрофагальную продукцию TNF-a и IL-10. Заключение. Направленность и выраженность регуляторных эффектов Epo на функции Мц/Мф зависят от активационного состояния этих клеток. Aim. We studied direct effects of erythropoietin (Epo) on the function of human monocytes/macrophages (Mc/Mphs) in vitro. Methods. CD14-positive cells were isolated from human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) by positive magnetic separation. Mc/Mphs were cultured without or with lipopolysaccharide (LPS) for 24 hours. Membrane expression of CD14 (membrane glycosylphosphatidylinositol-bound protein), CD16 (low-affinity Fc receptor), CD119 (interferon-g receptor), CD124 (interleukin-4 receptor), and CD197 (chemokine receptor CCR7) was evaluated by flow cytofluorometry. The content of tumor necrosis factor-a (TNF-a), interleukin-1b (IL-1b), IL-6 and IL-10 in culture supernatants was determined by the enzyme immunoassay. Results. Epo was found to significantly reduce the amount of CD14, CD124 and CD197 cells, but not CD16 and СD119 cells, among non-activated Mphs. Epo also detectably reduced the content of CD197 cells, but not CD14, CD124 and CD197 cells, among LPS-activated Mphs. In addition, Epo was able to moderately increase the production of interleukin-1b (IL-1b) and IL-6 by non-activated Mphs and, vice versa, to reduce the production of these cytokines by activated Mphs. At the same time, Epo did not significantly affect the Mph production of TNF-a and IL-10. Conclusion. Direction and intensity of regulatory effects of Epo on Mphs functions depend on the activation status of these cells.