First Isolation and Multilocus Sequence Typing of Brucella canis from a Subclinically Infected Pet Dog in China

Canine brucellosis, a worldwide zoonotic disease, is mainly caused by Brucella canis. In the present study, we isolated a Brucella strain (CD3) from a subclinically infected pet dog in Sichuan Province, Southwestern China. Classical biotyping methods and molecular biological tests (BCSP31 and BcSS PCR) proved that the strain belonged to B. canis. Furthermore, B. canis CD3 and another two B. canis strains (WJ5 and YA4), which were all isolated from pet dogs in Sichuan, were genotyped using multilocus sequence typing (MLST). Our results showed that the three B. canis strains were identified as the same sequence type (ST21). The present study is the first to report B. canis strain from a subclinically infected pet dog in China, indicating a potential threat to public health posed by subclinical infections in pet dogs. We suggest that screening for B. canis should be incorporated into routine medical examination of pet dogs and other companion animals in areas with a history of animal or human brucellosis.

Crystal structures of FolM alternative dihydrofolate reductase 1 from Brucella suis and Brucella canis

Members of the bacterial genus Brucella cause brucellosis, a zoonotic disease that affects both livestock and wildlife. Brucella are category B infectious agents that can be aerosolized for biological warfare. As part of the structural genomics studies at the Seattle Structural Genomics Center for Infectious Disease (SSGCID), FolM alternative dihydrofolate reductases 1 from Brucella suis and Brucella canis were produced and their structures are reported. The enzymes share ∼95% sequence identity but have less than 33% sequence identity to other homologues with known structure. The structures are prototypical NADPH-dependent short-chain reductases that share their highest tertiary-structural similarity with protozoan pteridine reductases, which are being investigated for rational therapeutic development.

UVEÍTE ANTERIOR COMO MANIFESTAÇÃO CLÍNICA ISOLADA DE BRUCELOSE EM CÃO

Introdução: A infecção por Brucella canis é considerada uma das etiologias da uveíte anterior em cães. Outras manifestações oculares incluem panuveíte, endoftalmite, panoftalmite, coriorretinite, vitreíte, descolamento de retina e ceratoconjuntivite. Contudo, há ainda poucos relatos na literatura que relacionam oftalmopatias à infecção natural por Brucella canis. Objetivos: Descrever a evolução clínica de um caso de uveíte anterior unilateral em cão como única manifestação de brucelose. Material e métodos: Cão, Yorkshire Terrier, 3 anos de idade, foi atendido apresentando opacidade em olho direito (OD) com evolução de duas semanas. Como histórico, paciente havia sido utilizado como reprodutor em canil e apresentava hiperlipidemia. Ao exame, verificado blefarospasmo, hiperemia conjuntival, edema de córnea e turbidez em câmara anterior em OD. A pressão intraocular foi de 11 mmHg em OD e 15 mmHg em olho esquerdo (TonoVet®). Foi iniciado tratamento em OD com prednisolona 1%, 5 vezes por dia, e hialuronato de sódio 0,15%, 3 vezes por dia, havendo melhora na primeira semana de tratamento. Porém, durante redução gradual da prednisolona até 1 vez por dia e, mesmo sob tratamento para hiperlipidemia com bezafibrato, houve recidiva do quadro. Portanto, foi mantido o tratamento com prednisolona 1%, 3 vezes por dia, sendo substituída posteriormente por diclofenaco sódico 0,1%, 1 vez por dia. Ao reduzir a frequência do diclofenaco sódico para a cada 48 horas, houve nova recidiva, quando foram solicitados hemograma, PCR para Ehrlichia canis e Babesia spp. e teste ELISA para pesquisa de anticorpos contra E. canis, Leishmania spp., Brucella canis, Anaplasma spp. e Borrelia burgdorferi e antígeno de Dirofilaria immitis. Resultados: O teste ELISA para Brucella canis foi positivo e o paciente foi submetido a tratamento com enrofloxacino e doxiciclina, ambos 10 mg/kg, 1 vez por dia, durante 30 dias. Durante o acompanhamento, não houve novas recidivas de uveíte. Conclusão: A brucelose canina é uma enfermidade que pode ser subdiagnosticada, dado que os sintomas mais frequentes, como aborto e infertilidade, são observados apenas em animais em reprodução. Assim, a pesquisa de brucelose em cães com uveíte é necessária especialmente em pacientes com histórico desconhecido ou destinados previamente a reprodução.

Seroprevalencia de Brucella canis en perros de un refugio para animales de compañía en Bogotá, Colombia

Introducción. El riesgo de infección con Brucella canis en humanos y perros aumenta con la exposición constante a perros portadores asintomáticos. En Colombia hay evidencia de infección con B. canis en personas que conviven con perros. Una preocupación adicional en Bogotá es la falta de información actualizada sobre la prevalencia de la infección en perros destinados a programas de adopción.Objetivo. Establecer la seroprevalencia de la infección por B. canis en perros de un refugio para animales de compañía destinados a la adopción en Bogotá.Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo de corte transversal en un refugio ara animales de Bogotá. Se detectaron anticuerpos contra B. canis en el suero de 51 perros (28 hembras y 23 machos) mediante una prueba inmunocromatográfica de flujo lateral. Asimismo, los individuos positivos se analizaron con PCR para la detección del ADN de Brucella spp.Resultado. La seroprevalencia de B. canis fue del 1,96 % (1/51). El perro seropositivo correspondió a una hembra asintomática de tres años de edad en la cual no se detectó ADN bacteriano en sangre mediante la PCR.Conclusiones. La seroprevalencia representada por un solo perro con IgG anti-B. canis puede considerarse un riesgo potencial para las poblaciones de perros y humanos, ya que podría tratarse de un animal con infección persistente capaz de diseminar la bacteria.

Deletion of the Transcriptional Regulator MucR in Brucella canis Affects Stress Responses and Bacterial Virulence

The transcriptional regulator MucR is related to normal growth, stress responses and Brucella virulence, and affects the expression of various virulence-related genes in smooth-type Brucella strains. However, the function of MucR in the rough-type Brucella canis remains unknown. In this study, we discovered that MucR protein was involved in resistance to heat stress, iron-limitation, and various antibiotics in B. canis. In addition, the expression level of various bacterial flagellum-related genes was altered in mucR mutant strain. Deletion of this transcriptional regulator in B. canis significantly affected Brucella virulence in RAW264.7 macrophage and mice infection model. To gain insight into the genetic basis for distinctive phenotypic properties exhibited by mucR mutant strain, RNA-seq was performed and the result showed that various genes involved in translation, ribosomal structure and biogenesis, signal transduction mechanisms, energy production, and conversion were significantly differently expressed in ΔmucR strain. Overall, these studies have not only discovered the phenotype of mucR mutant strain but also preliminarily uncovered the molecular mechanism between the transcriptional regulator MucR, stress response and bacterial virulence in B. canis.