N-Glycosylation Humanization for Production of Therapeutic Recombinant Glycoproteins in Saccharomyces cerevisiae

Author(s):  
Christelle Arico ◽  
Christine Bonnet ◽  
Christophe Javaud
2016 ◽  
Vol 15 (1) ◽  
Author(s):  
Sha Xu ◽  
Ge-Yuan Zhang ◽  
Huijie Zhang ◽  
Toshihiko Kitajima ◽  
Hideki Nakanishi ◽  
...  

2018 ◽  
Vol 2 (3) ◽  
pp. 433-442 ◽  
Author(s):  
Qiong Wang ◽  
Michael J. Betenbaugh

As a complex and common post-translational modification, N-linked glycosylation affects a recombinant glycoprotein's biological activity and efficacy. For example, the α1,6-fucosylation significantly affects antibody-dependent cellular cytotoxicity and α2,6-sialylation is critical for antibody anti-inflammatory activity. Terminal sialylation is important for a glycoprotein's circulatory half-life. Chinese hamster ovary (CHO) cells are currently the predominant recombinant protein production platform, and, in this review, the characteristics of CHO glycosylation are summarized. Moreover, recent and current metabolic engineering strategies for tailoring glycoprotein fucosylation and sialylation in CHO cells, intensely investigated in the past decades, are described. One approach for reducing α1,6-fucosylation is through inhibiting fucosyltransferase (FUT8) expression by knockdown and knockout methods. Another approach to modulate fucosylation is through inhibition of multiple genes in the fucosylation biosynthesis pathway or through chemical inhibitors. To modulate antibody sialylation of the fragment crystallizable region, expressions of sialyltransferase and galactotransferase individually or together with amino acid mutations can affect antibody glycoforms and further influence antibody effector functions. The inhibition of sialidase expression and chemical supplementations are also effective and complementary approaches to improve the sialylation levels on recombinant glycoproteins. The engineering of CHO cells or protein sequence to control glycoforms to produce more homogenous glycans is an emerging topic. For modulating the glycosylation metabolic pathways, the interplay of multiple glyco-gene knockouts and knockins and the combination of multiple approaches, including genetic manipulation, protein engineering and chemical supplementation, are detailed in order to achieve specific glycan profiles on recombinant glycoproteins for superior biological function and effectiveness.


2001 ◽  
Vol 36 (2) ◽  
pp. 196-201 ◽  
Author(s):  
F. Seibold ◽  
O. Stich ◽  
R. Hufnagl ◽  
S. Kamil ◽  
M. Scheurlen

2007 ◽  
Vol 45 (08) ◽  
Author(s):  
S Schmechel ◽  
V Schachinger ◽  
F Seibold ◽  
C Tillack ◽  
T Ochsenkühn ◽  
...  

ОВЧИННИКОВ А.А., ОВЧИННИКОВА Л.Ю., КОНОВАЛОВ Д.А. Южно-Уральский государственный аграрный университет Аннотация: В опыте были изучены титры антител против основных инфекционных заболеваний птицы (инфекционный бронхит кур ИБК, болезнь Гамборо, ньюкаслская болезнь) в крови у мясных кур кросса ISA Hubbard F-15, получавших пробиотические кормовые добавки на основе Saccharomyces cerevisiae или Васillus subtilis в количестве 0,50 кг/т комбикорма. Исследования показали, что цыплята суточного возраста уже имеют врожденный иммунитет к широко распространенным инфекционным заболеваниям птицы; титры антител к ИБК и болезни Гамборо до 59-суточного возраста имели тенденцию к снижению, затем повышались и достигали максимума к 151-суточному возрасту, затем плавно снижались. У птицы, получавшей добавки пробиотиков, титр антител к ИБК за продуктивный цикл был выше на 11,2-46,1%, к болезни Гамборо - на 7,2-26,8%, ньюкаслской болезни - на 14,4-27,9% по сравнению с контрольной группой. Установлено также, что периодическое применение пробиотиков в первые 45 сут. выращивания ремонтного молодняка, в периоды разноса кур, пика продуктивности и снижения яйцекладки повышает сохранность поголовья на 0,4-8,2%. Ключевые слова: МЯСНЫЕ КУРЫ, РЕМОНТНЫЙ МОЛОДНЯК, ПРОДУКТИВНЫЙ ПЕРИОД, КОРМОВАЯ ДОБАВКА, ПРОБИОТИКИ, СОХРАННОСТЬ, ТИТРЫ АНТИТЕЛ,


2008 ◽  
Vol 57 (1) ◽  
pp. 161-175
Author(s):  
Nikoletta Tóth ◽  
Hamuda Hosam E. A. F. Bayoumi ◽  
Attila Palágyi ◽  
Mihály Kecskés

Az utóbbi években egyre több tanulmány született a mikroorganizmusok nehézfém akkumulációjáról. A mikroszervezetek nehézfémekkel szembeni tűrőképességére és nehézfém felvételére a bioremediációs hasznosíthatóságuk miatt egyre nagyobb figyelmet fordítanak. A mikroorganizmusok tulajdonságai nagyon jól hasznosíthatóak a talajszennyezés monitorozásánál. A toxikus nehézfémek komoly ökológiai problémát jelentenek környezetünkben, ezért kiemelkedő fontosságú a nehézfémekkel szennyezett talajok tisztítása. In vitro , két S. cerevisiae törzs (NSS5099 és NSS7002) nehézfémekkel szembeni toleranciáját vizsgáltuk. A két törzs szaporodási kinetikáját olyan táptalajon tanulmányoztuk, amelyhez 50 µM koncentrációban adtunk Cu 2+ -, Pb 2+ -, Cd 2+ - vagy Ni 2+ -ionokat. A vizsgált nehézfémek élesztőtörzsekre gyakorolt toxicitása csökkenő sorrendben: Cu 2+ > Pb 2+ > Cd 2+ > Ni 2+ . A 350 µM koncentrációjú Cu 2+ , Pb 2+ vagy Cd 2+ és 450 µM koncentrációjú Ni 2+ 48 órás inkubációt követően 50%-kal csökkentette az élősejtek számát. Amikor a nehézfémek táptalajba történő adagolása előtt 50 mM Ca(HCO 3 ) 2 , 75 mM MgSO 4 , vagy 150 mM K 2 SO 4 -ot adtunk a közeghez csökkent a nehézfémek sejtekre gyakorolt toxicitása, és több sejt maradt életben. A 350 és 450 µM koncentrációban lévő nehézfémek toxicitását a fémsók 40%-kal csökkentették. A kapott eredmények alapján az NSS7002 törzs sokkal alkalmasabbnak bizonyult a nehézfémekkel szennyezett talajok tisztítására, mint az NSS5099._


Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document