Expression of inulinase genes in the yeasts Saccharomyces cerevisiae and Kluyveromyces marxianus

Microbiology ◽  
2015 ◽  
Vol 84 (1) ◽  
pp. 23-27 ◽  
Author(s):  
G. G. Sokolenko ◽  
N. A. Karpechenko
2018 ◽  
Vol 23 (3) ◽  
pp. 133-138 ◽  
Author(s):  
IZUMI MATSUMOTO ◽  
TAKAHIRO ARAI ◽  
YUI NISHIMOTO ◽  
VICHAI LEELAVATCHARAMAS ◽  
MASAKAZU FURUTA ◽  
...  

2013 ◽  
Author(s):  
Θεόδωρος Αγγελόπουλος

Στόχος της διατριβής ήταν η ανάπτυξη μιας ολοκληρωμένης μεθοδολογίας βιοτεχνολογικής αξιοποίησης μικτών στερεών και υγρών αποβλήτων της βιομηχανίας τροφίμων (ζύθου, γάλακτος, ζάχαρης), μαζικής εστίασης ή χωματερών για την παραγωγή προϊόντων προστιθέμενης αξίας. Συγκεκριμένα τα απόβλητα που χρησιμοποιήθηκαν ήταν οι φλοιοί και τα ριζίδια βύνης (BSG και MSR αντίστοιχα), το τυρόγαλα, η μελάσσα και οι πούλπες πορτοκαλιού και πατάτας. Έτσι, μελετήθηκε η χρήση μικτών αποβλήτων της βιομηχανίας τροφίμων για την παραγωγή προϊόντων προστιθέμενης αξίας με βάση την SCP, χρησιμοποιώντας τέσσερεις μικροοργανισμούς, το αλκοολανθεκτικό και κρυοανθεκτικό στέλεχος Saccharomyces cerevisiae AXAZ-1, το θερμόφιλο στέλεχος Kluyveromyces marxianus, τη φυσική μικτή καλλιέργεια κεφίρ και το εδώδιμο μανιτάρι Pleurotus ostreatus. Αναλυτικότερα, αρχικά αναλύθηκε η σύσταση των αγροτοβιομηχανικών αποβλήτων ως προς την υγρασία τους, τα ξηρά συστατικά, την πρωτεΐνη και τα σάκχαρα που αυτά περιέχουν, το λίπος, το C.O.D. καθώς και τα φαινολικά συστατικά αλλά και την αντιοξειδωτική ικανότητα που αυτά διαθέτουν. Επιπλέον, τα 6 απόβλητα αναλύθηκαν ως προς την περιεκτικότητά τους σε μέταλλα και αρωματικά συστατικά. Και τα 6 απόβλητα περιείχαν σημαντική ποσότητα σακχάρου αλλά και πρωτεΐνης. Επίσης, όλα τα απόβλητα είχαν υψηλό C.O.D, κάτι που αποδεικνύει το πόσο σημαντικοί ρύποι είναι τα συγκεκριμένα απόβλητα. Επίσης περιείχαν σημαντική συγκέντρωση φαινολικών συστατικών, ακόμη και το τυρόγαλα για το οποίο ήταν κάτι αξιοσημείωτο. Παρόλα αυτά, η αντιοξειδωτική τους ικανότητα ήταν μηδαμινή. Το περιεχόμενο των αποβλήτων σε μέταλλα ήταν αρκετά υψηλό με κύριο συστατικό το μαγνήσιο. Τέλος, τα 6 απόβλητα ήταν πλούσια σε πτητικά συστατικά όπως αυτά προσδιορίστηκαν με ανάλυση headspace SPME GC/MS. Επίσης, μελετήθηκε η χρήση μικτών αποβλήτων ως υποστρώματα παραγωγής SCP με ζυμώσεις υγρής (SmF) και στερεάς κατάστασης (SSF) χρησιμοποιώντας τους μικροοργανισμούς, S. cerevisiae AXAZ-1, K. marxianus ΙΜΒ3, κεφίρ και P. ostreatus. Το υπόστρωμα που παρείχε την μεγαλύτερη απόδοση βιομάζας (g βιομάζας/ g καταναλωθέντος σακχάρου) S. cerevisiae AXAZ-1 μέσω υγρής ζύμωσης ήταν 100 mL πούλπα πορτοκαλιού, 50 mL μελάσσα 4 οBe και 50 mL νερό ενώ για την ζύμωση στερεάς κατάστασης οι ίδιες ποσότητες με την προσθήκη 70 g BSG. Οι βέλτιστες συνθήκες παραγωγής SCP ήταν θερμοκρασία 30 οC και pH 5,5. Όσον αφορά τον K. marxianus, το βέλτιστο υπόστρωμα παραγωγής SCP ήταν 100 mL πούλπα πορτοκαλιού, 30 mL τυρόγαλα, 10 mL μελάσσα, 10 mL πούλπα πατάτας και 50 mL νερό για υγρή ζύμωση, ενώ για την στερεή το βέλτιστο υπόστρωμα περιείχε και 80 g BSG. Οι βέλτιστες συνθήκες παραγωγής SCP ήταν 30 οC και pH 7. Το υπόστρωμα που παρείχε την μεγαλύτερη απόδοση βιομάζας κεφίρ ήταν 100 mL τυρόγαλα, 30 mL πούλπα πορτοκαλιού, 10 mL μελάσσα, 10 mL πούλπα πατάτας και 50 mL νερό, όσον αφορά την υγρή ζύμωση, ενώ για την στερεή ζύμωση προστέθηκαν 60 g BSG και 25 g MSR. Οι βέλτιστες συνθήκες παραγωγής SCP ήταν θερμοκρασία 30 οC και pH 5,5. Όσον αφορά τον μύκητα P. ostreatus το υπόστρωμα το οποίο παρείχε την μεγαλύτερη κατανάλωση σακχάρου και ταυτόχρονα αύξηση της περιεχόμενης πρωτεΐνης αλλά και μεγαλύτερη απόδοση μυκηλίου ήταν 20 mL μελάσσα, 20 mL πούλπα πατάτας, 5 mL τυρόγαλα, 5 mL πούλπα πορτοκαλιού, 30 g BSG και 5 g MSR. Οι βέλτιστες συνθήκες ανάπτυξης μυκηλίου ήταν θερμοκρασία 30 οC και pH 4. Σε όλες τις περιπτώσεις παραγωγής SCP διαπιστώθηκε πως η πούλπα πορτοκαλιού και τα BSG είχαν την δράση προωθητή της παραγωγής SCP. Ακόμη, μελετήθηκε η παραγωγή εδώδιμών μανιταριών P. ostreatus με χρήση τριών τύπων αντιδραστήρων (σακούλα πολυαιθυλενίου, αλουμινένια οριζόντια δοχεία, κάθετοι πλαστικοί αντιδραστήρες) οι οποίοι συμπληρώθηκαν με 1 Kg αποστειρωμένου μικτού στερεού υποστρώματος και στη συνέχεια αφέθηκαν για επώαση στους 25 οC. Μετά το πέρας 40 ημερών δεν διαπιστώθηκε εμφάνιση καρποφοριών. Ακόμη, οι SCP που παράχθηκαν μέσω ζύμωσης μικτών αποβλήτων αξιολογήθηκαν ως τρόφιμο ή ζωοτροφή, αναλύοντας την ποιότητά τους. Παρουσίασαν υψηλή περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη, λίπος και μέταλλα, συστατικά που είναι σημαντικά τόσο για την ανθρώπινη διατροφή όσο και για την διατροφή των ζώων. Επίσης, περιείχαν αρκετά πτητικά συστατικά, που προσέδιδαν ιδιαίτερο άρωμα, κυρίως φρούτων. Η παραγόμενες SCP στη συνέχεια υπέστησαν αυτόλυση και λυοφιλίωση και αξιολογήθηκαν ως εκχύλισμα μικροβιολογίας για την ανάπτυξη βιομάζας S. cerevisiae AXAZ-1 σε συνθετικό θρεπτικό γλυκόζης. Επίσης, για σύγκριση χρησιμοποιήθηκε εμπορικό yeast extract. Τα εκχυλίσματα και το εμπορικό yeast extract χρησιμοποιήθηκαν σε τρείς συγκεντρώσεις (0,3%, 0,4% και 0,5% w/v) και η βιομάζα που παράχθηκε μετά από 48 h ζύμωσης προσδιορίστηκε με προσδιορισμό της οπτικής πυκνότητας με τη βοήθεια πρότυπης καμπύλης απορρόφησης αλλά και σταθμικά μετά από φυγοκέντριση. Τα εκχυλίσματα SCP από υγρές ζυμώσεις αποδείχτηκαν καλύτερα από το εμπορικό yeast extract δίνοντας μεγαλύτερη παραγωγικότητα βιομάζας σε όλες τις συγκεντρώσεις που μελετήθηκαν. Όσον αφορά τα εκχυλίσματα SCP από στερεές ζυμώσεις μόνο αυτό του K. marxianus ήταν καλύτερο σε όλες τις συγκεντρώσεις από το εμπορικό. Αντίθετα, το εκχύλισμα κεφίρ SSF ήταν χειρότερο από το εμπορικό σε όλες τις συγκεντρώσεις που μελετήθηκε.Τέλος, μελετήθηκε η περιεκτικότητα της SCP σε RNA, έτσι ώστε τα εκχυλίσματα SCP να χρησιμοποιηθούν στη συνέχεια ως ενισχυτικό γεύσης σε σούπες καρότου σε σύγκριση με αλάτι και γλουταμινικό μονονάτριο. Η περιεκτικότητα σε RNA ήταν πολύ υψηλή (264-1400 mg/100 g ξηρής SCP) με τις υψηλότερες τιμές να προσδιορίζονται στις SCP από στερεή ζύμωση. Στη συνέχεια τα εκχυλίσματα προστέθηκαν σε σούπα καρότου σε συγκέντρωση 0,5% w/w και σε ίδια ποσότητα προστέθηκαν σε δύο ακόμη σούπες αλάτι και γλουταμινικό νάτριο, αντίστοιχα. Οι σούπες δόθηκαν σε έξι κριτές για αξιολόγηση οι οποίοι βαθμολόγησαν τις σούπες με βάση μια κλίμακα προτίμησης 1-10 (10= Άριστη, 8= Πολύ καλή, 7= Καλή, 6= Μέτρια, 5= Αδιάφορη, 3= Κακή και 1= Πολύ κακή). Οι κριτές βαθμολόγησαν υψηλότερα τις σούπες που περιείχαν γλουταμινικό νάτριο, εκχύλισμα K. marxianus από στερεή ζύμωση και αλάτι ενώ όλες οι άλλες σούπες βαθμολογήθηκαν πιο χαμηλά. Ακολούθως, πραγματοποιήθηκε ανάλυση των αρωματικών ενώσεων με GC/MS όπου διαπιστώθηκε πως οι σούπες που περιείχαν εκχυλίσματα SCP ως ενισχυτικό γεύσης περιείχαν μεγαλύτερη συγκέντρωση πτητικών ενώσεων από αυτή με γλουταμινικό. Έτσι, φαίνεται πως το γλουταμινικό νάτριο μπορεί να αντικατασταθεί επιτυχώς από τα εκχυλίσματα μονοκυτταρικής πρωτεΐνης και έτσι να εξαλειφθούν τα «συμπτώματα του Kινέζικου εστιατορίου» για τα οποία έχει κατηγορηθεί


Author(s):  
Lorena Amaya-Delgado ◽  
Guillermo Flores-Cosío ◽  
Dania Sandoval-Nuñez ◽  
Melchor Arellano-Plaza ◽  
Javier Arrizon ◽  
...  

2014 ◽  
Vol 30 (8) ◽  
pp. 2223-2229 ◽  
Author(s):  
Claudia Lorena Fernandez Lopez ◽  
Sandra Beaufort ◽  
Cédric Brandam ◽  
Patricia Taillandier

2020 ◽  
Vol 29 (1) ◽  
pp. 86-92
Author(s):  
Munkh-Erdene Sugarragchaa ◽  
Lhagvadolgor Batjargal ◽  
Narangerel Mijid ◽  
Urantulkhuur Battumur

Four strains of yeasts isolated from some mare’s fermented milk, whey and fruit were identified using their morphology, biochemistry and phylogenetic characteristics. These yeasts belonged to four genera viz: Candida (one strain), Pichia (one strain), Saccharomyces (one strain) and Kluyveromyces  (one strain). The physiological and biochemical tests of the yeasts carried out showed all isolates to ferment glucose for their growth. All isolates showed elliptical to round spores. Pichia kudriavzevii was able to ferment xylose of the four isolates. The assimilation and fermentation of most sugars by the isolates was variable. The blast sequence query showed that Saccharomyces cerevisiae and Pichia kudriavzevii had maximum identity (100%) with the genomic DNA sequence of MON-21 and MON-22, respectively at both ITS. Isolate Candida boidinii MON-23 was 100% homologous to Candida boidinii 18S rRNA gene sequence. The blast sequence query showed that Kluyveromyces marxianus MON-24 has the maximum identity (99%) with the genomic DNA sequence of Kluyveromyces marxianus at ITS 1 and ITS 4 sequence with that in the Genbank Library Database. Using MEGA 7 software, the phylogenetic trees were constructed to determine the evolutionary relationship of newly identified yeasts from our experiment and previously published yeast species. The sequences of the yeasts were deposited in the National Center for Biotechnology Information (NCBI) database. Ялгаатай эх үүсвэрээс ялгасан хөрөнгөнцрийн шинж чанар Монголчуудын эрт үеэс хэрэглэж ирсэн зарим уламжлалт исгэлэн бүтээгдэхүүн, сүү, сүүн бүтээгдэхүүний дайвар түүхий эд болох шар сүү, жимснээс хөрөнгөнцрийн цэвэр өсгөвөр ялган авч, тэдгээрийн морфологи, биохими, филогенетикийн шинж чанарыг судлав. МОН-21, 22, 23 болон 24 өсгөвөрүүд нь грам эерэг, эсийн урт нь 1.2-10.8 мкм, эсийн өргөн нь 0.5-6.0 мкм хэмжээтэй, пигмент үүсэлт нь цайвар шар өнгөтэй, жигд бөөгнөрсөн, дугуй, товгор хэлбэртэй, МОН-21 өсгөвөр нь нүүрстөрөгчийн эх үүсвэрээр галактоз, декстроз, МОН-22 өсгөвөр нь ксилоз декстроз, МОН-23 өсгөвөр нь сахароз, декстроз, ксилоз, фрюктоз, МОН-24 өсгөвөр нь мальтоз, ксилозыг тус тус ашиглаж чадахгүй байна. Дрожжийн ангилал зүйг ITS ген ашиглан тодорхойлоход, МОН-21 өсгөвөр нь Pichia kudriavzevii DGY49-тай 100%, МОН-22 нь Saccharomyces cerevisiae S5-тай 100%, МОН-23 өсгөвөр нь Candida boidinii NRRL Y-2332-тай 99.88%, МОН-24 өсгөвөр нь Kluyveromyces marxianus CCT 7735-тай 99.88% зүйлд тус тус ижил төсөөтэй байна. Мөн ITS1 болон ITS4 праймеруудыг ашиглан ялгасан өсгөвөрүүдийн зүйлийн генетик хамаарлыг тодорхойлоход, өсгөвөр МОН-23 болон МОН-24 нь бусад өсгөврүүдээс өөр хэмжээтэй буюу жижиг 18S рРНХ-ийн генийн молекултай, МОН-21 болон МОН-22 өсгөвөрүүд нь том 28S рРНХ-ийн генийн молекул хэмжээтэй байна. Эдгээр өсгөвөрүүдийг цаашид нарийвчлан судалж, исгэлтийн үйлдвэрлэлд ашиглах боломжтой хөрөнгө гарган авах, цэвэр өсгөврийн сан байгуулах, бүртгэлжүүлэх, дата мэдээлэл үүсгэх, үндэсний үйлдвэрлэлийг хөрөнгөөр хангах боломжийг нээж өгнө.  Түлхүүр үг: хөрөнгөнцөр, kluyveromyces marxianus, рРНХ, pichia kudriavzevii, декстроз


2021 ◽  
pp. 39-60
Author(s):  
Amanda Fernandes Brito

A produção do etanol como combustível é uma alternativa promissora a utilização dos combustíveis fósseis. Nesse contexto, os resíduos agroindustriais têm despontado como matérias-primas capazes de aumentar a produção de etanol sem competir com a produção de alimentos. Assim, tanto o soro de queijo, quanto subprodutos lignocelulósicos podem ser utilizados como substratos para a produção de etanol. No entanto, a levedura Saccharomyces cerevisiae é incapaz de metabolizar a lactose presente no soro de queijo e de crescer nas elevadas temperaturas requeridas no processo de Sacarificação e Fermentação Simultâneas (SSF) de biomassa lignocelulósica. Por outro lado, Kluyveromyces marxianusCCT7735 é uma linhagem desta levedura, que apresenta potencial para produzir etanol tanto a partir de soro de queijo quanto de subprodutos lignocelulósicos. Isto porque ela fermenta lactose e cresce em altas temperaturas. Todavia, ela tem o seu crescimento inibido em altas concentrações de etanol. Portanto, para viabilizar a produção de etanol, torna-se necessário compreender os mecanismos de resposta ao estresse por etanol em K. marxianus. Sendo assim, este trabalho teve como objetivo descrever e analisar os principais mecanismos de resposta ao estresse por etanol em leveduras,descritos na literatura, através de uma revisão bibliográfica, a fim de compreender como K.  marxianus responde ao estresse etanólico. Nesse sentido, a abordagem utilizada nesta pesquisa foi do tipo exploratório, descritivo e bibliográfico.Desta forma, os artigos obtidos a partir das bases de dados eletrônicos foram analisados e sistematizados de acordo com a sua relevância para a compreensão dos mecanismos de respostas ao estresse por etanol em leveduras. A partir da análise dos mecanismos envolvidos na tolerância ao etanol descritos na literatura concluiu-se que eles contribuem para o entendimento das respostas moleculares ao estresse etanólico em K. marxianus. Entretanto, devido à complexidade destes mecanismos torna-se necessário fazer um estudo mais detalhado a nível molecular a fim de compreendê-los melhor.


Ra Ximhai ◽  
2018 ◽  
pp. 37-48
Author(s):  
Wscary Fabián Ortiz Ávila ◽  
Laura Virginia Madrigal Ambriz ◽  
Bernardo Gustavo Salazar Aguilar ◽  
Jorge Alberto Cárdenas Magaña

La presente investigación aborda una problemática existente entre la región sur de Jalisco y la región norte del estado de Colima, generada por parte de las empresas productoras de queso al verter indiscriminadamente su lactosuero residual directamente al drenaje, ocasionando una contaminación de los recursos hídricos, un daño a los ecosistemas así como a la flora y fauna dependiente de los mismos; además que se desperdicia un residuo con un potencial económico para las mismas empresas productoras. Como solución a este problema se propone darle un valor comercial a esos residuos, planteando la elaboración de un nuevo producto mediante los procesos de fermentación alcohólica y láctica producida en el lactosuero, que le otorga al mismo, nuevas condiciones químicas, físicas y sensoriales. El proyecto se dividió en dos etapas, la primera consistió en la formulación de seis diferentes bebidas a base de lactosuero, las tres primeras elaboradas a partir de la fermentación con gránulos de kéfir, suero, sacarosa y miel en diferentes concentraciones, y las tres últimas fermentadas con Kluyveromyces marxianus-Saccharomyces cerevisiae y como sustrato una mezcla de suero lácteo, sacarosa y miel, de estas seis formulaciones se eligieron las dos que mejores características organolépticas obtuvieron, a partir de las cuales en la etapa dos del proyecto se tomaron como base para la formulación de dos nuevas bebidas, las cuales fueron: Tkéfir (Lactosuero + Gránulos de kéfir + Sacarosa), TK. marxianus (Lactosuero + K. marxianus-S. cerevisiae + Sacarosa); las fermentaciones se realizaron bajo las mismas condiciones, la única variante fue el tiempo, debido a que la fermentación lactosuero /Kluyveromyces marxianus a los siete días se le adicionó Saccharomyces cerevisiae y se dejó fermentar una semana más para que cumpliera con las características deseadas, y la de lactosuero/kéfir solo necesitó cuatro días, siendo la bebida que presentó mejores características. Las bebidas fermentadas que se desarrollaron presentaron un contenido de etanol en entre 2.5 y 2.9%, proporcionando un grado alcohólico menor que el que contienen las bebidas alcohólicas refrescantes (4.5-6.0%), con un aporte de proteína mayor de 3 g / 100 ml y sin grasa. Estas bebidas fueron aceptadas por el panel de evaluadores, por lo que representan un producto refrescante y a la vez nutritivo que podría contribuir a mejorar la dieta de los jóvenes y adultos.


Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document