scholarly journals COMPARAÇÃO DA EFICIÊNCIA DAS COLORAÇÕES DE ZIEHL-NEELSEN MODIFICADO E SAFRANINA MODIFICADA NA DETECÇÃO DE OOCISTOS DE Cryptosporidium spp. (EUCOCCIDIORIDA, CRYPTOSPORIDIIDAE) A PARTIR DE AMOSTRAS FECAIS DE BEZERROS DE 0 A 3 MESES

2016 ◽  
Vol 17 (1) ◽  
pp. 119-125
Author(s):  
Renata Dias Rodrigues ◽  
Lara Reis Gomes ◽  
Rafael Rocha de Souza ◽  
Fernando Cristino Barbosa
Keyword(s):  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Cryptosporidium Spp ◽  
Cryptosporidium Andersoni

Resumo A criptosporidiose bovina é causada principalmente por quatro espécies distintas: Cryptosporidium parvum, Cryptosporidium bovis, Cryptosporidium ryanae e Cryptosporidium andersoni. A espécie Cryptosporidium parvum (Ordem: Eucoccidiorida, Família: Cryptosporidiidae) é considerada de alto potencial zoonótico, podendo infectar humanos por intermédio da eliminação de oocistos tanto pelos bovinos quanto pelo próprio humano. O objetivo desta pesquisa foi verificar a ocorrência de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros (75 machos e 77 fêmeas), tendo sido coletadas 152 amostras de fezes de animais do nascimento até os três meses de idade. O material foi submetido às técnicas de coloração de Ziehl-Neelsen modificado e Safranina modificada, as lâminas foram observadas em toda sua extensão ao microscópio óptico para a verificação da presença de oocistos desta enteroparasitose. Os resultados demonstraram 17,1% (26/152) de positividade no total das amostras examinadas e a análise estatística revelou não haver diferença entre o sexo e as técnicas de coloração utilizadas neste estudo. Conclui-se que a infecção por Cryptosporidium spp. esta presente nas propriedades avaliadas, porém são necessários mais estudos para que o risco de infecção seja mensurado adequadamente e medidas profiláticas implementadas.

scholarly journals Diagnóstico de criptosporidiose em amostras fecais de bezerros por imunofluorescência direta e microscopia de contraste de fase

2011 ◽  
Vol 41 (6) ◽  
pp. 1057-1062 ◽  
Author(s):  
Weslen Fabricio Pires Teixeira ◽  
William Marinho Dourado Coelho ◽  
Ricardo Velludo Gomes de Soutello ◽  
Fernando Paes de Oliveira ◽  
Camila Guariz Homem ◽  
...  
Keyword(s):  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Cryptosporidium Spp ◽  
Cryptosporidium Andersoni

O presente estudo teve como objetivo comparar as técnicas de imunofluorescência direta (IFD) e a microscopia de contraste de fase em solução de Sheather (MCF), para detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros. A determinação dos limiares detecção da IFD e da MCF foi realizada utilizando cinco alíquotas de uma amostra fecal de bezerro, comprovadamente negativa para Cryptosporidium spp., adicionadas com diferentes quantidades de oocistos de Cryptosporidium parvum. Ao exame das 5 alíquotas, a IFD e a MCF apresentaram, respectivamente, limiares de detecção de 3,3x104 (duas alíquotas positivas) e 3,3x105 oocistos (1 alíquota positiva) por grama de fezes. Foram também realizadas a comparação entre a positividade obtida e uma análise semiquantitativa do número de oocistos observados por campo de microscopia, em ambos os métodos, em 300 amostras fecais de bezerros. Entre as 300 amostras, 19,7% (59/300) foram positivas pela IFD, com diferença estatisticamente significante (P=0,0098) quando comparada com a positividade obtida pela MCF, que foi de 11,7% (35/300). As amostras positivas foram submetidas à reação em cadeia da polimerase para amplificação de fragmentos da subunidade 18S do rRNA, com posterior sequenciamento dos fragmentos amplificados, o que permitiu a identificação de Cryptosporidium andersoni em 11,9% (7/59) e de C.parvum em 88,1% (52/59) das amostras. Os resultados observados comprovam que a IFD foi mais eficiente que a MCF para detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros.

scholarly journals INFECÇÃO NATURAL POR Cryptosporidium parvum: RELATO DE CASO (Natural infection with Cryptosporidium parvum: case report)

2020 ◽  
Vol 15 (5) ◽  
Author(s):  
Ana Paula Molinari Candeias ◽  
Karim Cristhine Pase Montagnini ◽  
Liliane Aparecida Oliveira De Paula ◽  
Ana Julia Dal Curtivo Back ◽  
Fransael Franklyn Araújo Da Silva ◽  
...  
Keyword(s):  
Case Report ◽  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Nested Pcr ◽  
Natural Infection ◽  
Ssu Rrna ◽  
Cryptosporidium Spp

A diarreia neonatal bovina é uma doença de origem multifatorial e entre os agentes envolvidos está o Cryptosporidium parvum, que ganha destaque por ser o principal protozoário responsável por ocasionar diarreia em bezerros neonatos e possuir elevado potencial zoonótico. O presente trabalho teve como objetivo, descrever um caso de infecção natural por C. parvum em um bovino diagnosticado no Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) e no Laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais (DOPA) da Universidade Federal do Paraná (UFPR) – Setor Palotina. Foi atendido no Hospital Veterinário da UFPR, um bovino, fêmea, Girolando, com 10 dias de vida, e conforme o histórico, o animal foi adquirido de outra propriedade que realizava a colostragem de forma inadequada, e desde a aquisição, o animal começou a apresentar manifestações clínicas como prostração e diarreia amarelada e fétida. Realizou-se tratamento, porém sem sucesso, e o animal foi a óbito, sendo encaminhado para o LPV para a autópsia. No exame macroscópico, observou-se baixo escore corporal com discreta deposição de tecido adiposo em subcutâneo e mesentério, a mucosa oral e ocular estavam levemente pálidas e no intestino, notou-se leve distensão por conteúdo gasoso e áreas multifocais com leve quantidade de conteúdo avermelhado líquido, por vezes, amarelado e fétido. Na análise histopatológica, notou-se nos no ápice das vilosidades, a presença leve de estruturas multifocais, arredondadas, eosinofílicas, medindo entre 1 a 2µm, compatíveis com Cryptosporidium spp. Parte do conteúdo fecal foi remetido ao DOPA, onde realizou-se a análise microscópica e molecular. Para a análise microscópica, foi confeccionado esfregaço fecal com o conteúdo resultante da centrifugo sedimentação, posteriormente, corado pelo método de Ziehl-Neelsen modificado (ORTOLANI, 2000). A análise confirmou a identificação de oocistos de Cryptosporidium spp. Após a análise microscópica a amostra foi submetida a clarificação, extração de DNA e nested-PCR (nPCR) (XIAO et al. 1999). Para a realização da PCR (Reação em Cadeia pela Polimerase) e nPCR, uma alíquota da amostra foi utilizada para a extração de DNA utilizando o Kit ChargeSwitch® gDNA Mini Tissue (Invitrogen). A região 18 SSU rRNA foi selecionada como sequência alvo para amplificação de DNA, sendo que, o amplicon esperado era de 826-864pb. A reação foi realizada com o volume final de 25μL e o produto amplificado foi submetido à eletroforese em gel de agarose a 1,6%. Com o intuito de identificar a espécie envolvida na infecção, após a amostra apresentar resultado positivo na técnica de nPCR, esta foi encaminhada para o sequenciamento e, após a análise da sequência de dados obtida, foi determinado que Cryptosporidium parvum era a espécie envolvida neste caso. Desta forma, o monitoramento dos animais para a obtenção do diagnóstico precoce é de suma importância para evitar as possíveis perdas na produção animal e gerenciar o risco da transmissão para seres humanos.

scholarly journals OCORRÊNCIA DE Cryptosporidium spp. EM SUÍNOS (Sus scrofa domesticus) CRIADOS DE MANEIRA EXTENSIVA

2020 ◽  
Vol 15 (5) ◽  
Author(s):  
Ricardo Babinski Bregonde ◽  
Vinicius Dahm ◽  
Ana Paula Molinari Candeias ◽  
Daniela Borges da Cruz ◽  
Nelson Luis Mello Fernandes ◽  
...  
Keyword(s):  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Sus Scrofa ◽  
Cryptosporidium Spp ◽  
Sus Scrofa Domesticus

A criptosporidiose é uma doença parasitária, causada por coccídios do gênero Cryptosporidium, podendo acometer uma gama de animais, inclusive os suínos. A doença leva a perda do epitélio intestinal e vilosidades, resultando em diminuição na absorção de nutrientes e consequentemente, perdas na cadeia produtiva (LIMA, 2018). É uma enfermidade de caráter zoonótico, sendo ocasionada nos seres humanos principalmente pelo Cryptosporidium parvum, levando a quadros assintomáticos, ou a sintomas de diarreia, náuseas, vômito e tosse (ROSSI et al., 2014). Em pacientes imunocomprometidos, causa enterite grave, podendo ser fatal, caracterizando um grave problema de saúde pública. Essa mesma espécie é a principal responsável pela infecção em diversos animais domésticos e silvestres, demonstrando assim a importância da doença em um contexto de Saúde Única. Pesquisar a ocorrência de Cryptosporidium spp. em fezes de suínos criados de maneira extensiva no município de Toledo, região Oeste do estado do Paraná, Brasil. As coletas foram realizadas em duas propriedades rurais distintas, localizadas no município de Toledo. Ambas as propriedades possuíam instalações simples, ausência de manejo antiparasitário e ausência de tratamento dos excrementos dos animais. Dez amostras fecais foram colhidas diretamente da ampola retal dos animais, sendo seis amostras da primeira propriedade e quatro da segunda propriedade. As amostras foram armazenadas em frascos com tampa rosca, refrigeradas e analisadas em até 48 horas. Para a detecção dos oocistos do protozoário, foi utilizada a técnica de Ziehl-Neelsen modificado. Dos dez animais testados, apenas dois demonstraram positividade para o protozoário (20%) na técnica utilizada. Ambos os animais positivos eram oriundos da primeira propriedade. A presença do protozoário nos animais nas propriedades avaliadas neste estudo indica um risco de contaminação de animais e seres humanos que convivem e manejam os mesmos, bem como, uma possível contaminação ambiental do solo e afluentes. É importante recomendar nestes casos, a adoção de manejo antiparasitário nos animais e destinação correta dos excrementos, de modo a objetificar a eliminação da infecção parasitária nos animais. Diminuindo dessa forma, as chances de infecção de outros animais, do ambiente e do homem.

scholarly journals Genetic analysis of Cryptosporidium from 2414 humans with diarrhoea in England between 1985 and 2000

2006 ◽  
Vol 55 (6) ◽  
pp. 703-707 ◽  
Author(s):  
F. Leoni ◽  
C. Amar ◽  
G. Nichols ◽  
S. Pedraza-Díaz ◽  
J. McLauchlin
Keyword(s):  
Genetic Analysis ◽  
Cryptosporidium Parvum ◽  
18S Rdna ◽  
Oocyst Wall ◽  
Cryptosporidium Hominis ◽  
Rdna Genes ◽  
Cryptosporidium Andersoni ◽  
Faecal Samples ◽  
Pcr Rflp

The characterization of Cryptosporidium using DNA extracted from whole faecal samples collected from 2414 humans with diarrhoea in England between 1985 and 2000 where cryptosporidial oocysts were detected using conventional methods is described. Characterization was achieved by PCR/RFLP and DNA sequencing of fragments of the Cryptosporidium oocyst wall protein and the 18S rDNA genes. Cryptosporidium parvum was detected in 56.1 % of cases, Cryptosporidium hominis in 41.7 % and a mixture of C. parvum and C. hominis in 0.9 %. In the remainder of cases, Cryptosporidium meleagridis (0.9 %), Cryptosporidium felis (0.2 %), Cryptosporidium andersoni (0.1 %), Cryptosporidium canis (0.04 %), Cryptosporidium suis (0.04 %) and the Cryptosporidium cervine type (0.04 %) were detected.

Cooking Mussels (Mytilus galloprovincialis) by Steam Does Not Destroy the Infectivity of Cryptosporidium parvum

2006 ◽  
Vol 69 (4) ◽  
pp. 948-950 ◽  
Author(s):  
HIPÓLITO GÓMEZ-COUSO ◽  
FERNANDO MÉNDEZ-HERMIDA ◽  
JOSÉ ANTONIO CASTRO-HERMIDA ◽  
ELVIRA ARES-MAZÁS
Keyword(s):  
High Risk ◽  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Mytilus Galloprovincialis ◽  
Foodborne Illnesses ◽  
Cryptosporidium Spp ◽  
Neonatal Mice ◽  
Cryptosporidium Parvum Oocysts

The consumption of shellfish has increased considerably worldwide, with an associated increase in foodborne illnesses. Among the bivalves, the mussels are usually cooked by steam, which constitutes a typical dish in several regions. In this article, we demonstrate that this preparation is not sufficient to destroy completely the infectivity of Cryptosporidium parvum. Oocysts recovered from experimentally contaminated mussels (Mytilus galloprovincialis) were infectious to neonatal mice after cooking. Although, to date, no official cases of cryptosporidiosis linked to shellfish consumption have been reported, we recommend that people with reduced immunity avoid this type of food because they are at high risk of being infected with Cryptosporidium spp. after eating raw or undercooked contaminated bivalves.

scholarly journals Bile Acids Enhance Invasiveness of Cryptosporidium spp. into Cultured Cells

2006 ◽  
Vol 74 (6) ◽  
pp. 3342-3346 ◽  
Author(s):  
Hanping Feng ◽  
Weijia Nie ◽  
Abhineet Sheoran ◽  
Quanshun Zhang ◽  
Saul Tzipori
Keyword(s):  
Protein Secretion ◽  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Bile Salts ◽  
Cultured Cells ◽  
Sodium Taurocholate ◽  
Gliding Motility ◽  
Cryptosporidium Hominis ◽  
Future Studies ◽  
Cryptosporidium Spp ◽  
Host Parasite

ABSTRACT Bile salts such as sodium taurocholate (NaTC) are routinely used to induce the excystation of Cryptosporidium oocysts. Here we show that NaTC significantly enhanced the invasion of several cultured cell lines by freshly excysted Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium hominis sporozoites. A variety of purified bile salts or total bile from bovine also enhanced the invasion of cultured cells by C. parvum. Further studies demonstrated that NaTC increased protein secretion and gliding motility of sporozoites, the key processes for successful invasion. These observations may lead to improved Cryptosporidium infectivity of cultured cells and help future studies on the host-parasite interaction.

Prevalence and molecular characterisation of Cryptosporidium spp. in goat kids

2018 ◽  
Author(s):  
A. K. Dixit ◽  
Pooja Dixit ◽  
M.L.V. Rao ◽  
Rohita Gupta ◽  
P. C. Shukla
Keyword(s):  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Cryptosporidium Species ◽  
Field Conditions ◽  
Rrna Gene ◽  
Molecular Characterisation ◽  
Ssu Rrna ◽  
Cryptosporidium Spp ◽  
Faecal Samples ◽  
Significant Difference ◽  
Pcr Rflp

Prevalence and molecular characterisation of Cryptosporidium species was done in kids belonging to organised and non-organised goat farms at Jabalpur. The overall prevalence of Cryptosporidium was 14.63%. The prevalence was non-significantly higher in male kids (16.16%) as compared to that of female kids (13.21%). Age wise prevalence was higher in kids up to one month age (16.13%) than that of kids upto 3 months age (13.99%). No significant difference was found in prevalence among different breeds and in kids kept in farm or field conditions. The prevalence was non-significantly higher in non-diarrhoeic kids than diarrhoeic kids. Most of the infections were of one score (76.6%). Molecular characterisation by PCR-RFLP of 18S SSU rRNA gene revealed presence of Cryptosporidium parvum species in positive faecal samples.

Predominance of Cryptosporidium parvum genotype among diarrheic children from Egypt as an indicator for zoonotic transmission

2014 ◽  
Vol 60 (1) ◽  
Author(s):  
Maysa Ahmad Eraky ◽  
Azza Mohammed-Salah El-Hamshary ◽  
Hassan Hassan Hamadto ◽  
Kareem Fetouh Abdallah ◽  
Wafaa Moustafa Abdel-Hafed ◽  
...  
Keyword(s):  
Polymerase Chain Reaction ◽  
Restriction Fragment Length Polymorphism ◽  
Cryptosporidium Parvum ◽  
Length Polymorphism ◽  
Fragment Length ◽  
Fragment Length Polymorphism ◽  
Chain Reaction ◽  
Cryptosporidium Spp ◽  
Polymerase Chain ◽  
Restriction Fragment Length

AbstractCryptosporidium is a genus of zoonotic pathogens transmissible from a variety of animals to humans and is a considerable public health concern. It is a significant cause of diarrheal disease in developing and industrialized nations. Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium hominis are the main agents of cryptosporidiosis in humans. In this study we identified the genotypes of the Cryptosporidium isolates from clinical samples from diarrheic children using polymerase chain reaction (PCR) amplification and restriction fragment length polymorphism (RFLP) analyses of the TRAP-C2 gene (Thrompodin Related Adhesive Protein). A total of 430 fecal specimens from 1 to 14 years children were collected from inpatient and outpatient clinics of Benha University, Educational and Children Specialized Hospitals, Benha, Qalubyia, and were microscopically examined for Cryptosporidium spp. All infected samples were also analyzed using nested PCR. A polymerase chain reaction (PCR)-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis of the (266-366 bp) of TRAP-C2 gene was also used to detect and identify Cryptosporidium spp. in PCR- positive samples. The results showed that 50 (11.63%) of the specimens were positive for Cryptosporidium spp. Genomic amplification and restriction digestion of the PCR products by BstETI, Hae III for TRAP-C2 gene restriction enzymes revealed that 82% (41/50) had C. parvum, 12% (6/50) had C. hominis, and three (3/50) samples (6%) had mixed infections. In conclusion, elevated prevalence of C. parvum, suggesting animal-human (zoonotic) transmission and further investigations are required to determine the subgenotypes of C. parvum to clarify the mode of transmission in order to improve the control measures.

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