Цель работы - измерение уровня белков, ассоциированных с сигнальными путями киназы mTOR (mTOR, Raptor, Rictor, 4Е-ВР1 p70-S6K1, AKT) в клетках кожи выделенных при операции абдоминопластики у пациентов с нормальной массой тела и ожирением. Основное значение исследования - установление участия сигнальных путей киназы mTOR в патогенетических процессах при ожирении и их роли в развитии послеоперационных осложнений при операции абдоминопластики. Методика. Клетки кожи выделяли из операционного материала ферментативной обработкой, затем восстанавливали в полной среде, после чего проводили иммунотипирование маркеров рецепторов и внутриклеточных белков моноклональнми антителами меченными флуоресцентными красителями Интенсивность флуоресценции анализировали на проточном цитометре. Результаты. Проведено сравнение уровня белков, связанных с сигнальными путями киназы mTOR, в выделенных после абдоминопластики клетках кожи при ожирении и нормальной массе тела. Было установлено повышение уровня белков, ассоциированных с киназой mTOR, в клетках кожи пациенток с ожирением. Показано при ожирении преимущественное участие первого комплекса mTORC1 в активации клеток. Установлено повышение активности вторичных мессенджеров киназы mTOR - фактора 4E-BP1 и рибосомальной киназы p70-S6K1, передающих сигналы на рибосомы для синтеза белка в фибробластах и кератиноцитах кожи пациентов с ожирением после абдоминопластики. Заключение. Полученные данные отражают патогенетические особенности ожирения, что может иметь значение в развитии послеоперационных осложнений, наблюдаемых у пациенток с ожирением после абдоминопластики.
Aim. To measure expression of kinase mTOR-associated proteins (mTOR, Raptor, Rictor, 4E-BP1 p70-S6K1, AKT) in skin cells isolated from patients with normal body weight and obesity after abdominoplasty. The importance of this study was in determining the role of mTOR kinase signaling pathways in the pathogenesis of obesity and obesity-associated complications after abdominal surgery. Methods. Skin cells were isolated from surgical material by enzymic treatment, restored in a complete medium, and then stained with monoclonal antibodies to receptors and intracellular proteins. The fluorescence intensity was analyzed with a flow cytometer. Results. Expression of proteins associated with mTOR kinase signaling pathways was compared in isolated skin cells from patients with obesity and normal body weight. Increased mTOR protein expression was found to be associated with obesity. The first mTORC1 complex primarily contributed to the activation of skin cells from obese patients after abdominoplasty. Activities of mTOR second messengers, 4E-BP1 kinase and ribosomal kinase p70-S6K1, which transmit signals to ribosomes for protein synthesis, were elevated in skin fibroblasts and keratinocytes of patients with obesity after abdominoplasty. Conclusion. Results of this study delineated features of the pathogenesis of obesity that may be related with postoperative complications of abdominoplasty typical for obese patients.
MiR-592 activates the mTOR kinase, ERK1/ERK2 kinase signaling and imparts neuronal differentiation signature characteristic of Group 4 medulloblastoma
