scholarly journals Διερεύνηση της επίδρασης το πρωτόζωου Toxoplasma gondii στη γονιμοποιητική ικανότητα του κριού

2021 ◽  
Author(s):  
Θεοφάνης Φάης
Keyword(s):  
Toxoplasma Gondii ◽  
Computer Assisted ◽  
Sperm Analysis ◽  
Computer Assisted Sperm Analysis ◽  
Analysis System

Σκοπός αυτής της μελέτης ήταν η διερεύνηση της επίδρασης της πειραματικής μόλυνσης με Toxoplasma gondii στην ποιότητα του σπέρματος του κριού. Τριάντα δύο άνηβοι κριοί ηλικίας 5 μηνών χωρίστηκαν σε 4 ομάδες (n=8). Η ομάδα Α αποτέλεσε την ομάδα ελέγχου, ενώ οι υπόλοιπες τρεις ομάδες (Β, Γ, Δ) μολύνθηκαν από το στόμα με 5000 ώριμες ωοκύστεις του πρωτόζωου T. gondii. Στην ομάδα Γ χορηγήθηκε σουλφαδιμιδίνη (33mg/kg ΣΒ, i.m., ανά διήμερο, για 8 ημέρες) 2 μήνες μετά τη μόλυνση και στην ομάδα Δ η ίδια αγωγή δύο φορές (24 ώρες μετά τη μόλυνση και 2 μήνες αργότερα). Η ομάδα Β δεν έλαβε φαρμακευτική αγωγή. Δείγματα αίματος συλλέγονταν ανά 15 ημέρες για την ανίχνευση ειδικών αντισωμάτων IgG (ELISA). Τα ζώα όλων των ομάδων θανατώθηκαν 4 μήνες μετά τη μόλυνση και από τις επιδιδυμίδες τους συλλέχθηκαν δείγματα σπέρματος τα οποία υποβλήθηκαν σε α) ανίχνευση του παρασίτου με PCR, β) εξετάσεις ποιοτικών χαρακτηριστικών: πυκνότητα (αιμοκυτταρόμετρο Neubauer), ζωτικότητα και μορφολογία (χρώση Εωσίνης–Νιγροσίνης), κινητικότητα (computer–assisted sperm analysis system — CASA), βιοχημική λειτουργικότητα των μεμβρανών των σπερματοζωαρίων (δοκιμή HOS) και ακεραιότητα της δομής της χρωματίνης (DNA) του πυρήνα των σπερματοζωαρίων (δοκιμή πορτοκαλόχρωμης ακριδίνης). Επιπλέον, λήφθηκαν ιστοτεμάχια από τους όρχεις για ιστοπαθολογική εξέταση. Στα μολυσμένα ζώα ο τίτλος αντισωμάτων αυξήθηκε τη 2η εβδομάδα μετά τη μόλυνση και παρέμεινε υψηλός για 4 μήνες. Η χορήγηση σουλφαδιμιδίνης i.m. 24 ώρες μετά τη πειραματική μόλυνση άνηβων αρσενικών αμνών με T. gondii, επέφερε καθυστέρηση στην ανοσιακή απόκριση κατά 1 εβδομάδα, αλλά και χαμηλότερες τιμές ειδικών αντισωμάτων IgG. Το DNA του παρασίτου ανιχνεύθηκε σε 3 δείγματα σπέρματος μολυσμένων κριών (12,5%), 15 εβδομάδες μετά τη μόλυνση. Σημαντικά υψηλότερες τιμές παρατηρήθηκαν στη ζωτικότητα και στη βιοχημική λειτουργικότητα των μεμβρανών των σπερματοζωαρίων στην ομάδα ελέγχου σε σύγκριση με τις μολυσμένες ομάδες, επίπεδο σημαντικότητας p <0,05. Oι μορφολογικές ανωμαλίες ήταν περισσότερες στις ομάδες Γ, Δ έναντι της Α και στη Γ έναντι της Β (p<0,05). Η πειραματική μόλυνση με T. gondii δεν επέφερε κάποια σοβαρή επιβάρυνση στα κύρια χαρακτηριστικά κίνησης του σπέρματος των κριών και δεν επηρέασε την ακεραιότητα της δομής της χρωματίνης (DNA) του πυρήνα των σπερματοζωαρίων τους. Η ιστοπαθολογική εξέταση στους όρχεις αποκάλυψε όμοια ευρήματα με ελάχιστες διακυμάνσεις μεταξύ των μολυσμένων ομάδων, οι οποίες χαρακτηρίζονταν κυρίως από αυξημένο διάμεσο συνδετικό ιστό, μη πυώδη φλεγμονή και παρουσία σπερματικών σωληναρίων με διαταραχή της σπερματογένεσης, τα οποία αυξάνονταν βαθμιαία από την Δ στην Γ και στην ομάδα Β. Δεν ανευρέθηκαν κύστεις τοξοπλάσματος σε κανένα από τα δείγματα ιστών από τα μολυσμένα ζώα. Συνοψίζοντας, η ολοκλήρωση της παρούσας διατριβής οδήγησε στo συμπέρασμα ότι η πειραματική μόλυνση κριών κατά την προ–εφηβική ηλικιακή περίοδο με ώριμες ωοκύστεις του Τ. gondii υποβαθμίζει την ποιότητα του σπέρματος κατά την εφηβεία, συνεπώς και τη γονιμοποιητική ικανότητά του, ενώ η χορήγηση σουλφαδιμιδίνης δεν μπορεί να αποτρέψει αυτό το αποτέλεσμα.

scholarly journals Post-Thaw Sperm Quality and Functionality in the Autochthonous Pig Breed Gochu Asturcelta

Animals ◽  
2021 ◽  
Vol 11 (7) ◽  
pp. 1885
Author(s):  
José Néstor Caamaño ◽  
Carolina Tamargo ◽  
Inmaculada Parrilla ◽  
Felipe Martínez-Pastor ◽  
Lorena Padilla ◽  
...  
Keyword(s):  
Genetic Resource ◽  
Sperm Quality ◽  
Genetic Material ◽  
Mitochondrial Activity ◽  
Computer Assisted ◽  
Kinematic Parameters ◽  
Linear Mixed Effects ◽  
Sperm Analysis ◽  
Computer Assisted Sperm Analysis ◽  
Analysis System

Genetic resource banks (GRB) preserve the genetic material of endangered, valuable individuals or genetically relevant breeds. Semen cryopreservation is a crucial technique to reach these goals. Thus, we aimed to assess the sperm parameters of semen doses from the native pig breed Gochu Asturcelta stored at the GRB of Principado de Asturias (GRB-PA, Gijón, Spain), focusing on intrinsic and extrinsic (boar, season) factors. Two straws per boar (n = 18, 8–71 months of age) were thawed, pooled, and assessed after 30 and 150 min at 37 °C by CASA (computer-assisted sperm analysis system; motility and kinematic parameters) and flow cytometry (viability, acrosomal status, mitochondrial activity, apoptosis, reactive oxygen species, and chromatin status). The effects of age, incubation, and season on post-thawing quality were determined using linear mixed-effects models. Parameters were on the range for commercial boar breeds, with chromatin status (SCSA: fragmentation and immaturity) being excellent. Incubation decreased sperm quality and functionality. The boar age did not have a significant effect (p > 0.05), but the between-boar variability was significant (p < 0.001). The season significantly affected many parameters (motility, kinematics, viability, acrosomal status, mitochondrial activity), especially after 150 min of incubation. In general, samples collected in spring and summer showed higher quality post-thawing, the lowest in winter. In conclusion, the sperm doses from the Gochu Asturcelta breed stored at the GRB-PA showed excellent chromatin status and acceptable characteristics after thawing. Therefore, boar and seasonal variability in this autochthonous breed could be relevant for cryobank management.

Artificial fertilisation in a terrestrial toadlet (Pseudophryne guentheri): effect of medium osmolality, sperm concentration and gamete storage

2013 ◽  
Vol 25 (8) ◽  
pp. 1134 ◽  
Author(s):  
Aimee J. Silla
Keyword(s):  
Sperm Concentration ◽  
Sperm Storage ◽  
Computer Assisted ◽  
Sperm Viability ◽  
Short Term ◽  
Terrestrial Environment ◽  
Sperm Analysis ◽  
Fertilisation Success ◽  
Computer Assisted Sperm Analysis ◽  
Analysis System

Anurans exhibit a greater reproductive diversity than any other vertebrate order. However, studies investigating the effects of the external fertilisation environment on fertilisation success are limited to aquatic-breeding species. This study investigated the effects of fertilisation medium osmolality, sperm concentration and short-term oocyte storage on fertilisation success in a terrestrial-breeding anuran, Pseudophryne guentheri. Split-clutch experimental designs were used to determine optimal fertilisation conditions. To determine the effect of short-term sperm storage, sperm viability was assessed using fluorescence microscopy and percentage sperm motility and velocity quantified with a computer-assisted sperm analysis system. Fertilisation success was highest in media ranging in osmolality from 25 mOsm kg–1 to 100 mOsm kg–1, representing a broader range and higher optimal osmolality than previously reported for aquatic breeders. High rates of fertilisation (>75%) were achieved in relatively low sperm concentrations (2.5 × 104 mL–1). Oocytes stored in isotonic solutions (200 mOsm kg–1) retained fertilisation capacity (32%) after 8 h of storage, while sperm suspensions maintained motility (≥26%) for 13 days. Additional studies on terrestrial-breeding anurans will be required to ascertain whether the optimal fertilisation conditions reported reflect adaptations to achieve fertilisation in a terrestrial environment.

scholarly journals Application of computer-assisted sperm analysis system to elucidate lack of effects of cyclophosphamide on rat epididymal sperm motion.

2001 ◽  
Vol 26 (2) ◽  
pp. 75-83 ◽  
Author(s):  
Hashihiro HIGUCHI ◽  
Masanao NAKAOKA ◽  
Satoshi KAWAMURA ◽  
Yusuke KAMITA ◽  
Akira KOHDA ◽  
...  
Keyword(s):  
Computer Assisted ◽  
Epididymal Sperm ◽  
Sperm Analysis ◽  
Computer Assisted Sperm Analysis ◽  
Analysis System ◽  
Sperm Motion

scholarly journals Effect of age on the mercury sensitivity of zebrafish (Danio rerio) sperm

2020 ◽  
Author(s):  
Bernadett Pataki ◽  
Berta Izabella Roberta ◽  
Gyöngyi Gazsi ◽  
Béla Urbányi ◽  
Tímea Kollár ◽  
...  
Keyword(s):  
Age Groups ◽  
Toxicity Tests ◽  
Computer Assisted ◽  
Pressure Shock ◽  
Sperm Analysis ◽  
Fish Breeding ◽  
Computer Assisted Sperm Analysis ◽  
Analysis System ◽  
Effect Of Age ◽  
Motility Parameters

Abstract The effect of age on the sensitivity of zebrafish sperm against mercury exposure was investigated in the present study. Although results of the use of sperm from mature individuals for toxicity tests have been published, there is no information about the exact age of the fish in some cases, which can affect the results. During the experiments, pooled sperm was stripped from males of 7, 12, or 18 months of age, divided into 5 sub-groups, diluted with different concentrations of Hg (0, 0.5, 1, 2.5, and 5 mg/L Hg), and incubated for 240 min. The motility parameters of sperm (progressive motility (%), curvilinear velocity (VCL)) were measured by a computer-assisted sperm analysis system, at 30, 120, and 240 min of exposure. Regarding the age, significant differences were found in PMOT (p = 0.0267) as well as in VCL (p = 0.0004) among the three different age groups. The different concentrations of Hg also caused significant differences. The most significant differences in PMOT were between the 7- and 18-month-old groups; these differences were observed at 0.5, 1 and 2.5 mg/L Hg at 30 min, at 0.5 and 1 mg/L at 120 min, as well as at 0.5 mg/L at 240 min. In VCL the most significant differences were found between the 7- and 12-month-old groups; significant differences were found at each tested concentration at 30 min as well as at 0.5 and 2.5 mg/L at 240 min. According to the results, the age of zebrafish negatively influences the sensitivity of its sperm. This may concern not only toxicology tests but many techniques in fish breeding where the sperm is treated before use (cryopreservation, pressure shock, etc.).

Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document