scholarly journals Identificación y expresión del efector central fúngico Pep1 en Thecaphora frezii

Author(s):  
Soria N W ◽  
Díaz M S ◽  
Figueroa A C ◽  
Alasino V R ◽  
Yang P ◽  
...  
Keyword(s):  

Thecaphora frezii es un hongo fitopatógeno perteneciente a la clase Ustilaginomicetes, que produce laenfermedad del carbón de maní. En su ciclo biológico presenta tres estructuras, las teliosporas (es laestructura de resistencia) y las basidiosporas e hifas. El micelio (hifas) es la estructura infectiva, que penetraen el ginóforo de la planta e inicia la infección. Para dicha acción, sería necesaria la expresión de la proteínaPep1 ya que la misma fue identificada en otros Ustilaginomicetes como el Ustilago maydis y el Ustilagohordei, que infectan al maíz y a la cebada, respectivamente, y su expresión es fundamental para dichaacción.Pudimos amplificar el ADN copia de Pep1 de Thecaphora frezii cuya secuencia traducida codificaría parauna proteína de 180 aminoácidos. Se observaron grandes homologías con ortólogas de otras especies y lapresencia de cuatro cisteínas conservadas. Paralelamente, medimos los niveles de expresión de estetranscripto, encontrándose muy elevado en las hifas, coincidiendo con el estadio infectivo del hongo.Futuros estudios funcionales de inactivación génica del gen pep1 deberán realizarse para comprobarfenotípicamente el efecto que este gen provoca en cultivos de maní.

BIO-PROTOCOL ◽  
2016 ◽  
Vol 6 (6) ◽  
Author(s):  
Amey Redkar ◽  
Gunther Doehlemann
Keyword(s):  

2021 ◽  
Author(s):  
H.Y. Kitty Cheung ◽  
Michael E. Donaldson ◽  
Emilee R.M. Storfie ◽  
Kelsey L. Spence ◽  
Jessie L.O. Fetsch ◽  
...  

2021 ◽  
Vol 7 (3) ◽  
pp. 179
Author(s):  
Kai P. Hussnaetter ◽  
Magnus Philipp ◽  
Kira Müntjes ◽  
Michael Feldbrügge ◽  
Kerstin Schipper

Heterologous protein production is a highly demanded biotechnological process. Secretion of the product to the culture broth is advantageous because it drastically reduces downstream processing costs. We exploit unconventional secretion for heterologous protein expression in the fungal model microorganism Ustilago maydis. Proteins of interest are fused to carrier chitinase Cts1 for export via the fragmentation zone of dividing yeast cells in a lock-type mechanism. The kinase Don3 is essential for functional assembly of the fragmentation zone and hence, for release of Cts1-fusion proteins. Here, we are first to develop regulatory systems for unconventional protein secretion using Don3 as a gatekeeper to control when export occurs. This enables uncoupling the accumulation of biomass and protein synthesis of a product of choice from its export. Regulation was successfully established at two different levels using transcriptional and post-translational induction strategies. As a proof-of-principle, we applied autoinduction based on transcriptional don3 regulation for the production and secretion of functional anti-Gfp nanobodies. The presented developments comprise tailored solutions for differentially prized products and thus constitute another important step towards a competitive protein production platform.


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