Addition of a polyhistidine tag alters the regioselectivity of carbonyl reductase S1 from Candida magnoliae

A recombinant carbonyl reductase shows different regioselectivity with a C-terminal His-tag compared to the N-tagged enzyme toward the same triketide substrate. Highly selective synthesis of reference triketides allowed solving this conundrum.

Evaluación de la diversidad de bacterias lácticas y levaduras en quesos frescos de cabra de la quebrada de Humahuaca

Los quesos frescos de cabra artesanales de la quebrada de Humahuaca son elaborados con leche cruda, cuya maduración genera sabores, aromas y texturas característicos de la región. Los objetivos de este estudio fueron identificar y caracterizar bacterias lácticas (BAL) y levaduras nativas, aisladas de quesos frescos de esta zona productora. De un total de 36 muestras sembradas en agar Sabouraud, agar MRS y M17, se obtuvieron 128 levaduras y 39 lactobacilos, los que fueron identificados fenotípicamente y evaluadas las siguientes propiedades tecnológicas: pH a la coagulación, tasa de acidificación, proteólisis en agar leche, lipólisis en agar triacetina, producción de acetoína en leche reconstituida y asimilación del citrato en agar citrato. Lb. delbruekii subsp. bulgaricus, Lb. casei subsp. pseudoplantarum, Lb. plantarum var. arabinosus, Lb. plantarum var. plantarum, Lb. casei subsp. rhamnosus, Lb. acidophilus, Lb. helveticus, Lb. fermentum, Lb. brevis var. brevis, Lactococos sp. y Enterococcus sp. fueron las bacterias lácticas identificadas. Del total de los aislamientos, 41,6% coagularon la leche en 10 horas y 33% en 5 horas. Lb. helveticus coaguló la leche a pH de 5,40 en 5 horas, hasta alcanzar un valor final de 4,16 en 24 h, mientras que Lb. delbrueckii subsp. bulgaricus y Lb. fermentum iniciaron la coagulación en 5 horas, con valores de pH iniciales de 4,81 y 4,92 hasta valores finales de 4,19 y 4,21 respectivamente. Lb. helveticus, Lb. delbrueckii subsp. bulgaricus, Lb. plantarum var. arabinosus, Lb. fermentum, Lb. casei subsp. rhamnsosus, Lb. casei subsp. pseudoplantarum, Lb. brevis var. brevis, en orden descendente, demostraron tener capacidad acidificante. Lb. fermentum y Lb. casei subsp. pseudoplantarum desarrollaron actividad proteolítica y sólo Lb. plantarum var. plantarum demostró tener actividad lipolítica. Las levaduras aisladas fueron Debaryomyces hansenii, Zygosaccharomyces rouxii, Kluyveromyces lactis, Wickerbamiela domerquiae, Dekkera bruxellensis, Candida valdiviana, Candida novakii, Dekkera bruxellensis, Candida versatilis, Candida magnoliae, Candida albicans, Pichia anómala, Dekkera anómala y Rodotorula sp. Cepas de D. hansenii, C. magnoliae, Z. rouxii,C. versatilis y K. lactis tuvieron actividad proteolítica y lipólitica, y una cepa de W. domerquiae tuvo solamente actividad proteolítica. Algunas cepas de K. lactis produjeron acetoína y D. bruxellensis y C. versatilis metabolizaron el citrato, hidrolizaron la caseína y tuvieron actividad lipolítica. Los resultados obtenidos en este estudio muestran que la composición de las poblaciones de BAL y levadura en quesos artesanales es específica de la región. Los conocimientos adquiridos en este estudio podrían ser utilizados para la obtención de cultivos iniciadores con cepas de BAL y levaduras específicas de la región, destinados a la producción de quesos frescos con origen geográfico específico.

Microbial xylitol production from culm of Sasa kurilensis using the yeast Candida magnoliae

A sugar solution containing 31 g l-1 xylose was prepared from the culm of Sasa kurilensis by hydrolysis with 2% sulfuric acid with a liquor-to-solid ratio of 6 (g g-1) at 121°C for 1 h. During acid hydrolysis, also some byproducts were generated, such as acetic acid, furfural, 5-hydroxymethylfurfral, and low molecular weight phenolics, which inhibit bioconversion of xylose to xylitol. Except for acetic acid, these inhibitors were successfully removed from the hydrolysate by contacting with a steam-activated charcoal (15 g l-1 dose) for 24 h. Bioconversion of the detoxified hydrolysate to xylitol by the yeast, Candida magnoliae, was investigated under various microaerobic conditions. The oxygen transfer rate (OTR) varied from 8.4 to 27.6 mmol-O2 l-1 h-1. The maximum xylitol yield (0.62 g-xylitol g-xylose-1) was attained at the OTR of 1.2 mmol-O2 l-1 h-1. An additional increase in the OTR brought about cell growth, which consumed xylose. A proper control of the oxygen supply is necessary to produce efficiently xylitol from the culm hydrolysate.