In vivo imaging of induction of heat-shock protein-70 gene expression with fluorescence reflectance imaging and intravital confocal microscopy following brain ischaemia in reporter mice

Heat shock protein 70 (HSP70) is a chaperon that stabilizes unfolded or partially folded proteins, preventing inappropriate inter- and intramolecular interactions. Here, we examined the developmental competence of in vitro matured oocytes exposed to heat stress with or without HSP70. Bovine oocytes were matured for 24 h at 39 °C without (group C39) or with HSP70 (group H39) and at 41 °C for the first 6 h, followed by 16 h at 39 °C with (group H41) or without HSP70 (group C41). After insemination, zygotes were cultured for 9 days at 39 °C. Cleavage and embryo yield were assessed 48 h post insemination and on days 7, 8, 9, respectively. Gene expression was assessed by RT-PCR in oocytes, cumulus cells and blastocysts. In C41, blastocysts formation rate was lower than in C39 and on day 9 it was lower than in H41. In oocytes, HSP70 enhanced the expression of three HSP genes regardless of incubation temperature. HSP70 at 39 °C led to tight coordination of gene expression in oocytes and blastocysts, but not in cumulus cells. Our results imply that HSP70, by preventing apoptosis, supporting signal transduction, and increasing antioxidant protection of the embryo, protects heat stressed maturing bovine oocyte and restores its developmental competence.

Download Full-text

Effect of heat shock protein 70 homologue DNAK on gene expression of penaeidins, serine proteinase, prophenoloxidase and transglutaminase in hemocytes of Litopenaeus vannamei

Fish & Shellfish Immunology ◽

10.1016/j.fsi.2013.03.068 ◽

2013 ◽

Vol 34 (6) ◽

pp. 1656

Author(s):

B Hu ◽

P Sorgeloos ◽

P Bossier

Keyword(s):

Gene Expression ◽

Heat Shock ◽

Heat Shock Protein ◽

Litopenaeus Vannamei ◽

Heat Shock Protein 70 ◽

Serine Proteinase

Download Full-text

Επικεκαλυμμένες ενδαγγειακές προθέσεις και επαναστένωση μετά από αγγειοπλαστική

10.12681/eadd/36988 ◽

2014 ◽

Author(s):

Δημήτριος Λυσίτσας

Keyword(s):

Heat Shock ◽

Heat Shock Protein ◽

Heat Shock Protein 70 ◽

Low Dose ◽

High Dose ◽

Hsp 70

Εισαγωγή: Η υπερπλασία του έσω χιτώνα παίζει μείζων ρόλο στην επαναστένωση (in-stentrestenosis). Στην παρούσα μελέτη αξιολογήσαμε in vitro την επίδραση της D-24851(κυτταροτοξική ουσία που σταματά τον κυτταρικό κύκλο στο στάδιο G2-M) στονπολλαπλασιασμό των λείων μυϊκών κυττάρων και μελετήσαμε την ασφάλεια και τηνδραστικότητα μίας ενδαγγειακής πρόθεσης (stent) επικαλυμμένης με πολυμερή ουσία πουαπελευθερώνει την D-24851, στην αναστολή της υπερπλασίας του έσω χιτώνα χωρίς ναεμποδίζει την αναγεννητική ικανότητα του ενδοθηλίου σε in vivo πειραματικό μοντέλο.Υλικό και Μέθοδοι: Γυμνά μεταλλικά stent (n=6), stent επικαλυμμένα μόνο με πολυμερήουσία (polymer-coated, n=7) και stent επικαλυμμένα με πολυμερή ουσία πουαπελευθερώνουν 31±1μg (low-dose, n=7), 216±8 μg (high-dose, n=6) ή 1774±39 μg(extreme-dose, n=5) της D-24851 εμφυτεύτηκαν στις μηριαίες αρτηρίες λευκών New Zealandκουνελιών. Τα πειραματόζωα θυσιάστηκαν στις 28 ημέρες για ιστομορφομετρική ανάλυση.Για την αξιολόγηση της ενδοθηλιακής αναγέννησης στις 90 ημέρες, 12 πειραματόζωαχρησιμοποιήθηκαν για την τοποθέτηση polymer-coated (n=3), low dose (n=3), high dose(n=3) or extreme dose (n=3) ενδαγγειακών προθέσεων.Αποτελέσματα: In vitro η D-24851 αναστέλλει την υπερπλασία των λείων μυϊκών κυττάρωνκαι επάγει την απόπτωση τους χωρίς να αυξάνει την επαγωγή της heat shock protein 70(HSP-70), μία κυτταροπροστατευτική και αντι-αποπτωτική πρωτεΐνη. Η θεραπεία με lowdoseD-24851 stents συνδυάστηκε με 38% (P=0.029) μείωση της υπερπλαστικής περιοχήςτου έσω χιτώνα και 35% (P=0.003) μείωση της επι τοις εκατό στένωσης του αυλού σεσύγκριση με τα γυμνά μεταλλικά stents. Ο τραυματισμός και η φλεγμονή του αρτηριακού τοιχώματος δεν παρουσίασαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων. Τα επικαλυμμέναμόνο με πολυμερή ουσία stents εμφάνισαν παρόμοια ανάπτυξη νεοιστού σε σύγκριση με ταγυμνά μεταλλικά stents. Ωστόσο, όλες οι ομάδες των stents με D-24851 παρουσίασαν ατελήενδοθηλιοποίηση συγκρινόμενα με τα polymer-coated stents.Συμπεράσματα: Οι επικεκαλυμμένες ενδαγγειακές προσθέσεις με πολυμερή ουσία καιχαμηλη δόση D-24851 μειώνουν σημαντικά την υπερπλασιά του έσω χιτώνα. Λόγω τηςατελούς ενδοθηλιοποίησης, μακράς διάρκειας μελέτες είναι απαραίτητες για ναπιστοποιήσουν ότι η αναστολή του νεοιστού παραμένει και μετά τις 28 ημέρες.

Download Full-text

Heat shock protein 70 / MAGE-1 tumor vaccine can enhance the potency of MAGE-1–specific cellular immune responses in vivo

Cancer Immunology Immunotherapy ◽

10.1007/s00262-004-0536-6 ◽

2004 ◽

Vol 53 (9) ◽

pp. 825-834 ◽

Cited By ~ 13

Author(s):

Jing Ye ◽

Guang-Sheng Chen ◽

Hong-Ping Song ◽

Zeng-Shan Li ◽

Ya-Yu Huang ◽

...

Keyword(s):

Heat Shock ◽

Immune Responses ◽

Heat Shock Protein ◽

Heat Shock Protein 70 ◽

Tumor Vaccine ◽

Cellular Immune Responses ◽

Cellular Immune

Download Full-text

In Vivo Chaperone Activity of Heat Shock Protein 70 and Thermotolerance

Molecular and Cellular Biology ◽

10.1128/mcb.19.3.2069 ◽

1999 ◽

Vol 19 (3) ◽

pp. 2069-2079 ◽

Cited By ~ 145

Author(s):

Ellen A. A. Nollen ◽

Jeanette F. Brunsting ◽

Han Roelofsen ◽

Lee A. Weber ◽

Harm H. Kampinga

Keyword(s):

Heat Shock ◽

Heat Shock Protein ◽

Heat Resistance ◽

Cell Line ◽

Heat Shock Protein 70 ◽

Chaperone Activity ◽

Luciferase Reporter ◽

Reporter Protein ◽

Regulated Gene Expression

ABSTRACT Heat shock protein 70 (Hsp70) is thought to play a critical role in the thermotolerance of mammalian cells, presumably due to its chaperone activity. We examined the chaperone activity and cellular heat resistance of a clonal cell line in which overexpression of Hsp70 was transiently induced by means of the tetracycline-regulated gene expression system. This single-cell-line approach circumvents problems associated with clonal variation and indirect effects resulting from constitutive overexpression of Hsp70. The in vivo chaperone function of Hsp70 was quantitatively investigated by using firefly luciferase as a reporter protein. Chaperone activity was found to strictly correlate to the level of Hsp70 expression. In addition, we observed an Hsp70 concentration dependent increase in the cellular heat resistance. In order to study the contribution of the Hsp70 chaperone activity, heat resistance of cells that expressed tetracycline-regulated Hsp70 was compared to thermotolerant cells expressing the same level of Hsp70 plus all of the other heat shock proteins. Overexpression of Hsp70 alone was sufficient to induce a similar recovery of cytoplasmic luciferase activity, as does expression of all Hsps in thermotolerant cells. However, when the luciferase reporter protein was directed to the nucleus, expression of Hsp70 alone was not sufficient to yield the level of recovery observed in thermotolerant cells. In addition, cells expressing the same level of Hsp70 found in heat-induced thermotolerant cells containing additional Hsps showed increased resistance to thermal killing but were more sensitive than thermotolerant cells. These results suggest that the inducible form of Hsp70 contributes to the stress-tolerant state by increasing the chaperone activity in the cytoplasm. However, its expression alone is apparently insufficient for protection of other subcellular compartments to yield clonal heat resistance to the level observed in thermotolerant cells.

Download Full-text