scholarly journals Análise de antígenos de superfície do vírus da Hepatite B (HBSAG) como estratégia promissora para fins biomédicos

Author(s):  
Natália Araujo Costa ◽  
Anabele Azevedo Lima

O vírus da Hepatite B (HBV) é um membro da família de vírus chamada Hepadnaviridae, caracterizado pela presença de DNA envelopado e capacidade de infectar as células hepáticas. Esse vírus infecta mamíferos e se replica nos hepatócitos, podendo evoluir em termos patológicos. De acordo com o Ministério da Saúde, no período de 1999 a 2015 foram notificados em todo o Brasil, 514.678 casos confirmados de Hepatite virais, caracterizando um problema de saúde pública. Pesquisas na área da virologia e produção biotecnológica têm sido muito utilizado para expressão de genes heterólogos em células de inseto, como por exemplo, o modelo eucarioto de expressão utilizando Baculovírus, inúmeras proteínas de importância médica e econômica foram expressas em níveis elevados aplicando esse sistema. Sendo assim, o presente trabalho visou analisar a expressão do antígeno de superfície HBsAg fusionado à proteína poliedrina, produzida pelo Baculovírus, uma vez que o HBsAg tem um papel fundamental no diagnóstico e prevenção da Hepatite B, por ser um antígeno marcador sorológico indicativo de infecção pelo HBV, cem como, o único componente da vacina contra o HBV, e assim, analisar possíveis reações cruzadas entre os diferentes vírus que causam hepatite. Atualmente, não existem indústrias ou empresas nacionais que produzam em larga escala o HBsAg, necessitando importar vacinas e kits para diagnóstico. METODOLOGIA: Foi realizado quantificação de proteínas com Quant-iT, teste comercial para dosagem de proteínas, e foram realizados testes sorológicos imunoenzimáticos, o ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) indireto, método que se baseia na interação antígeno-anticorpo, utilizando o antígeno HBsAg fusionado a poliedrina (proteína recombinante) previamente construído. RESULTADOS: Foram realizados dois testes pelo método ELISA, os resultados foram obtidos a partir do soro de pacientes que tiveram contato com os vírus da Hepatite B, Hepatite C e Citomegalovírus (CMV) em relação ao antígeno construído pelo sistema do Baculovírus, foram inconclusivos, o segundo teste foi realizada com amostras doadas pelo LACEN-DF positivas para hepatite B, porém o soro era positivo para outros patologias, como hepatite A e hepatite A, sendo necessário realizar novos testes para ter um intervalo de confiança maior em relação ao teste. DISCUSSÃO/CONCLUSÃO: Portanto, há a necessidade de realizar mais testes sorológicos para verificar a veracidade do experimento e validá-lo estatisticamente. Contudo, sabemos que as hepatites virais são um grave problema de saúde pública no Brasil e no mundo, e necessitam de mais pesquisas, visando melhorar as formas de prevenção, diagnóstico e tratamento.

Author(s):  
Ana Luiza dos Santos Medeiros ◽  
Anabele Azevedo Lima

INTRODUÇÃO: O vírus da Hepatite B (HBV) é um membro da família de vírus chamadaHepadnaviridae, caracterizado pela presença de DNA envelopado e capacidade de infectar ascélulas hepáticas. Esse vírus infecta mamíferos e se replica nos hepatócitos, podendo evoluirem termos patológicos. De acordo com o Ministério da Saúde, no período de 1999 a 2015foram notificados em todo o Brasil, 514.678 casos confirmados de Hepatite virais,caracterizando um problema de saúde pública. Pesquisas na área da virologia e produçãobiotecnológica têm sido muito utilizado para expressão de genes heterólogos em células deinseto, como por exemplo, o modelo eucarioto de expressão utilizando Baculovírus, inúmerasproteínas de importância médica e econômica foram expressas em níveis elevados aplicandoesse sistema. Sendo assim, o presente trabalho visou analisar a expressão do antígeno desuperfície HBsAg fusionado à proteína poliedrina, produzida pelo Baculovírus, uma vez queo HBsAg tem um papel fundamental no diagnóstico e prevenção da Hepatite B, por ser umantígeno marcador sorológico indicativo de infecção pelo HBV, cem como, o únicocomponente da vacina contra o HBV, e assim, analisar possíveis reações cruzadas entre osdiferentes vírus que causam hepatite. Atualmente, não existem indústrias ou empresasnacionais que produzam em larga escala o HBsAg, necessitando importar vacinas e kits paradiagnóstico. METODOLOGIA: Foi realizado testes sorológicos imunoenzimáticos, o ELISA(Enzyme-linked Immunosorbent Assay) indireto, método que se baseia na interação antígenoanticorpo, utilizando o antígeno HBsAg fusionado a poliedrina (proteína recombinante)previamente construído. RESULTADOS: Os resultados obtidos pelo método ELISA, a partir dosoro de pacientes que tiveram contato com os vírus da Hepatite B, Hepatite C eCitomegalovírus (CMV) em relação ao antígeno construído pelo sistema do Baculovírus, foraminconclusivos. DISCUSSÃO/CONCLUSÃO: Portanto, há a necessidade de realizar mais testessorológicos para verificar a veracidade do experimento e validá-lo estatisticamente. Contudo,sabemos que as hepatites virais são um grave problema de saúde pública no Brasil e nomundo, e necessitam de mais pesquisas, visando melhorar as formas de prevenção,diagnóstico e tratamento


1989 ◽  
Vol 62 (04) ◽  
pp. 1078-1082 ◽  
Author(s):  
Burt Adelman ◽  
Patricia Ouynn

SummaryThis report describes the binding of plasminogen to fibrinogen adsorbed onto polystyrene wells. Binding was determined by enzyme linked immunosorbent assay. Both glu- and lys-plasminogen bound to immobilized fibrinogen in a dose-dependent fashion. However, more lys- than glu-plasminogen bound when equal concentrations of either were added to immobilized fibrinogen. Plasminogen binding was inhibited by epsilon aminocaproic acid indicating that binding was mediated via lysine-binding regions of plasminogen. Soluble fibrinogen added in excess of immobilized fibrinogen did not compete for plasminogen binding but fibrinogen fragments produced by plasmin digestion of fibrinogen did. Treatment of immobilized fibrinogen with thrombin caused a small but significant (p <0.01) increase in plasminogen binding. These studies demonstrate that immobilized fibrinogen binds both glu- and lys-plasminogen and that binding is mediated via lysine-binding regions. These interactions may facilitate plasminogen binding to fibrinogen adsorbed on to surfaces and to cells such as platelets which bind fibrinogen.


1995 ◽  
Vol 74 (04) ◽  
pp. 1045-1049 ◽  
Author(s):  
P Butthep ◽  
A Bunyaratvej ◽  
Y Funahara ◽  
H Kitaguchi ◽  
S Fucharoen ◽  
...  

SummaryAn increased level of plasma thrombomodulin (TM) in α- and β- thalassaemia was demonstrated using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Nonsplenectomized patients with β-thalassaemia/ haemoglobin E (BE) had higher levels of TM than splenectomized cases (BE-S). Patients with leg ulcers (BE-LU) were found to have the highest increase in TM level. Appearance of larger platelets in all types of thalassaemic blood was observed indicating an increase in the number of younger platelets. These data indicate that injury of vascular endothelial cells is present in thalassaemic patients.


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