scholarly journals Neutral red retention time assay in determination of toxicity of nanoparticles

2015 ◽  
Vol 111 ◽  
pp. 158-161 ◽  
Author(s):  
Wentao Hu ◽  
Sarah Culloty ◽  
Grainne Darmody ◽  
Sharon Lynch ◽  
John Davenport ◽  
...  
2009 ◽  
Vol 44 (8) ◽  
pp. 874-880 ◽  
Author(s):  
Lucas Piola ◽  
Julio Fuchs ◽  
María Luisa Oneto ◽  
Silvana Basack ◽  
Rosana Giménez ◽  
...  

The objective of this work was to evaluate the effects of chlorpyrifos on earthworms and on soil functional parameters. An integrated laboratory-field study was performed in a wheat field in Argentina, sprayed with chlorpyrifos at two recommended application rates (240 or 960 g ha-1 style='vertical-align:baseline'> a.i.). Laboratory tests included neutral red retention time, comet assay (single cell gel electrophoresis), and avoidance behavior, each using the earthworm Eisenia andrei exposed in soil collected 1 or 14 days after pesticide application, and the bait-lamina test. Field tests assessed organic matter breakdown using the litterbag and bait-lamina assays. Earthworm populations in the field were assessed using formalin application and hand-sorting. The neutral red retention time and comet assays were sensitive biomarkers to the effects of chlorpyrifos on the earthworm E. andrei; however, the earthworm avoidance test was not sufficiently robust to assess these effects. Feeding activity of soil biota, assessed by the bait lamina test, was significantly inhibited by chlorpyrifos after 97 days, but recovered by the 118th day of the test. Litterbag test showed no significant differences in comparison to controls. Earthworm abundance in the field was too low to adequately test the sensitivity of this assessment endpoint.


2018 ◽  
Author(s):  
Βασιλική Τσαρπαλή

Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν η εκτίμηση του περιβαλλοντικού κινδύνου από τα ευρέως χρησιμοποιούμενα ιμιδαζολικά ιοντικά υγρά (ILs), τετραφθοροβορικό 1-βούτυλο-3-μεθυλιμιδαζόλιο (1-butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate /([bmim][BF4]) και τετραφθοροβορικό 1-μέθυλο-3-οκτυλιμιδαζόλιο (1-octyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate /[omim][BF4]), με την χρήση οργανισμών βιο-ενδεικτών και in vitro βιολογικών μοντέλων. Παράλληλα, καθώς η πιθανότητα χρήσης διαλυμάτων ILs-οργανικού διαλύτη σε ένα πλήθος εφαρμογών είναι αυξημένη, μελετήθηκε η επίδραση της ακετόνης στην ικανότητα των ILs να επάγουν φαινόμενα τοξικότητας. Αναλυτικότερα, πραγματοποιήθηκαν δοκιμές τοξικότητας με την χρήση των φυτοπλαγκτονικών ειδών Dunaliella tertiolecta και Scenedesmus rubescens, των καρκινοειδών Thamnocephalus platyurus και Artemia franciscana, των τροχοζώων Brachionus calyciflorus και Brachionus plicatilis, του δίθυρου μαλακίου Mytilus galloprovincialis, παρουσία ή απουσία ακετόνης (0.06% v/v). Πέραν της ικανότητάς τους να προκαλούν θνησιμότητα στους εκτιθέμενους οργανισμούς, διερευνήθηκε η πιθανότητα επαγωγής κυτταροτοξικών (τεχνική Neutral Red Retention Time), νευροτοξικών (ενζυμική δραστικότητα ακετυλ-χολινεστεράσης/AChE) και γενοτοξικών (συχνότητα εμφάνισης μικροπυρήνων/MN, τεχνική ανάλυσης κομητών/MS assay) επιπτώσεων, καθώς και φαινομένων οξειδωτικής καταπόνησης (προσδιορισμός επιπέδων σουπεροξειδικών ανιόντων, προσδιορισμός επιπέδων μηλονικής διαλδεϋδης/ MDA) σε ιστούς (αιμόλεμφος/αιμοκύτταρα και βράγχια) του είδους M. galloprovincialis. Επιπλέον, μελετήθηκε η κυτταροτοξική και μεταλλαξιγόνος δράση των ILs, εφαρμόζοντας την τεχνική των μικροπυρήνων με τη χρήση της κυτταροχαλασίνης-Β (CBMN), σε καλλιέργειες ανθρώπινων λεμφοκυττάρων. Παράλληλα, για να μελετηθεί καλύτερα ο μηχανισμός δράσης των ILs και η αλληλεπίδρασή τους με την ακετόνη πραγματοποιήθηκε ανάλυση LC-MS-TOF, και in vitro μελέτες σε απομονωμένα αιμοκύτταρα του μυδιού M. galloprovincialis, έπειτα από επώαση τους με τον χαοτροπικό παράγοντα υδροχλωρική γουανιδίνη (1 mM). Τέλος, προκειμένου να διερευνηθεί η επίδραση των φυσικοχημικών παραμέτρων, όπως η αλατότητα, στην φυσιολογική απόκριση των φυτοπλαγκτονικών οργανισμών (ρυθμός αύξησης, επίπεδα χλωροφύλλης α και ολικών καροτενοειδών), πραγματοποιήθηκε έκθεση καλλιεργειών D. tertiolecta στα ILs υπό διαφορετικές αλατότητες (30 και 35‰). Σύμφωνα με τα αποτελέσματα, τα ILs μειώνουν σημαντικά τη βιωσιμότητα των εκτιθέμενων οργανισμών και προκαλούν σημαντικές προ-παθολογικές καταστάσεις. Ειδικότερα, το [οmim][BF4] που φέρει μεγαλύτερη αλκυλική αλυσίδα, εμφανίζει μεγαλύτερη τοξικότητα, σε σχέση με το [bmim][BF4] και το μίγμα [bmim][BF4]-[οmim][BF4], προκαλώντας σημαντικές διαταραχές στη φυσιολογία των εκτιθέμενων ατόμων/κυττάρων, πιθανό λόγω της ικανότητας του IL να αλληλεπιδρά με τα φωσφολιπίδια και τις πρωτεΐνες των κυτταρικών μεμβρανών, ενεργοποιώντας μια σειρά αλυσιδωτών αντιδράσεων στο εσωτερικό των κυττάρων. Το είδος και η έκταση των επαγόμενων φαινομένων επηρεάζεται σημαντικά από την παρουσία της ακετόνης, η οποία αναστέλλει σε σημαντικό βαθμό τις τοξικές επιπτώσεις του [omim][BF4]. Σύμφωνα με την ανάλυση LC-MS-TOF, φαίνεται πως η ακετόνη μεταβάλλει το ιξώδες και την λιποφιλικότητα των ILs και κατ’ επέκταση την ικανότητά τους να αλληλεπιδρούν με τις βιολογικές μεμβράνες. Τέλος, η τοξικότητα των ILs φαίνεται πως εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τις φυσικοχημικές παραμέτρους του περιβάλλοντος, καθώς επηρεάζουν την ικανότητα των κυττάρων να ανταπεξέρχονται σε διαφορετικές συνθήκες stress. Συγκεκριμένα, η αλατότητα φάνηκε να παίζει σημαντικό ρόλο στο ρυθμό αύξησης του μικροφύκους D. tertiolecta. Συμπερασματικά, τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης αμφισβητούν την ορθότητα του χαρακτηρισμού των ιμιδαζολικών ILs ως «Πράσινοι» διαλύτες. Παράλληλα, αναδεικνύει για πρώτη φορά το σημαντικό ρόλο της ακετόνης στη ρύθμιση του τοξικού χαρακτήρα των ILs, συμβάλλοντας με αυτό τον τρόπο στην προσπάθεια παραγωγής, ανάπτυξης και χρήσης περισσότερο περιβαλλοντικά φιλικών ILs.


2000 ◽  
Vol 42 (7-8) ◽  
pp. 283-290 ◽  
Author(s):  
H.-C. Tsai ◽  
R.-A. Doong

A sol-gel based fiber-optic biosensor with acetylcholinesterase as the biorecognition element has been developed for the rapid determination of organophosphorus pesticides. Nine fluorescent indicators, acridine, acridine orange, neutral red, DAPI, rhodamine B, fluorescein, umbelliferone, FITC on celite and FITC-dextran, have been examined to optimize the fiber-optic system. Results showed that acridine and FITCs were sensitive to the change of pH value caused by the enzyme-substrate catalysis reaction. However, the sensitivity of acridine was 260 times lower than that of FITCs. Higher toxicity of acridine to acetylcholinesterase than FITC was also observed. Moreover, the high-molecular-weight FITC-dextran showed low leakage rate when immobilizing using sol-gel technology, showing that the FITC-dextran was a suitable pH sensitive fluorescent indicator for the OPPs biosensor. The response of the fiber-optic biosensor to the substrate, acetylcholine, was highly reproducible (RSD=3.5%). A good linearity of acetylcholine in the range from 0.5 to 20 mM was also obtained (R2=0.98). Furthermore, a 30% inhibition can be achieved in 30min when 152 ppb paraoxon was added into the system. The results show the possibility for real-time determination of organophosphorus pesticides by using the biosensor developed in this study.


2006 ◽  
Vol 3 (1) ◽  
pp. 60-64 ◽  
Author(s):  
P. Venkata Reddy ◽  
B. Sudha Rani ◽  
G. Srinu Babu ◽  
J. V. L. N. Seshagiri Rao

A reverse phase HPLC method is developed for the determination of Raloxifene in pharmaceutical dosage forms. Chromatography was carried out on an inertsil C18 column using a mixture of acetonitrile and phosphate buffer (30:70 v/v) as the mobile phase at a flow rate of 1 mL/min. Detection was carried out at 290 nm .The retention time of the drug was 10.609 min. The method produced linear responses in the concentration range of 0.5-200 µg/mL of Raloxifene. The method was found to be applicable for determination of the drug in tablets.


INDIAN DRUGS ◽  
2016 ◽  
Vol 53 (11) ◽  
pp. 46-50
Author(s):  
Z. G Khan ◽  
◽  
S. S. Patil ◽  
P. K. Deshmukh ◽  
P. O. Patil

Novel, isocratic reversed phase high performance liquid chromatography method was developed and validated for the determination of enzalutamide (EZA) in bulk drug and pharmaceutical formulation. Efficient separation was achieved on PrincetonSPHER C18 100A, 5μ (250×4.6 mm) under the isocratic mode of elution using acetonitrile: water (80:20) % V/V as a mobile phase pumped in to the column at flow rate 1.0 mL/min. The effluent was monitored at 237.0 nm using UV detector. EZA was eluted in the given mobile phase at retention time (tR) of 3.2 minutes. The standard calibration curve was linear over the concentration range 10 - 60 μg/mL with correlation coefficient 0.997. The method was validated for accuracy, precision, sensitivity, robustness, ruggedness and all the resulting data treated statistically. The system suitability parameters like retention time, theoretical plates, tailing factor, capacity factor were found within the limit.


2013 ◽  
Vol 2013 ◽  
pp. 1-4
Author(s):  
Suying Ma ◽  
Haixia Lv ◽  
Xiaojun Shang

A high performance liquid chromatographic (HPLC) method with UV detector for the determination of dyclonine hydrochloride and a gas chromatography (GC) method with flame ionization detector (FID) for the determination of camphor and menthol in lotion were developed. The developed HPLC method involved using a SinoChoom ODS-BP C18reversed-phase column (5 μm, 4.6 mm × 200 mm) and mobile phase consisting of acetonitrile : water : triethylamine in a ratio of 45 : 55 : 1.0; pH was adjusted to 3.5 with glacial acetic acid. The developed GC method for determination of camphor and menthol involved using an Agilent 19091J-413 capillary chromatographic column (30 m × 320 μm × 0.25 μm). The two methods were validated according to official compendia guidelines. The calibration of dyclonine hydrochloride for HPLC method was linear over the range of 20–200 μg/mL. The retention time was found at 6.0 min for dyclonine hydrochloride. The calibration of camphor and menthol of GC method was linear over the range of 10–2000 μg/mL. The retention time was found at 2.9 min for camphor and 3.05 min for menthol. The proposed HPLC and GC methods were proved to be suitable for the determination of dyclonine hydrochloride, camphor, and menthol in lotion.


Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document