scholarly journals Correlation of Oyster Disease with Vibrio Parahaemolyticus accumulation in oyster tissue

2018 ◽  
Vol 32 (S1) ◽  
Author(s):  
Kiserian Jackson ◽  
Abigail Scro ◽  
Roxanna Smolowitz
Keyword(s):  
Vibrio Parahaemolyticus ◽  
Oyster Tissue

scholarly journals Evaluation of a Tissue Culture–Based Approach for Differentiating between Virulent and Avirulent Vibrio parahaemolyticus Strains Based on Cytotoxicity

2007 ◽  
Vol 70 (2) ◽  
pp. 348-354 ◽  
Author(s):  
P. S. MARIE YEUNG ◽  
MARTIN WIEDMANN ◽  
KATHRYN J. BOOR
Keyword(s):  
Tissue Culture ◽  
Cell Lines ◽  
Vibrio Parahaemolyticus ◽  
Cell Damage ◽  
Human Infection ◽  
Clinical Isolates ◽  
Food Sources ◽  
Oyster Tissue ◽  
Assay Sensitivity ◽  
Mammalian Cell Lines

The ability of only a subset of Vibrio parahaemolyticus strains to cause human infection underscores the need for an analytical method that can effectively differentiate between pathogenic strains and those that do not cause disease. We tested the feasibility of a tissue culture–based assay to determine whether clinical isolates could be differentiated from nonclinical isolates based on relative isolate cytopathogenicity. To screen for cytotoxic capability, we measured relative extracellular lactate dehydrogenase as an indicator of host cell damage in five different mammalian cell lines in the presence of V. parahaemolyticus. Isolates originating from clinical sources exhibited 15.5 to 59.3% relative cytotoxicity, whereas those originating from food sources exhibited 4.4 to 54.9% relative cytotoxicity. In the presence of ∼1.2 × 106 cells, cytotoxicity was 1.6- to 3.5-fold higher (P < 0.05) for clinical isolates than for nonclinical isolates in L2, Henle 407, and Caco-2 cell lines. V. parahaemolyticus serotype O3:K6 clinical isolates had 1.6- to 2.1-fold higher cytotoxicity than did the non-O3:K6 clinical isolates, with significantly higher cytotoxicity in HeLa, J774A.1, and Henle 407 cells than in L2 and Caco-2 cells. Because V. parahaemolyticus often is found in oysters, the effect of the presence of an oyster matrix on assay efficacy was also tested with L2 cells. The cytotoxicity elicited by a highly cytotoxic V. parahaemolyticus isolate was not affected by the presence of oyster tissue, suggesting that an oyster matrix will not interfere with assay sensitivity. In the present format, this assay can detect the presence of >105 cells of a virulent V. parahaemolyticus strain in an oyster matrix.

Real-Time PCR Quantification of Vibrio parahaemolyticus in Oysters Using an Alternative Matrix

2004 ◽  
Vol 67 (11) ◽  
pp. 2424-2429 ◽  
Author(s):  
G. E. KAUFMAN ◽  
G. M. BLACKSTONE ◽  
M. C. L. VICKERY ◽  
A. K. BEJ ◽  
J. BOWERS ◽  
...  
Keyword(s):  
Real Time ◽  
Real Time Pcr ◽  
Vibrio Parahaemolyticus ◽  
Pcr Amplification ◽  
Oyster Tissue ◽  
Pcr Assay ◽  
Colony Hybridization ◽  
The Real ◽  
Mantle Fluid ◽  
June July

This study examined the relationship between levels of total Vibrio parahaemolyticus found in oyster tissues and mantle fluid with the goal of using mantle fluid as a template matrix in a new quantitative real-time PCR assay targeting the thermolabile hemolysin (tlh) gene for the enumeration of total V. parahaemolyticus in oysters. Oysters were collected near Mobile Bay, Ala., in June, July, and September and tested immediately after collection and storage at 26°C for 24 h. Initial experiments using DNA colony hybridization targeting tlh demonstrated that natural V. parahaemolyticus levels in the mantle fluid of individual oysters were strongly correlated (r = 0.85, P < 0.05) with the levels found in their tissues. When known quantities of cultured V. parahaemolyticus cells were added to real-time PCR reactions that contained mantle fluid and oyster tissue matrices separately pooled from multiple oysters, a strong linear correlation was observed between the real-time PCR cycle threshold and the log concentration of cells inoculated into each PCR reaction (mantle fluid: r = 0.98, P < 0.05; and oyster: r = 0.99, P < 0.05). However, the mantle fluid exhibited less inhibition of the PCR amplification than the homogenized oyster tissue. Analysis of natural V. parahaemolyticus populations in mantle fluids using both colony hybridization and real-time PCR demonstrated a significant (P < 0.05) but reduced correlation (r =−0.48) between the two methods. Reductions in the efficiency of the real-time PCR that resulted from low population densities of V. parahaemolyticus and PCR inhibitors present in the mantle fluid of some oysters (with significant oyster-to-oyster variation) contributed to the reduction in correlation between the methods that was observed when testing natural V. parahaemolyticus populations. The V. parahaemolyticus–specific real-time PCR assay used for this study could estimate elevated V. parahaemolyticus levels in oyster mantle fluid within 1 h from sampling time.

scholarly journals Detection of Vibrio parahaemolyticus in Shellfish by Use of Multiplexed Real-Time PCR with TaqMan Fluorescent Probes

2006 ◽  
Vol 72 (3) ◽  
pp. 2031-2042 ◽  
Author(s):  
Linda N. Ward ◽  
Asim K. Bej
Keyword(s):  
Real Time ◽  
Real Time Pcr ◽  
Vibrio Parahaemolyticus ◽  
Detection Methods ◽  
Tissue Homogenate ◽  
Oyster Tissue ◽  
Reading Frame ◽  
Initial Inoculum ◽  
Hemolysin Gene ◽  
Pure Cultures

ABSTRACT We developed a multiplexed real-time PCR assay using four sets of gene-specific oligonucleotide primers and four TaqMan probes labeled with four different fluorophores in a single reaction for detection of total and pathogenic Vibrio parahaemolyticus, including the pandemic O3:K6 serotype in oysters. V. parahaemolyticus has been associated with outbreaks of food-borne gastroenteritis caused by the consumption of raw or undercooked seafood and therefore is a concern to the seafood industry and consumers. We selected specific primers and probes targeting the thermostable direct hemolysin gene (tdh) and tdh-related hemolysin gene (trh) that have been reported to be associated with pathogenesis in this organism. In addition, we targeted open reading frame 8 of phage f237 (ORF8), which is associated with a newly emerged virulent pandemic serotype of V. parahameolyticus O3:K6. Total V. parahaemolyticus was targeted using the thermolabile hemolysin gene (tlh). The sensitivity of the combined four-locus multiplexed TaqMan PCR was found to be 200 pg of purified genomic DNA and 104 CFU per ml for pure cultures. Detection of an initial inoculum of 1 CFU V. parahaemolyticus per g of oyster tissue homogenate was possible after overnight enrichment, which resulted in a concentration of 3.3 × 109 CFU per ml. Use of this method with natural oysters resulted in 17/33 samples that were positive for tlh and 4/33 samples that were positive for tdh. This assay specifically and sensitively detected total and pathogenic V. parahaemolyticus and is expected to provide a rapid and reliable alternative to conventional detection methods by reducing the analysis time and obviating the need for multiple assays.

DISTRIBUTION OF VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS IN THE NATURAL ENVIRONMENT1

1973 ◽  
Vol 36 (2) ◽  
pp. 113-117 ◽  
Author(s):  
J. Liston ◽  
J. Baross
Keyword(s):  
North America ◽  
Vibrio Parahaemolyticus ◽  
Food Poisoning ◽  
Organic Content ◽  
Oyster Tissue ◽  
Limited Information ◽  
Seasonal Incidence ◽  
Ambient Temperatures ◽  
High Incidence ◽  
Fish And Shellfish

Vibrio parahaemolyticus has been isolated widely from marine environments but appears to be most abundant in in-shore and estuarine areas where ambient temperatures rise seasonally to levels permitting growth of the organism. Japanese and U. S. studies of coastal areas have shown a direct relationship between temperature and abundance of V. parahaemolyticus and this correlates with the seasonal incidence of V. parahaemolyticus food poisoning in Japan. The organism has been isolated from water, sediment, plankton, fish, and shellfish. In North America it seems to be most abundant in molluscan shellfish and in waters of high organic content. Counts of 10–200/ml of water, 1–7/g of sediment and up to 105/g of oyster tissue have been reported for North American inshore areas. Limited information on market seafood samples indicates very low incidence of V. parahaemolyticus on fin fish in Europe and North America and high incidence in Japan during summer months. Limited data on market samples of frozen and fresh shellfish in U.S.A. suggest sporadically high incidence on shrimp, crabmeat, oysters, and clams.

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM GÂY BỆNH VÀ DỊCH TỄ CỦA BỆNH TÔM CHẾT SỚM (EMS) TẠI TỈNH QUẢNG BÌNH NHẰM ĐỀ XUẤT QUY TRÌNH CHẨN ĐOÁN VÀ PHÒNG TRỊNGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH TÔM CHẾT SỚM (EMS) TẠI TỈNH QUẢNG BÌNH NHẰM ĐỀ XUẤT QUY TRÌNH CHẨN ĐOÁN VÀ PHÒNG TRỊ

2015 ◽  
Vol 104 (5) ◽  
Author(s):  
Trần Thị Linh Giang ◽  
Dương Viết Phương Tuấn
Keyword(s):  
Bile Salt ◽  
Vibrio Parahaemolyticus ◽  
Vibrio Spp

Nghiên cứu về Hội chứng chết sớm ở tôm thực hiện ở Quảng Bình với mục đích tìm hiểu đặc điểm gây bệnh của vi khuẩn Vibrio paraheamolyticus và đặc điểm dịch tể để khuyến cao cách phòng trị và có dự báo sớm làm giảm rủi roc ho nghề nuôi tôm. Có 120 phiếu và 91 mẫu tôm nghi bệnh được thu và nuôi cấy, tìm hiểu đặc điểm vi khuẩn này và phân tích gen để xác định độc tố, đồng thời nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ của bệnh EMS ở 4 huyện, thành phố . Kết quả cho thấy rằng hơn 70% số mẫu nghi bệnh có kết quả dương tính, tần suất nhiễm bệnh cao 10 – 60,6 % và khác nhau ở các tháng và vụ nuôi, cao nhất vào tháng 4 – 7 DL, X2 = 1.60 (df = 4), với P < 0,05. Tôm nhiễm bệnh EMS có các biểu hiện các triệu chứng điển hình gan tuỵ và tỷ lệ chết cao đến 100% nếu không can thiệp kịp thời. Đặc điểm chung các loài vi khuẩn thuộc giống Vibrio: Gram âm, hình que thẳng hoặc hơi uốn cong, kích thước 0,3-0,5 x 1,4-2,6 μm, không hình thành bào tử và chuyển động nhờ một tiên mao hoặc nhiều tiên mao mảnh và yếm khí, hầu hết là oxy hoá và lên men trong môi trường O/F Glucose. Thiosulphate citrate bile salt agar (TCBS) là môi trường chọn lọc của Vibrio spp. Chúng mẫn cảm với Vibriostat 2,4 diamino-6,7 diisopropyl pteridine phosphate (0/129). Tỷ lệ V. parahaemolyticus gây bệnh tôm chết sớm.Vi khuẩn V. parahaemolyticus gây bệnh có đặc điểm cấu trúc gen khác biệt, nhiễm sắc thể tự điều chỉnh nằm ở vị trí 01. Từ những kết quả hình ảnh trên ta thấy được sự sai khác về trình tự gen DNA của mẫu W1, trình tự gen của mẫu này trùng hợp với trình tự gen DNA của Vibrio parahaemolyticus dùng đối chứng trên và sự sai khác về trình tự gen cũng đã thể hiện được khả năng gây bệnh của vi khuẩn V. parahaemolyticus. Các phản ứng với các loại kháng sinh có hiệu quả từ 8 – 45%, đều làm giảm số lượng tôm chết khi nhiễm, cao nhất là Baymet và Osamet, Olimos. Sử dụng chế phẩm Bokashi trầu với hiệu quả tốt nếu dùng từ đầu vụ và đến cuối vụ, với thành phần Eugenol, chavicol và chavibetol đã hạn chế sự phát triển của bệnh, kể cả những ao có mật độ V. parahaemolyticus cao nhưng ít có nguy cơ gây bệnh.

Nồng độ ức chế tối thiểu (Minimal Inhibitory Concentration - MIC) của một số loại kháng sinh đến vi khuẩn phân lập được từ cá dìa thương phẩm mắc bệnh lở loét (Siganus guttatus, Bloch, 1787)

2015 ◽  
Vol 104 (5) ◽  
Author(s):  
Lê Văn Bảo Duy ◽  
Dương Thị Thủy ◽  
Nguyễn Ngọc Phước ◽  
Trương Thị Hoa ◽  
Nguyễn Đức Quỳnh Anh
Keyword(s):  
Minimal Inhibitory Concentration ◽  
Vibrio Parahaemolyticus ◽  
Inhibitory Concentration ◽  
Vibrio Tubiashii

Nghiên cứu được tiến hành nhằm xác định nồng độ ức chế tối thiểu (Minimal Inhibitory Concentration - MIC) của một số loại kháng sinh đến vi khuẩn phân lập được từ cá dìa thương phẩm mắc bệnh lở loét (Siganus guttatus). Từ kết quả phân lập định danh cho thấy 2 chủng Vibrio parahaemolyticus VPMP22 và Vibrio tubiashii ATCC 19109 có mặt trên các vết lở loét ở cá dìa thương phẩm. Kết quả thử nghiệm MIC cho thấy các loại kháng sinh Cefuroxim, Cefotaxim, Tetracycline, Erythromicin, Rifamicin có nồng độ ức chế vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus VPMP22 tốt nhất dưới 0.21 µg/ml. Các kháng sinh có Cefuroxim, Cefotaxim, Oxytetraciline, Erythromicin, Trimethoprim nồng độ ức chế vi khuẩn Vibrio tubiashii ATCC 19109 tốt nhất dưới 1.25 µg/ml. Penicillin có nồng độ ức chế tối thiểu cao nhất đối với cả 2 chủng vi khuẩn trên (80 µg/ml), cho thấy 2 chủng vi khuẩn trên đã có sự kháng thuốc đối với loại kháng sinh này. Do đó, trong phòng trị bệnh lở loét trên cá dìa nên sử dụng Cefuroxim và Cefotaxim để có hiệu quả cao nhất trong phòng trị bệnh.

Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document