Propagación In Vitro de Platicerium andinum Baker a partir de esporas
In vitro propagation of Platicerium andinum Baker from spores
Astriht Ruiz Rios1, Geyden Díaz Montes2 y Astrid Domy Gutiérrez Ruiz2
1Universidad Nacional de San Martín - Tarapoto, Jr. Maynas N° 177 - Tarapoto
2Corporación G y G E.I.R.L., Jr. 02 de Mayo N° 340 - Moyobamba
DOI: https://doi.org/10.33017/RevECIPeru2015.0007/
Resumen
Los bosques del departamento de San Martin, hábitat de Platycerium andinum B. viene siendo destruido de manera desmesurada, ocasionado por actividades antropogénicas, como la extracción de madera, incendios forestales, migración y cambio de uso de la tierra, lo que ha conducido a la especie a que actualmente se encuentre en peligro de extinción, sumándose a ello la extracción de la especie por su exuberante belleza para su comercialización como planta ornamental, asimismo a que sus esporas son difíciles de germinar en condiciones naturales. Además, no se cuenta con una metodología para la propagación in vitro de esta especie. La presente investigación tiene como objetivos determinar la concentración adecuada de hipoclorito de sodio para la obtención de esporas de Platycerium andinum B. libre de patógenos para su óptima germinación y evaluar tres medios de cultivo para determinar el medio más adecuado para la propagación de los gametofitos a través de cultivo in vitro. Las esporas fueron obtenidas de frondas fértiles de plantas adultas de Platicerium andinum B. haciendo un raspado de estas. Previa exposición de las esporas a una temperatura de 30 °C por espacio de 12 horas en estufa, estas fueron desinfectadas en una jeringa de 20 ml. en la cámara de flujo laminar con hipoclorito de sodio a tres diferentes concentraciones (T1: 0.5%, T2: 1% y T3: 1.5 %) por un tiempo de 20 minutos y cuatro enjuagues con agua destilada estéril; obteniendo como mejor resultando con el tratamiento T3: (1.5 %). La germinación de las esporas fue evaluada a partir de los 10 días, tiempo en el cual comenzaron a germinar y a los 30 días ya se tenía abundante tejido gametofitico; se evaluó a través del Índice de Germinación de las esporas (IG) utilizando la escala de abundancia-cobertura de Braun-Blanquet (Mermoz y Martín, 1993 modificada por Ramírez et al., 2000) llegando a los 60 días a la escala 5 (Cualquier número de gametofitos con cobertura mayor de 75%). En cuanto a la determinación del mejor medio de cultivo para la propagación in vitro de gametofitos se trabajó con tres medios MSB (T1, T2 y T3) con aditivos de 0.4 ml. de thiamina, 0.5 de ácido nicotínico, 2 gramos de carbón activado y 20 gramos de sacarosa; con 100 ml de agua de coco en T2, y 200 ml en T3, obteniéndose como mejor resultado al tratamiento T1: (M y S Basal, con adición de 0.4 ml. de thiamina, 0.5 de ácido nicotínico, 2 gramos de carbón activado y 20 gramos de sacarosa).
Descriptores: Gametofito, haploide, esporas, cultivo in vitro.
Abstract
Forests department of San Martin, habitat of Platycerium andinum B. is being destroyed disproportionately, caused by anthropogenic activities such as logging, forest fires, migration and changing land use, which has led to the species to which is currently in danger of extinction, adding to it the extraction of the species for its lush beauty for marketing as ornamental plant, also to the spores are difficult to germinate under natural conditions. Also, we do not have a methodology for in vitro propagation of the species. This research aims to determine the appropriate concentration of sodium hypochlorite to obtain spores of Platycerium andinum B., free of pathogens for optimum germination and evaluate three culture media to determine the most suitable medium for the propagation of the gametophytes through in vitro culture. The spores were obtained from fertile fronds of adult plants of Platicerium andinum B. making a scraping of these. Prior exposure of spores at a temperature of 30 °C for 12 hours in an oven, these were disinfected in a 20 ml syringe. In laminar flow chamber with sodium hypochlorite at three different concentrations (T1: 0.5%, T2: T3 1%: 1.5%) for a time of 20 minutes and four rinses with sterile distilled water; obtaining as being better with the treatment T3 (1.5%). The spore germination was evaluated after 10 days, at which time began to germinate and after 30 days we had plenty gametophytic tissue; it was evaluated through the germination rate of the spores (IG) using the scale of abundance-coverage Braun-Blanquet (Mermoz and Martin, 1993 as amended by Ramirez et al., 2000) coming to 60 days through 5 scale (Any number of gametophytes more coverage 75%). As for determining the best medium for the in vitro propagation of gametophytes we worked with three media MSB (T1, T2 and T3) with additives of 0.4 ml. thiamine, 0.5 nicotinic acid, 2 grams of activated carbon and 20 g of sucrose; with 100 ml of coconut water in T2, and 200 ml in T3, obtaining as best result for T1 (M and S Basal, added 0.4 ml thiamine, 0.5 nicotinic acid, 2 grams of activated carbon and 20 grams of sucrose).
Keywords: Gametophyte, haploid spores, in vitro culture.
Larch regeneration (larix sibirica.ldb) from zygote embryos in in vitro and proliferation rate under growth hormone influence
