Использование ионообменной хроматографии для получения изоферментов лактатдегидрогеназы в печени крыс

Разработанная схема очистки, включающая три последовательные стадии, позволила провести высокоэффективное разделение форм лактатдегидрогеназы из печени крысы. Получение изоферментов в высокоочищенном состоянии открывает перспективы исследования их каталитических и регуляторных характеристик. Особую важность это имеет в перспективе изучения функционирования данной ферментной системы в гепатоцитах крыс с индуцированным аллоксановым диабетом. Известно, что адаптивная реакция клеточного метаболизма к экспериментальному диабету происходит на уровне ферментных систем цикла Кребса и глиоксилатного пути. Результаты исследования регуляторных и физико-химических характеристик свидетельствуют, что выделенные из гепатоцитов крыс изоферменты ЛДГ отличаются по электрофоретической подвижности, сродству к субстрату и коферменту. Значения Rf составили для ЛДГ1 – 0.07, для ЛДГ2 – 0.16 и для ЛДГ3 – 0.25. Ранее исследования этого фермента у гороха на нашей кафедре показали, что на электрофореграмме у данного организма при специфическом окрашивании проявляется одна полоса с Rf 0.65 Сродство фермента к субстрату имеет большое значение для скорости протекания ферментативного катализа, поэтому полученные в нашей работе каталитические характеристики дают возможность обосновать трансформацию путей утилизации пирувата в клетках крыс в нормальных условиях и при патологиях, вызванных экспериментальным диабетом. Наибольшей афинностью к субстрату обладает 3 изофермент (Km=0.227 мМ),наименьшей – ЛДГ1 (Km=14.104 мМ). Интересно, что в отличие от ЛДГ другого представителя млекопитающих – черногубой пищухи – два изофермента ЛДГ крысы показывают значительно большее сродство к пирувату. Таким образом, использование ионообменной хроматографии позволило получить три изоформы лактатдегидрогеназы из клеток печени крыс и изучить их физико-химические характеристики. ЛИТЕРАТУРА 1. Епринцев А.Т., Попов В.Н., Шевченко М.Ю. Глиоксилатный цикл: универсальныймеханизм адаптации? М. ИКЦ «Академкнига». 2007. 228 с.2. Nikiforov A, Kulikova V, Ziegler M. // Crit Rev Biochem Mol Biol. 2015. Vol.50. No 4. pp. 284-297.3. Bilan D.S., Matlashov M.E., Gorokhovatsky A.Y., Schultz C. et al. // Biochim BiophysActa. 2014. Vol.1840. No 3. pp. 951-957.4. Raph S.M., Bhatnagar A., Nystoriak M.A. // Chem Biol Interact. 2019. Vol. 305. pp 21-27.5. Секерина Е.М. // Химия и химическая технология : тезисы научно-технической выставки-конференции ХТИ. Екатеринбург, 2013. С. 8. Режим доступа: http://elar.urfu.ru/handle/10995/216486. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. // J. Biol. Chem. 1951. Vol. 193. pp. 265-275.7. Davis B.J. // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. Vol. 121. pp. 404-427.8. Avezov K., Reznick A.Z., Aizenbud D. // Arch Oral Biol. 2014. Vol. 59. pp.142-148.9. Beebee T.J., Carty D.S. // Biochem J. 1982. Vol. 205. No 2. pp. 313-320.10.Jiang T., Xu Y., Sun X., Zheng Z. et al. // Protein Expr Purif. 2014. Vol. 95. pp.219-22511.Fregoso-Peñuñuri A.A., Valenzuela-Soto E.M., Figueroa-Soto C.G., Peregrino-UriarteA.B. et al. // Protein Expr Purif. 2017. Vol. 137. pp.20-2512.Халилов Р.А., Джафарова М.А., Мейланов И.С. // Известия вузов. Северо-Кавказский регион. 2011. № 1. С. 76-78.13.Аль Дайни Саба Хади, Сыромятников М.Ю., Гати Моханнад Абдулраззак Гати,Епринцев А.Т.// Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2012. № 1 С. 176-181.

Aspectos clínicos e tomográficos de exostose mandibular extensa e o seu manejo para melhora na qualidade de vida: relato de um caso incomum na literatura

O tórus mandibular é considerado uma protuberância óssea (exostose) de etiologia desconhecida classificada como não-patológica, comumente vista em região lingual dos incisivos até pré-molares inferiores. Sua característica histopatológica é semelhante ao osso normal descrevendo-se osso cortical lamelar com a presença de canais de Havers, osteócitos normais e áreas dispersas de tecido conjuntivo. Normalmente se apresentam bilateralmente e indolores. Sem causar prejuízo na vida da pessoa que apresenta esta condição, devido estes aspectos, na maioria dos casos, não há intervenção cirúrgica, sendo o caso apenas acompanhado clinicamente. Neste caso apresentado, o objetivo é expor uma condição extrema desta exostose mandibular, tendo como finalidade a melhora na qualidade de vida do paciente.Descritores: Cirurgia Bucal; Exostose; Qualidade de Vida.ReferênciasKumar Singh A, Sulugodu Ramachandra S, Arora S, Dicksit DD, Kalyan CG, Singh P. Prevalence of oral tori and exostosis in Malaysian population - A cross-sectional study. J Oral Biol Craniofac Res. 2017;7(3):158-60.Hiremath VK, Husein A, Mishra N. Prevalence of torus palatinus and torus mandibularis among Malay population. J Int Soc Prev Community Dent. 2011;1(2):60-4.Sathya K, Kanneppady SK, Arishiya T. Prevalence and clinical characteristics of oral tori among outpatients in Northern Malaysia. J Oral Biol Craniofac Res. 2012;2(1):15-19.Jainkittivong A, Apinhasmit W, Swasdison S. Prevalence and clinical characteristics of oral tori in 1,520 Chulalongkorn University Dental School patients. Surg Radiol Anat. 2007;29(2):125-31.Kim YS. Pathogenetic growth potential in the central area of oral exostosis. Korean J Oral Maxillofac Pathol. 2013;37(5):201-10.Morrison MD, Tamimi F. Oral tori are associated with local mechanical and systemic factors: A case-control study. J Oral. Maxillofac Surg. 2013;71(1):14-22.García-García AS, Martínez-González JM, Gómez-Font R, Soto-Rivadeneira A, Oviedo-Roldán L. Current status of the torus palatinus and torus mandibularis. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 2010;15(2):e353-60.Ladizinski B, Lee KC. A nodular protuberance on the hard palate. JAMA. 2014;311(15):1558-59.Khan S, Shah SAH, Ali F, Rasheed D. Concurrence of torus palatinus, torus mandibularis and buccal exostosis. J Coll Physicians Surg Pak. 2016;26(11):111-13.Kün-Darbois JD, Guillaume B, Chappard D. Asymmetric bone remodeling in mandibular and maxillary tori. Clin Oral Investig. 2017;21(9):2781-88.Riley DS, Barber MS, Kienle GS, Aronson JK, von Schoen-Angerer T, Tugwell P et al. CARE guidelines for case reports: explanation and elaboration document. J Clin Epidemiol. 2017;89:218-35.Kucukkurt S, Özle M, Baris E. Peripheral osteoma in an unusual location on the mandible. BMJ Case Rep. 2016;2016. pii: bcr2016216554.