Absence of Bacterial Adherence in the Establishment of Experimental Mastitis in Mice

1978 ◽  
Vol 15 (6) ◽  
pp. 770-775 ◽  
Author(s):  
J. C. Anderson

The possibility of adherence of Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli or Streptococcus agalactiae to the epithelium of the mammary gland was investigated by inoculating them into this gland of mice. S. aureus, S. epidermidis and E. coli did not adhere to alveolar epithelium in suckling or non-suckling mice. S. agalactiae adhered to alveolar epithelium in non-suckling mice but adhesion was not sufficiently strong to withstand suckling. Bacterial adherence probably does not play a significant role in the establishment of mastitis by these organisms.

Author(s):  
Henry Jurado-Gámez ◽  
Manuel Gúzman-Insuasty

<p>Se determinó la cinética, pruebas de crecimiento y el efecto de inhibición <em>in vitro</em> de <em>Lactobacillus casei</em> sobre <em>Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae </em>y<em> Escherichia coli</em>. Se usaron cepas de casa comercial y cepas aisladas en la Vereda La Victoria, Corregimiento de Catambuco al suroccidente del municipio de Pasto, Nariño, Colombia. Se evaluó el efecto de los antibióticos Dicloxacilina, Cefepima, Cefalotina, Ciprofloxacina, Gentamicina, Penicilina, Trimetropim Sulfa y Ampicilina. Se evaluó la inhibición producida por <em>L. casei</em> y su sobrenadante sobre las bacterias patógenas. El crecimiento de la bacteria láctica se evaluó con tres niveles de pH (2,5, 4,5 y 7),  tres concentraciones de sales biliares (0,5, 1 y 2%) y dos de bilis bovina (1 y 1,2%), y dos temperaturas (38 y 45°C). Igualmente se determinó la cinética de crecimiento y las variables pH, azúcar total, proteína y ácido láctico.  Mediante HPLC se determinaron los péptidos y los ácidos orgánicos presentes en el sobrenadante. <em>L. casei </em>mostró susceptibilidad a la Ciprofloxacina y Ampicilina, mientras que <em>S. aureus </em>mostró susceptibilidad y resistencia a todos los antibióticos para la cepa comercial y aislada respectivamente, el mismo comportamiento se presentó con <em>S. epidermidis</em>. Las cepas de <em>S. agalactiae</em> y <em>E. coli</em> aisladas y comerciales mostraron susceptibilidad a los antibióticos.  La cepa láctica mostró un efecto de inhibición de <em>S. aureus</em>, <em>S. epidermidis</em> y  <em>S. agalactiae</em>, pero no fue efectiva con <em>E. coli</em>, igual comportamiento se observó con el uso del sobrenadante de la bacteria láctica. Se encontró crecimiento de 1 x 10<sup>10</sup> y 5,1 x 10<sup>7</sup> UFC/ml para 1 y 1,2 % de bilis bovina; 2,3 x 10<sup>7</sup>, 1 x 10<sup>9</sup> y 3 x 10<sup>8</sup> UFC/ml para 0,5, 1 y 2 % de sales biliares respectivamente; 1,1 x 10<sup>11</sup>, 2,0 x 10<sup>10</sup> y 1,0 x 10<sup>10</sup> UFC/ml para  pH de 2,5, 4,5 y 7 respectivamente. La fase exponencial se encontró a 16:48 horas con un crecimiento de 3 x 10<sup>10</sup> UFC/ml. La variables pH, azúcar, acidez y proteína durante la fase exponencial fueron de 4,94, 0,88 mg/l, 2,89 mg/l y 1,9 mg/l, respectivamente. La prueba de HPLC para péptidos mostró la presencia de una cadena VAL-TIR-VAL y para ácidos orgánicos se encontró una producción de 83,46% de ácido láctico. <em>L. casei </em> mostró buenas características probiótica que permitirían su aplicación en ensayos in vivo para el control de microorganismos causantes de mastitis subclínica en vacas.</p>


Author(s):  
Henry Jurado-Gámez ◽  
Manuel Gúzman-Insuasty ◽  
V. Jarrín-Jarrín

<p>Se determinó la cinética, pruebas de crecimiento y efecto de inhibición <em>in vitro</em> de <em>Lactobacillus lactis </em>sobre las bacterias patógenas <em>Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae </em>y<em> Escherichia coli</em>. Los análisis fueron realizados en el laboratorio de microbiología de la Facultad de Ciencias Pecuarias de la Universidad de Nariño. Las cepas patógenas fueron evaluadas por duplicado, la primera con el uso de cepas de referencia y las segundas, cepas aisladas de la región de Nariño, Colombia. Se determinó la inhibición de los antibióticos Gentamicina, Penicilina, Ciprofloxacina, Dicloxacilina, Cefepime, Cefalotina, Trimetropin Sulfa y Ampicilina mediante la metodología de kirby bauer. Se determinó la inhibición de <em>L. lactis</em> y el sobrenadante sobre todas las bacterias patógenas. Se evaluó el crecimiento de la bacteria láctica a 3 concentraciones de sales biliares (0,5, 1 y 2%) y 2 concentraciones de bilis bovina (1 y 1,2%); 3 pH (2, 4,5 y 7) y 2 temperaturas (38 y 45 °C). Se determinó la fase exponencial de crecimiento de la bacteria láctica y las variables cinéticas pH, azúcar, acidez y proteína. Se analizaron los péptidos presentes en el sobrenadante y la producción de ácidos orgánicos mediante HPLC. Se encontraron los microorganismos <em>S. aureus, S. epidermidis, S. agalactiae </em>y<em> E. coli</em> en leche de vacas con mastitis subclínica en la región de Nariño, Colombia; las cepas fueron aisladas para su análisis. Se encontró susceptibilidad de las cepas de referencia a los anbitióticos evaluados y resistencia de las cepas aisladas. Se observó que únicamente la cepa de referencia de <em>S. aureus </em>fue resistente a la bacteria láctica; ambas cepas de <em>S. agalactiae</em> presentaron resistencia; mientras que <em>S. epidermidis</em> y <em>E. coli</em> mostraron susceptibilidad. Se encontró que el sobrenadante inhibe en mayor proporción a las bacterias patógenas de referencia; mientras que las aisladas posee mayor resistencia. La cepa láctica tuvo un crecimiento de 0 y 5 x 10<sup>9</sup> UFC/ml a concentraciones de 1 y 1,2%; mientras que con sales biliares se encontró crecimiento únicamente a 0,5% (5 x 10<sup>8</sup> UFC/ml). La prueba de pH indicó crecimientos de 1,4 x 10<sup>12</sup>,  6,4 x 10<sup>11</sup> y 7,5 x 10<sup>11</sup> para pH 2, 4,5 y 7 respectivamente y la temperatura, 2,8 x 10<sup>12</sup> y 3,1 x 10<sup>12</sup> UFC/ml para 38 y 45°C. Durante la fase exponencial se encontraron valores de: 2 x 10<sup>11</sup> UFC/ml a las 14:48 horas; 4,29 de pH, 0,62% de acidez, 2,18 mg/l de azúcar y 0,279 mg/l de proteína. Las pruebas de HPLC indicaron la presencia del péptido VAL-TIRL-VAL y 82,9% de ácido láctico. <em>L. lactis</em> posee características <em>in vitro </em>adecuadas para inhibir cepas patógenas presentes en leche con mastitis subclínica de la región de Nariño, Colombia.</p>


2019 ◽  
Vol 12 (2) ◽  
pp. 159-165
Author(s):  
Francheska Coricaza-Cuaresma ◽  
Moisés Apolaya-Segura ◽  
Cristian Díaz-Vélez

Objetivo: Describir el perfil microbiológico y de resistencia antibiótica en el servicio de pediatría de la Clínica Jesús del Norte, 2016. Material y métodos: Se diseñó un estudio descriptivo de serie de casos. El estudio se desarrolló en el Servicio de Pediatría de la Clínica Jesús del Norte. Resultados: Se analizaron 1264 muestras de pacienres <15 años con cultivos positivos de orina, heces, sangre y secreción faríngea. El 67,7% fue en <5 años y predomino en mujeres con 59,22%. El germen aislado en mayor frecuencia fue Escherichia coli con 46,68%. Por tipo de muestra el más frecuente fueron: En Coprocultivo: Escherichia coli enteropatógena, Urocultivo: Escherichia coli, Hemocultivo: Staphylococcus epidermidis y en secreción faríngea: Staphylococcus aureus. Llamó la atención la presencia de 105 casos (7,27%) de E. coli BLEE en urocultivos. Conclusiones: Los cultivos positivos fueron más frecuentes en mujeres, en menores de 5 años, atendidos en emergencia y de muestra de heces. Apreciándose alta frecuencia de resistencia a fármacos de primera y segunda línea en diversos agentes etiológicos aislados en las muestras.


Author(s):  
Miladys Esther Torrenegra Alarcón ◽  
Nerlis Paola Pájaro ◽  
Glicerio León Méndez

Se evaluó la actividad antibacteriana in vitro de aceites esenciales de diferentes especiesdel género Citrus frente a cepas ATCC de Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis,Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli, determinandola concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida(CMB). Las bacterias se replicaron en medios de agar y caldos específicos. Se determinóel momento de máxima densidad óptica (DO620) para emplearlo como tiempode incubación; luego se hicieron pruebas de evaluación de sensibilidad con la exposiciónde las cepas a concentraciones a 1000 g/mL del extracto en caldo. Para solubilizarse empleó dimetilsulfóxido (DMSO) al 1%. Posteriormente, se le determinó laconcentración mínima inhibitoria mediante metodologías de microdilución en caldoy la concentración mínima bactericida. Encontrándose una actividad de los aceitesesenciales del género Citrus, con valores de CMI ≥ 600 mg/mL frente a S. aureus,S. epidermidis, K. pneumoniae, P. aeruginosa y E. coli. En función a los resultados obtenidos,se concluye que las diferentes especies del género Citrus son consideradas comopromisorias para el control del componente bacteriano.


2015 ◽  
Vol 6 (6) ◽  
pp. 879-886 ◽  
Author(s):  
B. Seridan Assis ◽  
P. Germon ◽  
A.M. Silva ◽  
S. Even ◽  
J.R. Nicoli ◽  
...  

Bovine mastitis, an inflammatory disease of the mammary gland often associated to bacterial infection, is the first cause of antibiotic use in dairy cattle. Because of the risk of antibioresistance emergence, alternative non-antibiotic strategies are needed to prevent or to cure bovine mastitis and reduce the antibiotic use in veterinary medicine. In this work, we investigated Lactococcus lactis V7, a strain isolated from the mammary gland, as a probiotic option against bovine mastitis. Using bovine mammary epithelial cell (bMEC) culture, and two representative strains for Escherichia coli and for Staphylococcus aureus, two major mastitis pathogens, we investigated L. lactis V7 ability to inhibit cell invasion (i.e. adhesion and internalization) of these pathogens into bMEC. L. lactis V7 ability to modulate the production of CXCL8, a key chemokine IL-8 responsible for neutrophil influx, in bMEC upon challenge with E. coli was investigated by an ELISA dosage of CXCL8 in bMEC culture supernatants. We showed that L. lactis V7 inhibited the internalisation of both E. coli and S. aureus strains into bMEC, whereas it inhibited the adhesion of only one out of the two S. aureus strains and of none of the E. coli strains tested. Investigation of the bMEC immune response showed that L. lactis V7 alone induced a slight increase in CXCL8 production in bMEC and that it increased the inflammatory response in bMEC challenged with the E. coli strains. Altogether these features of L. lactis V7 make it a potential promising candidate for a probiotic prevention strategy against bovine mastitis.


2016 ◽  
Vol 36 (9) ◽  
pp. 874-880 ◽  
Author(s):  
Jardel B. Silva ◽  
Kizzy M.F.M. Costa ◽  
Wesley A.C. Coelho ◽  
Kaliane A.R. Paiva ◽  
Geysa A.V. Costa ◽  
...  

Resumo: Esse estudo objetivou avaliar a composição química e potencial terapêutico do extrato hidroalcóolico de geoprópolis produzidas por abelhas Plebeia aff. flavocincta no semiárido do Rio Grande do Norte. Oito amostras (A-H) foram submetidas a quantificação dos teores de fenóis e flavonoides totais e avaliação da atividade antioxidante através do método DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazilo). Além disso, foram investigadas as atividades antibacteriana, através do método de difusão em ágar, e a cicatrizante, através da indução de feridas cirúrgicas experimentais em Rattus norvegicus Berkenhout, 1769, linhagem Wistar, tratados com creme à base de geoprópolis. Duas amostras (F e G) se destacaram por apresentar altos valores de fenóis e flavonoides totais. A capacidade antioxidante acima de 90% foi observada em cinco amostras. Os extratos foram considerados eficazes no que se refere a atividade antibacteriana, pois das oito amostras, cinco promoveram a formação de halos de inibição ≥9mm para todas as cepas testadas. Duas amostras (D e G) se destacaram em relação as demais por apresentar excelentes resultados, uma vez que, promoveram a formação de halos de inibição para as bactérias Staphylococcus epidermidis e Escherichia coli, superiores estatisticamente aos valores dos antibióticos controles, quando na concentração de 100%. As amostras A e G promoveram, respectivamente, a formação de halos de inibição, que não diferiram significativamente dos halos produzidos pelos antibióticos controles em todas as concentrações testadas para E. coli e Staphylococcus aureus. A análise do processo de cicatrização sob os pontos de vista clínico, macroscópico e histológico permitiu concluir, que o uso do creme à base de geoprópolis apresentou influência positiva na cicatrização de feridas cutâneas experimentais, por promover reação inflamatória menos intensa e fechamento mais rápido das feridas em relação ao grupo controle.


1977 ◽  
Vol 14 (6) ◽  
pp. 618-628 ◽  
Author(s):  
J. C. Anderson ◽  
M. R. Burrows ◽  
A. J. Bramley

The possible role of bacterial adherence in the pathogenesis of experimental mastitis in the mouse was examined with four strains of Escherichia coli. Two of these strains had a known adhesion antigen (K88) and two did not. The K88 antigen did not play a significant role in the virulence or infectivity of E. coli either in the murine or bovine mammary gland. Two E. coli strains, W1 (K88+) and J2 (K88−) were virulent in the mouse but did not adhere to epithelial cells. Both these strains produced clinical mastitis in the cow. A third strain, D282 (K88−), produced mild disease in the mouse but was avirulent in the cow. The fourth strain, 233/1D (K88+), was avirulent in both the mouse and the cow. Strains D282 and 233/1D were killed rapidly by bovine serum whilst J2 and W1 were more resistant. All strains were more sensitive than the control resistant strain E. coli P4, which is known to be highly virulent for the lactating udder.


2018 ◽  
Vol 38 (7) ◽  
pp. 1358-1364 ◽  
Author(s):  
Gustavo P. Machado ◽  
Rodrigo C. Silva ◽  
Felipe F. Guimarães ◽  
Anelise Salina ◽  
Hélio Langoni

ABSTRACT: This study evalueted the prevalence of Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae and Escherichia coli in milk samples from 257 goats (513 half-udders) and ten bulk tanks, from ten dairy goat farms of São Paulo State, Brazil, by multiplex-PCR. The samples were screened by microbiological culture (gold-standard), and tested by different multiplex-PCR protocols for the detection of each bacterium. A total of 178 half-udders resulted positive by microbiological culture, with coagulase-negative staphylococci (70%), S. aureus (13.5%), S. intermedius (7.9%), and Enterobacteriaceae (4%) the prevalent pathogens. In other way, multiplex-PCR detected 173 pathogens in 151/523 (28.9%; CI95% 25.2-32.9%) milk samples 144/513 (28.1%) half-udders and 7/10 (70%) bulk tanks, with E. coli (86/162, 51.9%) and S. aureus (50/162, 30.9%) the prevalent ones in half-udders, and S. aureus (6/10, 60%) and E. coli (4/5, 36.4%) in bulk tanks. Multiplex-PCR showed a high performance for the detection of three bacteria at a time in mastitic goat milk direct from half-udders or bulk tanks. Thus, this multiplex-PCR protocol proved to be an adequate tool for the identification of the most common mastitis pathogens, independent of their phenotypic characteristics in the diagnosis of clinical mastitis in goats, allowing a continuous and better vigilance and monitoring the herd, being included in quality programs.


2012 ◽  
Vol 3 (2) ◽  
pp. 178-180
Author(s):  
M Avais ◽  
G Muhammad ◽  
A Shahzad ◽  
MQ Bilal ◽  
S Hameed

Twenty buffaloes clinically positive for mastitis were selected for the collection of milk samples. Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae and Escherichia coli were isolated from milk of mastitic buffaloes according to the procedures recommended by National Mastitis Council Inc., USA. The composite antigen containing S. aureus, Str. Agalactiae and E. coli was then prepared and the concentration of each isolate was adjusted to 1 x 109 cells / ml. To evaluate the antibody response, nine adult healthy rabbits were divided randomly into three groups (A, B and C) consisting of 3 rabbits each. Composite antigen preparation was injected subcutaneously to the rabbits of groups A and B @ 0.2 ml / rabbit while each rabbit of group C inoculated with 0.2 ml normal saline and served as control. The rabbits of group B were given a booster dose at day 15 of the primary injection to see the secondary antibody response. The level of antibodies specific to S. aureus, Str. agalactiae and E. coli were assayed by indirect haemagglutination test (HA) and finally geometric mean titre (GMT) was calculated. At day 0 to 15, it was observed that the antibody titre was almost same in both groups. At day 30 significant difference in antibody titres was observed between group A and B with GMT of 9.8 against S. aureus, and Str. agalactiae in group A whereas in group B GMT was 97.0 against S. aureus and 39.4 against Str. agalactiae which was higher than group A. The GMT against E. coli was 12.1 and 24.3 in group A and B, respectively. At day 45 and 60 there was progressive decrease in antibody titre against Str. agalactiae in group B. The antibody titre against S. aureus first increased at day 45 and then decreased at day 60 whereas the antibody titre against E. coli remained persistent till day 60 in rabbits of group B. Furthermore, the primary antibody response to E. coli of composite antigen was higher (GMT, 12.1 at day 15) compared with S. aureus and Str. agalactiae (GMT, 9.8 at day 15) whereas the secondary antibody response to S. aureus was higher (GMT, 128) compared with Str. agaiactiae and E. coli (GMT, 24.3 at day 45).


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