scholarly journals Φυτοχημική ανάλυση του φυτού Indigofera hirsuta (Leguminosae) και έλεγχοι αντιοξειδωτικής δράσης και αναστολής της ALR-1, ALR-2

2017 ◽  
Author(s):  
Βασιλική-Χριστίνα Καρακούση
Keyword(s):  

Το γένος Indigofera (Fabaceae) εκπροσωπείται από 700 είδη θάμνων, ενδημικά τροπικών και υποτροπικών περιοχών με ευρεία εξάπλωση στην κεντρική Αφρική, Ινδία, Ταϊλάνδη, Κίνα, Αυστραλία, και Λατινική Αμερική. Το είδος αυτό χρησιμοποιείται στην παραδοσιακή θεραπευτική για την αντιμετώπιση του διαβήτη, της λέπρας, της φυματίωσης, των μολύνσεων, ως αντίδοτο σε δάγκωμα φιδιού καθώς και για την θεραπεία της ελονοσίας. Επίσης διάφορα είδη του γένους αυτού επιδεικνύουν ηπατοπροστατευτική, αντιφλεγμονώδη και αντικαρκινική δράση. Διάφορα χημικά συστατικά έχουν απομονωθεί από το γένος αυτό όπως φλαβονοειδή, πτεροκαρπάνια, ροτενοειδή, φαινολικά οξέα, και αλειφατικές νιτροενώσεις. Ο σκοπός της παρούσας ερευνητικής εργασίας ήταν η απομόνωση χημικών συστατικών των διαφόρων εκχυλισμάτων, η εκτίμηση της αντιοξειδωτικής δράσης αυτών των εκχυλισμάτων με τη μέθοδο του DPPH•. Επιπλέον in vitro πειράματα διεξήχθησαν για την αποτίμηση της αντιφλεγμονώδους δράσης μέσω της αναστολής του ενζύμου της λιποξυγονάσης LOX• καθώς και την εκτίμηση της αναστολής του ενζύμου της αναγωγάσης της αλδόζης (ΑLR2) και της αναγωγάσης της αλδεΰδης (ALR1). Η αναγωγάσης της αλδόζης (ΑLR2) αποτελεί ένζυμο της οδού των πολυολών και είναι άμεσα σχετιζόμενη με την αιτιολογία των δευτερογενών επιπλοκών του διαβήτη τύπου ΙΙ. Το αποξηραμένο φυτικό υλικό εκχυλίστηκε εξαντλητικά με πετρελαϊκό αιθέρα, διχλωρομεθάνιο και μεθανόλη. Η εξάτμιση του μεθανολικού εκχυλίσματος υπό κενό, έδωσε ξηρό υπόλειμμα βάρους (27.63 g), το οποίο στη συνέχεια διαλύθηκε σε ζέον ύδωρ, ακολούθησε δε εκχύλιση διαδοχικά με διαιθυλαιθέρα, οξικό αιθυλεστέρα και βουτανόλη καθώς και συλλογή του εναπομείναντος υδατικού εκχυλίσματος. Η ποιοτική ανάλυση των εκχυλισμάτων του διαιθυλαιθέρα, του οξικού αιθυλεστέρα, της βουτανόλης και του υδατικού κλάσματος διεκπεραιώθηκε μέσω της χρήσης του συστήματος LC-DAD-MS (ESI+). Η απομόνωση των βασικών συστατικών διεξήχθη με τη χρήση τεχνικών όπως η υγρή χρωματογραφία στήλης (CC), η υγρή χρωματογραφία υψηλής πίεσης (HPLC) και η χρωματογραφία λεπτής στιβάδας (TLC). H αποτίμηση της χημικής δομής επιτεύχθηκε με τη βοήθεια διαφόρων τεχνικών Πυρηνικού Μαγνητικού Συντονισμού (φάσματα NMR) και HR-MS/MS. Ακολούθησε φυτοχημική ανάλυση με χρωματογραφικές τεχνικές καθώς και με την τεχνική του LC-DAD-MS. Οι απομονωμένες ενώσεις ανήκουν στις κατηγορίες των υδροξυβενζοϊκών οξέων, των υδροξυ-κινναμωμικών οξέων, των φλαβονοειδών γλυκοζιτών, ενός ινδολικού παραγώγου, ενός στεροειδούς, δύο εστέρων της τριακυλογλυκερόλης, των σακχάρων και μιας κυκλιτόλης. Μερικές από τις ενώσεις απομονώθηκαν για πρώτη φορά από το γένος Indigofera. Οι ενώσεις που διευκρινίστηκαν μέσω του συστήματος LC-DAD-MS (ESI+), ανήκουν στις κατηγορίες των υδροξυ-κινναμωμικών οξέων, των εστέρων του κινικού οξέος με υδροξυ-κινναμωμικά οξέα και των γλυκοζιτών των φλαβονοειδών. Η μελέτη της αντιοξειδωτικής δράσης έδειξε ότι το εκχύλισμα που εμφάνισε την ισχυρότερη ικανότητα σάρωσης ελευθέρων ριζών ήταν το εκχύλισμα του οξικού αιθυλεστέρα, ενώ η μελέτη της ικανότητας αναστολής του ενζύμου της λιποξυγονάσης οδήγησε στο συμπέρασμα ότι το εκχύλισμα με την ισχυρότερη αντιφλεγμονώδη δράση ήταν το βουτανολικό (κοντά στο 65%), με δεύτερο το εκχύλισμα του οξικού αιθυλεστέρα που εμφάνισε 58% αναστολή. Τα αποτελέσματα από την ικανότητα αναστολής των ενζύμων της αναγωγάσης της αλδόζης και της αναγωγάσης της αλδεΰδης έδειξαν ότι τα εκχυλίσματα που εμφάνισαν την ισχυρότερη δράση ήταν του οξικού αιθυλεστέρα και του διαιθυλαιθέρα. Η προαναφερθείσα αναστολή κυμάνθηκε από 85% μέχρι 93%. Επιπροσθέτως και το υδατικό εκχύλισμα εμφάνισε ικανότητα αναστολής του ενζύμου. Η παρούσα εργασία είναι η πρώτη φυτοχημική μελέτη των εκχυλισμάτων του διαιθυλαιθέρα, του οξικού αιθυλεστέρα, του βουτανολικού εκχυλίσματος, του εκχυλίσματος του πετρελαϊκού αιθέρα και του υδατικού κλάσματος, η πρώτη in vitro μελέτη της αντιοξειδωτικής δράσης των εκχυλισμάτων, η πρώτη in vitro μελέτη της αντιφλεγμονώδους δράσης με τη μέθοδο της LOX και η πρώτη in vitro μελέτη της αναστολής των ενζύμων της αναγωγάσης της αλδόζης (ΑLR2) και της αναγωγάσης της (ΑLR1).

1972 ◽  
Vol 8 (4) ◽  
pp. 355-368 ◽  
Author(s):  
Ting Wen Poh ◽  
Geh Swee Lan ◽  
Lim Yau Chuan

SUMMARYA previously undescribed mosaic disease was observed on groundnut plants in several districts of West Malaysia. The virus was transmissible through sap, grafting and the aphids Aphis craccivora, A. gossypi, Myzus persicae, Rhopalosiphum maidis and Toxoptera citricidus. A. craccivora, the principal vector, shows dual transmission. The host range of the virus included mostly leguminous plants such as Glycine max, Cassia occidentalis, Crotalaria anagyroides, Indigofera hirsuta, Stylosanthes gracilis and Phaseolus vulgaris, and a non-leguminous host Chenopodium amaranticolor. The longevity in vitro of the virus was between 40–48 hours, its thermal end-point between 63° and 65°C and the dilution end-point 10−4.


Author(s):  
P.L. Moore

Previous freeze fracture results on the intact giant, amoeba Chaos carolinensis indicated the presence of a fibrillar arrangement of filaments within the cytoplasm. A complete interpretation of the three dimensional ultrastructure of these structures, and their possible role in amoeboid movement was not possible, since comparable results could not be obtained with conventional fixation of intact amoebae. Progress in interpreting the freeze fracture images of amoebae required a more thorough understanding of the different types of filaments present in amoebae, and of the ways in which they could be organized while remaining functional.The recent development of a calcium sensitive, demembranated, amoeboid model of Chaos carolinensis has made it possible to achieve a better understanding of such functional arrangements of amoeboid filaments. In these models the motility of demembranated cytoplasm can be controlled in vitro, and the chemical conditions necessary for contractility, and cytoplasmic streaming can be investigated. It is clear from these studies that “fibrils” exist in amoeboid models, and that they are capable of contracting along their length under conditions similar to those which cause contraction in vertebrate muscles.


Author(s):  
John J. Wolosewick ◽  
John H. D. Bryan

Early in spermiogenesis the manchette is rapidly assembled in a distal direction from the nuclear-ring-densities. The association of vesicles of smooth endoplasmic reticulum (SER) and the manchette microtubules (MTS) has been reported. In the mouse, osmophilic densities at the distal ends of the manchette are the organizing centers (MTOCS), and are associated with the SER. Rapid MT assembly and the lack of rough ER suggests that there is an existing pool of MT protein. Colcemid potentiates the reaction of vinblastine with tubulin and was used in this investigation to detect this protein.


Author(s):  
E. J. Kollar

The differentiation and maintenance of many specialized epithelial structures are dependent on the underlying connective tissue stroma and on an intact basal lamina. These requirements are especially stringent in the development and maintenance of the skin and oral mucosa. The keratinization patterns of thin or thick cornified layers as well as the appearance of specialized functional derivatives such as hair and teeth can be correlated with the specific source of stroma which supports these differentiated expressions.


Author(s):  
M. Kraemer ◽  
J. Foucrier ◽  
J. Vassy ◽  
M.T. Chalumeau

Some authors using immunofluorescent techniques had already suggested that some hepatocytes are able to synthetize several plasma proteins. In vitro studies on normal cells or on cells issued of murine hepatomas raise the same conclusion. These works could be indications of an hepatocyte functionnal non-specialization, meanwhile the authors never give direct topographic proofs suitable with this hypothesis.The use of immunoenzymatic techniques after obtention of monospecific antisera had seemed to us useful to bring forward a better knowledge of this problem. We have studied three carrier proteins (transferrin = Tf, hemopexin = Hx, albumin = Alb) operating at different levels in iron metabolism by demonstrating and localizing the adult rat hepatocytes involved in their synthesis.Immunological, histological and ultrastructural methods have been described in a previous work.


Author(s):  
Ann Chidester Van Orden ◽  
John L. Chidester ◽  
Anna C. Fraker ◽  
Pei Sung

The influence of small variations in the composition on the corrosion behavior of Co-Cr-Mo alloys has been studied using scanning electron microscopy (SEM), energy dispersive x-ray analysis (EDX), and electrochemical measurements. SEM and EDX data were correlated with data from in vitro corrosion measurements involving repassivation and also potentiostatic anodic polarization measurements. Specimens studied included the four alloys shown in Table 1. Corrosion tests were conducted in Hanks' physiological saline solution which has a pH of 7.4 and was held at a temperature of 37°C. Specimens were mechanically polished to a surface finish with 0.05 µm A1203, then exposed to the solution and anodically polarized at a rate of 0.006 v/min. All voltages were measured vs. the saturated calomel electrode (s.c.e.).. Specimens had breakdown potentials near 0.47V vs. s.c.e.


Author(s):  
M.J. Murphy ◽  
R.R. Price ◽  
J.C. Sloman

The in vitro human tumor cloning assay originally described by Salmon and Hamburger has been applied recently to the investigation of differential anti-tumor drug sensitivities over a broad range of human neoplasms. A major problem in the acceptance of this technique has been the question of the relationship between the cultured cells and the original patient tumor, i.e., whether the colonies that develop derive from the neoplasm or from some other cell type within the initial cell population. A study of the ultrastructural morphology of the cultured cells vs. patient tumor has therefore been undertaken to resolve this question. Direct correlation was assured by division of a common tumor mass at surgical resection, one biopsy being fixed for TEM studies, the second being rapidly transported to the laboratory for culture.


Author(s):  
Tai-Te Chao ◽  
John Sullivan ◽  
Awtar Krishan

Maytansine, a novel ansa macrolide (1), has potent anti-tumor and antimitotic activity (2, 3). It blocks cell cycle traverse in mitosis with resultant accumulation of metaphase cells (4). Inhibition of brain tubulin polymerization in vitro by maytansine has also been reported (3). The C-mitotic effect of this drug is similar to that of the well known Vinca- alkaloids, vinblastine and vincristine. This study was carried out to examine the effects of maytansine on the cell cycle traverse and the fine struc- I ture of human lymphoblasts.Log-phase cultures of CCRF-CEM human lymphoblasts were exposed to maytansine concentrations from 10-6 M to 10-10 M for 18 hrs. Aliquots of cells were removed for cell cycle analysis by flow microfluorometry (FMF) (5) and also processed for transmission electron microscopy (TEM). FMF analysis of cells treated with 10-8 M maytansine showed a reduction in the number of G1 cells and a corresponding build-up of cells with G2/M DNA content.


Author(s):  
L.S. Cutler

Many studies previously have shown that the B-adrenergic agonist isoproterenol and the a-adrenergic agonist norepinephrine will stimulate secretion by the adult rat submandibular (SMG) and parotid glands. Recent data from several laboratories indicates that adrenergic agonists bind to specific receptors on the secretory cell surface and stimulate membrane associated adenylate cyclase activity which generates cyclic AMP. The production of cyclic AMP apparently initiates a cascade of events which culminates in exocytosis. During recent studies in our laboratory it was observed that the adenylate cyclase activity in plasma membrane fractions derived from the prenatal and early neonatal rat submandibular gland was retractile to stimulation by isoproterenol but was stimulated by norepinephrine. In addition, in vitro secretion studies indicated that these prenatal and neonatal glands would not secrete peroxidase in response to isoproterenol but would secrete in response to norepinephrine. In contrast to these in vitro observations, it has been shown that the injection of isoproterenol into the living newborn rat results in secretion of peroxidase by the SMG (1).


Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document