Measurement of the formatonof menthol glucuronide in vitro, by reversed-phase high-performance liquid chromatography after pre-column labeling with 4-bromomethyl-7-methoxycoumarin

Objective: Sarasvata ghrita (SG) is a polyherbal formulation in Ayurvedic Indian medicinal system, in which ghee is the main ingredient used for extraction. Ghee is 100% lipid, thus its regular use is limited, and there is a lack of quality control profile of SG. Thus, the objective of the study is to develop quality control method for standardization of SG and to analyze manufacturing process of SG and an effective method of extraction to extract phytoconstituents from herbs used in SG to overcome the limitation of SG.Methods: SG was processed as per the traditional method, whereas ethanolic extract (EE) and hydroalcoholic extract (HAE) were obtained by the conventional method and lipid-based extract (LE) was prepared by modern extraction method. SG and all extracts were standardized using newly developed high-performance liquid chromatography (LC) with respect to bebeerine, piperine, 6-shogaol, β-asarone, and chebulinic acid. All extracts were analyzed for pesticides, and heavy metal content by LC/mass spectrometry (MS/MS) and inductively coupled plasma/MS, respectively, screened for total polyphenols and flavonoids content, in vitro antioxidant potential, and for assessing its stability over time.Results: The better extraction was observed with maceration extraction using ethanol compared to ayurvedic method and LE method. All extracts were found to have a negligible amount of pesticide and heavy metals and found to be stable for 6 months under accelerated storage condition. Better polyphenols and flavonoid content and in vitro antioxidant potential were resulted in EE.Conclusion: EE showed a better potential in comparison with SG and LE.

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Efecto citotóxico de fosfolipasas A2 del veneno de Crotalus durissus cumanensis de Colombia

Revista Investigación en Salud Universidad de Boyacá ◽

10.24267/23897325.194 ◽

2017 ◽

Vol 4 (1) ◽

pp. 16

Author(s):

Juan Carlos Quintana-Castillo ◽

Isabel Cristina Ávila-Gómez ◽

Juan Felipe Ceballos-Ruiz ◽

Leidy Johana Vargas-Muñoz ◽

Sebastián Estrada-Gómez

Keyword(s):

High Performance Liquid Chromatography ◽

Liquid Chromatography ◽

High Performance ◽

Reversed Phase ◽

Rp Hplc ◽

Palabras Clave ◽

Crotalus Durissus ◽

Crotalus Durissus Cumanensis

Introducción. Los venenos de serpientes representan una fuente importante de proteínas y péptidos, los cuales exhiben diversas actividades biológicas, tales como antibacterianas, antiparasitarias, antivirales, antitumorales, antifúngicas y contra la agregación plaquetaria, entre otras. Las fosfolipasas A2 presentes en los venenos de serpientes son las proteínas más estudiadas en estos modelos. Se ha demostrado que las fosfolipasas A2, activas e inactivas, poseen actividad catalítica contra células tumorales. Objetivo. Aislar, purificar y caracterizar la fosfolipasa A2 del veneno de Crotalus durissus cumanensis para evaluar su actividad antitumoral in vitro. Materiales y métodos. El aislamiento, la purificación y la identificación de la crotoxina B se hizo mediante la cromatografía de exclusión molecular, la cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa (Reversed Phase High-Performance Liquid Chromatography, RP-HPLC) y la espectrometría de masas. El efecto citotóxico sobre células tumorales (K562) y células normales (células mononucleares de sangre periférica) se determinó utilizando la técnica de MTT. Resultados. La separación y posterior identificación de la crotoxina B del veneno de C. d. cumanensis de Colombia, permitieron evidenciar que esta fosfolipasa A2 posee efecto citotóxico sobre las células mononucleares de sangre periférica con una dosis de 18,23 ± 0,57 μg/ml, mientras que, para las células K562, fue de 2,34 ± 0,199 μg/ml. Conclusiones. Los resultados sugieren la posibilidad de utilizar la crotoxina B aislada del veneno de C. d. cumanensis como un posible recurso terapéutico para su aplicación en humanos. Palabras clave: Crotalus durissus cumanensis; citotoxicidad; fosfolipasas A2; crotoxina B.

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