scholarly journals Unstable association in vitro between donor and recipient DNA in Bacillus subtilis

1982 ◽  
Vol 152 (1) ◽  
pp. 275-283
Author(s):  
J Van Randen ◽  
K Wiersma ◽  
G Venema
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Bacillus Subtilis ◽  
Gradient Centrifugation ◽  
Cross Linking ◽  
Dna Fragments ◽  
Dna Complexes ◽  
Cscl Gradient ◽  
Donor Moiety

In addition to stable donor-recipient DNA complexes, unstable complexes between donor and recipient DNA were formed in vitro with Bacillus subtilis. Whereas the stable complexes survived CsCl gradient centrifugation at pH 11.2 and phenol plus sodium p-aminosalicylate extraction with 0.17 M NaCl, the unstable complexes dissociated during these manipulations. The donor moiety from the unstable complexes remained associated with the recipient DNA during phenol plus sodium p-aminosalicylate treatment at 0.85 M NaCl. The unstable complexes could be stabilized artificially by cross-linking with 4,5',8-trimethylpsoralen. Dissociation of the complexes during CsCl gradient centrifugation could be prevented by centrifuging at pH 10. Heterologous DNA fragments derived from phage H1 DNA appeared to be unable to form complexes with the recipient B. subtilis DNA. Unstable complexes were also formed with Escherichia coli DNA, although under all conditions tested, more complex was detectable by using homologous B. subtilis DNA.

scholarly journals MOLECULAR FATE OF HETEROLOGOUS BACTERIAL DNA IN COMPETENT BACILLUS SUBTILIS. I. PROCESSING OF B. PUMILUS AND B. LICHENIFORMIS DNA IN B. SUBTILIS

Genetics ◽  
1982 ◽  
Vol 101 (2) ◽  
pp. 179-188
Author(s):  
Hein P J te Riele ◽  
Gerard Venema
Keyword(s):  
Bacillus Subtilis ◽  
Dna Synthesis ◽  
Gradient Centrifugation ◽  
Single Strand ◽  
Bacterial Dna ◽  
Cscl Gradient ◽  
Donor Moiety ◽  
Three Components

ABSTRACT Competent Bacillus subtilis cells were exposed to radioactive and density labeled donor DNA extracted from B. pumilus and B. licheniformis. The DNA from these strains hybridized with B. subtilis DNA in vitro at a rate of 24% and 11%, respectively. After entry the vast majority of heterologous DNA was found at the single-strand DNA position in CsCl gradients, and was gradually degraded during incubation. Much less donor DNA than expected from the hybridization values participated in the formation of the donorrecipient complex (DRC). By subjecting the heterologous DRC to sonication and alkaline CsCl gradient centrifugation, it was established that the DRC consisted of three components: (1) recipient DNA in which breakdown products of donor DNA were incorporated through DNA synthesis, (2) recipient DNA in which donor DNA was covalently integrated and (3) recipient DNA in which the donor moiety was not covalently integrated.

In vitro packaging of a λ Dam vector containing EcoRI DNA fragments of Escherichia coli and phage P1

Gene ◽  
1977 ◽  
Vol 1 (3-4) ◽  
pp. 255-280 ◽  
Author(s):  
Nat Sternberg ◽  
David Tiemeier ◽  
Lynn Enquist
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Dna Fragments

scholarly journals Polyurethane Microstructures-a Good or Bad in vitro Partner for the Isoflavone Genistein?

2015 ◽  
Vol 10 (6) ◽  
pp. 1934578X1501000 ◽  
Author(s):  
Corina Danciu ◽  
Florin Borcan ◽  
Codruta Soica ◽  
Istvan Zupko ◽  
Erzsébet Csányi ◽  
...  
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Staphylococcus Aureus ◽  
Pseudomonas Aeruginosa ◽  
Bacillus Subtilis ◽  
Candida Albicans ◽  
Salmonella Enteritidis ◽  
Practical Application ◽  
Preliminary Study ◽  
Micro Structures

In recent years polyurethane microstructures (PM) have gained increasing attention in the pharmaceutical field due to the importance of their practical application. Since finding that such a formulation with genistein could improve its applications, we have conducted a preliminary study regarding the in vitro antiproliferative (MCF7, MDA-MB-231 and T47D) and antimicrobial ( Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis (D), Bacillus subtilis, B. cereus, and Candida albicans) activity in order to test whether polyurethane micro structuresre present a good option for further modulation of genistein's bioavailability. It was concluded that the polyurethane micro structures are a bad in vitro partner for the isoflavone genistein.

scholarly journals Binding Affinity, Cellular Uptake, and Subsequent Intracellular Trafficking of the Nano-Gene Vector P123-PEI-R13

2016 ◽  
Vol 2016 ◽  
pp. 1-8
Author(s):  
Yaguang Zhang ◽  
Hongmei Shu ◽  
Jing Hu ◽  
Min Zhang ◽  
Junweng Wu ◽  
...  
Keyword(s):  
Molecular Weight ◽  
Cellular Uptake ◽  
Intracellular Trafficking ◽  
Transfection Efficiency ◽  
Cross Linking ◽  
Low Molecular Weight ◽  
Gene Vector ◽  
Dna Complexes ◽  
Dynamic Source

A nano-gene vector PEI-P123-R13 was synthesized by cross-linking low molecular weight PEI with P123 and further coupling bifunctional peptide R13 to the polymer for targeting tumor and increasing cellular uptake. The binding assessment of R13 toαvβ3 positive cells was performed by HRP labeling. The internalization pathways of P123-PEI-R13/DNA complexes were investigated based on the effect of specific endocytic inhibitors on transfection efficiency. The mechanism of intracellular trafficking was investigated based on the effect of endosome-lysosome acidification inhibitors, cytoskeleton, and dynein inhibitors on transfection efficiency. The results indicated that the bifunctional peptide R13 had the ability of binding toαvβ3 positive cellsin vitro. The modification of P123-PEI-R13 with R13 made it display new property of internalization. P123-PEI-R13/DNA complexes were conducted simultaneously via clathrin-mediated endocytosis, caveolin-mediated endocytosis, macropinocytosis, and possible energy-independent route. After internalization, P123-PEI-R13/DNA complexes could escape from the endosome-lysosome system because of its acidification and further took microtubule as the track and dynein as the dynamic source to be transported toward the microtubule (+) end, to wit nucleus, under the action of microfilament, and with the aid of intermediate filament.

A Study of 3-Substituted Benzylidene-1,3-dihydro-indoline Derivatives as Antimicrobial and Antiviral Agents

2009 ◽  
Vol 64 (3-4) ◽  
pp. 155-162 ◽  
Author(s):  
Süreyya Ölgen ◽  
Semiha Özkan
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Staphylococcus Aureus ◽  
Bacillus Subtilis ◽  
Klebsiella Pneumoniae ◽  
Antiviral Agents ◽  
Candida Krusei ◽  
Mueller Hinton ◽  
Antibacterial And Antifungal ◽  
Ampicillin Trihydrate

3-Substituted benzylidene-1,3-dihydro-indoline derivatives were tested for their in vitro antibacterial activity against the Gram-negative bacteria Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, and the Gram-positive bacteria Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, and for their their in vitro antifungal activity against Candida krusei and Candida albicans. The minimum inhibitory concentration (MIC) values were determined by the 2-fold serial dilution technique in Mueller Hinton broth and Sabouraud dextrose agar using antibacterial and antifungal assays, respectively. For comparison of the antimicrobial activity, rifampicin, ampicillin trihydrate, gentamicin sulfate, and ofloxacin were used as reference antibacterial agents, and fl uconazole and amphotericin B were employed as reference antifungal agents. The most active compound 10 showed notable inhibition against Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, and Candida krusei. Compounds 1 and 6 were found slightly effective against Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli. In addition, compounds 13 and 14 showed inhibition against Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus. Indole derivatives were also tested in vitro for replication of the HepAD38 cell line and compared with lamivudine (3TC, L-2′,3′-dideoxy-3′-thiacytidine). The IC50 values of the compounds were found to be >1000 μM against HBV except for compound 13 which exhibited activity with an IC50 value of 500 μM.

scholarly journals Biosynthesis of respiratory-tract mucins. Incorporation of radioactive precursors into glycoproteins by canine tracheal explants in vitro

1973 ◽  
Vol 136 (4) ◽  
pp. 837-844 ◽  
Author(s):  
Daniel B. Ellis ◽  
Glenn H. Stahl
Keyword(s):  
Density Gradient Centrifugation ◽  
Gradient Centrifugation ◽  
Deae Cellulose ◽  
Sialic Acids ◽  
Equilibrium Density ◽  
Agarose Gels ◽  
Cscl Gradient ◽  
Tracheal Explants

1. Canine tracheal explants, cultured in medium 199, actively incorporated radioactive precursors into secreted macromolecules in vitro. 2. Puromycin, 6-diazo-5-oxo-l-norleucine and ouabain markedly inhibited the incorporation of these precursors. 3. Exogenous glucosamine at concentrations above 20mm caused a greater than 50% inhibition of the incorporation of l-[G-3H]fucose and l-[U-14C]serine. 4. Carbohydrate content of the purified secretions was approximately 50% and consisted principally of galactose, N-acetylglucosamine, N-acetylgalactosamine, fucose and sialic acids. 5. Chromatography on DEAE-cellulose and Bio-Gel A-150m and equilibrium density-gradient centrifugation in a CsCl gradient confirmed the presence of mucous glycoproteins. 6. Electrophoresis on 1% agarose gels gave profiles that were identical with canine respiratory mucus obtained in vivo. 7. These results support the utility of the explant system for studies of respiratory secretions.

scholarly journals Composición química del aceite esencial de Petroselinum crispum (Mill) Nyman ex A.W. Hill “perejil” y determinación de su actividad antibacteriana

2012 ◽  
Vol 15 (2) ◽  
pp. 78-83
Author(s):  
Reider Vivanco T ◽  
Enrique León S ◽  
Américo Castro L ◽  
Norma J Ramos C
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Staphylococcus Aureus ◽  
Pseudomonas Aeruginosa ◽  
Bacillus Subtilis ◽  
Staphylococcus Epidermidis ◽  
Petroselinum Crispum

El estudio tuvo como objetivo analizar la composición química del aceite esencial de las hojas de Petroselinum crispum (Mill) Nyman ex A.W. Hill “perejil” y determinar su actividad antibacteriana. El aceite esencial se obtuvo tratando 20 kg de hojas frescas con un equipo de destilación por arrastre con vapor de agua; obteniéndose cuatro mililitros y un rendimiento de 0,02 por ciento v/p. En el análisis cualitativo se analizó su solubilidad en solventes orgánicos; los componentes químicos se determinaron por cromatografía de Gases/ Espectrometría de Masas (CG/EM), lográndose la elucidación de los siguientes compuestos: 1R-α-pineno, β-pineno, β-felandreno, p, α-dimetil estireno, (E)-2-caren-4-ol, 1,3-benzodioxol, 4-metoxi-6-(2-propenil)-, y 1,3-benzodioxol,4,7-dimetoxy-5-(2-propenil)-. La determinación de la actividad antibacteriana in vitro, se realizó por el método de difusión en agar, demostrándose actividad significativa frente a Staphylococcus aureus ATCC 25933 y Staphylococcus epidermidis cepa clínica, a las concentraciones de 100 y 50 por ciento; y para Pseudomonas aeruginosa ATCC 2783 a la concentración de 100 por ciento, teniendo de poca a ninguna actividad frente a Bacillus subtilis y Escherichia coli. Los resultados obtenidos muestran que el aceite esencial de Petroselinum crispum (Mill) Nyman ex A.W. Hill “perejil” presenta actividad antibacteriana.

scholarly journals ВИЗНАЧЕННЯ АНТИМІКРОБНОЇ АКТИВНОСТІ БЕДРИНЦЮ ЛОМИКАМЕНЕВОГО ЕКСТРАКТУ ГУСТОГО

2019 ◽  
pp. 104-110
Author(s):  
E. A. Parashchuk ◽  
N. I. Tkachuk ◽  
S. M. Marchyshyn ◽  
H. R. Kozyr
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Staphylococcus Aureus ◽  
Pseudomonas Aeruginosa ◽  
Bacillus Subtilis ◽  
Candida Albicans ◽  
E Coli

Мета роботи. Визначення антимікробної активності бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракту густого. Матеріали і методи.  Oб’єктoм для дoслідження обрано бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракт густий (БЕГ-1, одержаний екстрагуванням 75 % етанолом і БЕГ-2, екстрагент 85 % етанол). В якості тест-культур використовували 5 музейних штамів: грампозитивні мікроорганізми Staphylococcus aureus АТСС 6538, спорову культуру Bacillus subtilis АТСС 6633, грамнегативну культуру Escherichia coli АТСС 25922 та Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027. Антифунгальну дію з’ясовували відносно Candida albicans АТСС 885-653. Бактеріостатичні властивoсті дoсліджуваних oб’єктів встанoвлювали за результатами росту еталонних штамів мікроорганізмів у нативному водному розчині бедринцю та в розведені 1:2 та 1:4 в м'ясо-пептонному бульйоні; бактерицидні – за відсутністю росту вмісту пробірок із розведенням екстракту на щільних пoживних середoвищах (м’ясо-пептонний агар – МПА) для грампозитивних мікроорганізмів S. aureus, B. subtilis, для грамнегативної культури E. coli, P. аeruginosa. Агар Сабуро використовували для дріжджеподібних грибів роду Candida (C. аlbicans). Результати й обговорення. Бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракт густий має широкий спектр антибактеріальної активності. Нативний екстракт БЕГ-1 по відношенню до тест-штамів S. aureus, B. subtilis, C. аlbicans проявляв бактерицидну дію. Бактеріостатичну дію він проявляв до P. aeruginosa, а по відношенню до E. coli антимікробного ефекту не виявлено. Екстракти в розведені 1:2 та 1:4 проявили бактерицидну дію відносно B. subtilis, бактеріостатичну – до S. aureus, C. albicans і не виявлено протимікробної дії до E. coli та P. aeruginosa. Нативний зразок БЕГ-2 по відношенню до усіх досліджуваних 5 тест–штамів проявив бактерицидну активність; у розведені 1:2 та 1:4 проявляв бактерицидну та бактеріостатичну дію відносно S. aureus, B. subtilis, C. albicans. Антимікробна дія по відношенню до E. coli та P. aeruginosa не виявлена. Антимікрoбну активність нативного бедринцю ломикаменевого екстракту густого також вивчали у дoслідах in vitro методом дифузії в агар –  метод “колодязів”. Штами S. aureus, C. albicans, B. subtilis, P. aeruginosa, E. coli проявили чутливість до нативного бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракту густого. Грампозитивні бактеріальні штами S. aureus,а також гриби C. albicans, B. subtilis є найбільш чутливими до  БЕГ-2, а БЕГ-1 проявляв порівняно меншу чутливість. Грамнегативні культури P. aeruginosa та E. coli також проявили помірну чутливість до  БЕГ-1, але значно більшу чутливість до БЕГ-2. Висновки. 1. Експериментально встановлено, що обидва досліджувані зразки бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракту густого проявляють антибактеріальну активність. 2. Бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракт густий проявляв більш виражену антимікробну активність по відношенню до грампозитивної мікрофлори, тому є перспективним для створення лікарського засобу з антимікробними властивостями.

Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document