Heterologous expression in Bacillus subtilis II. In vitro removal of the attenuator sequence of the Escherichia coli his operon allows expression of the cloned hisG gene in B. subtilis

Gene ◽  
1986 ◽  
Vol 47 (2-3) ◽  
pp. 279-286
Author(s):  
M. Buvoli ◽  
G. Damiani ◽  
L. Ferretti ◽  
A. Testori ◽  
V. Sgaramella
1982 ◽  
Vol 152 (1) ◽  
pp. 275-283
Author(s):  
J Van Randen ◽  
K Wiersma ◽  
G Venema

In addition to stable donor-recipient DNA complexes, unstable complexes between donor and recipient DNA were formed in vitro with Bacillus subtilis. Whereas the stable complexes survived CsCl gradient centrifugation at pH 11.2 and phenol plus sodium p-aminosalicylate extraction with 0.17 M NaCl, the unstable complexes dissociated during these manipulations. The donor moiety from the unstable complexes remained associated with the recipient DNA during phenol plus sodium p-aminosalicylate treatment at 0.85 M NaCl. The unstable complexes could be stabilized artificially by cross-linking with 4,5',8-trimethylpsoralen. Dissociation of the complexes during CsCl gradient centrifugation could be prevented by centrifuging at pH 10. Heterologous DNA fragments derived from phage H1 DNA appeared to be unable to form complexes with the recipient B. subtilis DNA. Unstable complexes were also formed with Escherichia coli DNA, although under all conditions tested, more complex was detectable by using homologous B. subtilis DNA.


2015 ◽  
Vol 10 (6) ◽  
pp. 1934578X1501000 ◽  
Author(s):  
Corina Danciu ◽  
Florin Borcan ◽  
Codruta Soica ◽  
Istvan Zupko ◽  
Erzsébet Csányi ◽  
...  

In recent years polyurethane microstructures (PM) have gained increasing attention in the pharmaceutical field due to the importance of their practical application. Since finding that such a formulation with genistein could improve its applications, we have conducted a preliminary study regarding the in vitro antiproliferative (MCF7, MDA-MB-231 and T47D) and antimicrobial ( Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis (D), Bacillus subtilis, B. cereus, and Candida albicans) activity in order to test whether polyurethane micro structuresre present a good option for further modulation of genistein's bioavailability. It was concluded that the polyurethane micro structures are a bad in vitro partner for the isoflavone genistein.


2009 ◽  
Vol 64 (3-4) ◽  
pp. 155-162 ◽  
Author(s):  
Süreyya Ölgen ◽  
Semiha Özkan

3-Substituted benzylidene-1,3-dihydro-indoline derivatives were tested for their in vitro antibacterial activity against the Gram-negative bacteria Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, and the Gram-positive bacteria Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, and for their their in vitro antifungal activity against Candida krusei and Candida albicans. The minimum inhibitory concentration (MIC) values were determined by the 2-fold serial dilution technique in Mueller Hinton broth and Sabouraud dextrose agar using antibacterial and antifungal assays, respectively. For comparison of the antimicrobial activity, rifampicin, ampicillin trihydrate, gentamicin sulfate, and ofloxacin were used as reference antibacterial agents, and fl uconazole and amphotericin B were employed as reference antifungal agents. The most active compound 10 showed notable inhibition against Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, and Candida krusei. Compounds 1 and 6 were found slightly effective against Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli. In addition, compounds 13 and 14 showed inhibition against Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus. Indole derivatives were also tested in vitro for replication of the HepAD38 cell line and compared with lamivudine (3TC, L-2′,3′-dideoxy-3′-thiacytidine). The IC50 values of the compounds were found to be >1000 μM against HBV except for compound 13 which exhibited activity with an IC50 value of 500 μM.


2012 ◽  
Vol 15 (2) ◽  
pp. 78-83
Author(s):  
Reider Vivanco T ◽  
Enrique León S ◽  
Américo Castro L ◽  
Norma J Ramos C

El estudio tuvo como objetivo analizar la composición química del aceite esencial de las hojas de Petroselinum crispum (Mill) Nyman ex A.W. Hill “perejil” y determinar su actividad antibacteriana. El aceite esencial se obtuvo tratando 20 kg de hojas frescas con un equipo de destilación por arrastre con vapor de agua; obteniéndose cuatro mililitros y un rendimiento de 0,02 por ciento v/p. En el análisis cualitativo se analizó su solubilidad en solventes orgánicos; los componentes químicos se determinaron por cromatografía de Gases/ Espectrometría de Masas (CG/EM), lográndose la elucidación de los siguientes compuestos: 1R-α-pineno, β-pineno, β-felandreno, p, α-dimetil estireno, (E)-2-caren-4-ol, 1,3-benzodioxol, 4-metoxi-6-(2-propenil)-, y 1,3-benzodioxol,4,7-dimetoxy-5-(2-propenil)-. La determinación de la actividad antibacteriana in vitro, se realizó por el método de difusión en agar, demostrándose actividad significativa frente a Staphylococcus aureus ATCC 25933 y Staphylococcus epidermidis cepa clínica, a las concentraciones de 100 y 50 por ciento; y para Pseudomonas aeruginosa ATCC 2783 a la concentración de 100 por ciento, teniendo de poca a ninguna actividad frente a Bacillus subtilis y Escherichia coli. Los resultados obtenidos muestran que el aceite esencial de Petroselinum crispum (Mill) Nyman ex A.W. Hill “perejil” presenta actividad antibacteriana.


Author(s):  
E. A. Parashchuk ◽  
N. I. Tkachuk ◽  
S. M. Marchyshyn ◽  
H. R. Kozyr

Мета роботи. Визначення антимікробної активності бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракту густого. Матеріали і методи.  Oб’єктoм для дoслідження обрано бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракт густий (БЕГ-1, одержаний екстрагуванням 75 % етанолом і БЕГ-2, екстрагент 85 % етанол). В якості тест-культур використовували 5 музейних штамів: грампозитивні мікроорганізми Staphylococcus aureus АТСС 6538, спорову культуру Bacillus subtilis АТСС 6633, грамнегативну культуру Escherichia coli АТСС 25922 та Pseudomonas aeruginosa АТСС 9027. Антифунгальну дію з’ясовували відносно Candida albicans АТСС 885-653. Бактеріостатичні властивoсті дoсліджуваних oб’єктів встанoвлювали за результатами росту еталонних штамів мікроорганізмів у нативному водному розчині бедринцю та в розведені 1:2 та 1:4 в м'ясо-пептонному бульйоні; бактерицидні – за відсутністю росту вмісту пробірок із розведенням екстракту на щільних пoживних середoвищах (м’ясо-пептонний агар – МПА) для грампозитивних мікроорганізмів S. aureus, B. subtilis, для грамнегативної культури E. coli, P. аeruginosa. Агар Сабуро використовували для дріжджеподібних грибів роду Candida (C. аlbicans). Результати й обговорення. Бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракт густий має широкий спектр антибактеріальної активності. Нативний екстракт БЕГ-1 по відношенню до тест-штамів S. aureus, B. subtilis, C. аlbicans проявляв бактерицидну дію. Бактеріостатичну дію він проявляв до P. aeruginosa, а по відношенню до E. coli антимікробного ефекту не виявлено. Екстракти в розведені 1:2 та 1:4 проявили бактерицидну дію відносно B. subtilis, бактеріостатичну – до S. aureus, C. albicans і не виявлено протимікробної дії до E. coli та P. aeruginosa. Нативний зразок БЕГ-2 по відношенню до усіх досліджуваних 5 тест–штамів проявив бактерицидну активність; у розведені 1:2 та 1:4 проявляв бактерицидну та бактеріостатичну дію відносно S. aureus, B. subtilis, C. albicans. Антимікробна дія по відношенню до E. coli та P. aeruginosa не виявлена. Антимікрoбну активність нативного бедринцю ломикаменевого екстракту густого також вивчали у дoслідах in vitro методом дифузії в агар –  метод “колодязів”. Штами S. aureus, C. albicans, B. subtilis, P. aeruginosa, E. coli проявили чутливість до нативного бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракту густого. Грампозитивні бактеріальні штами S. aureus,а також гриби C. albicans, B. subtilis є найбільш чутливими до  БЕГ-2, а БЕГ-1 проявляв порівняно меншу чутливість. Грамнегативні культури P. aeruginosa та E. coli також проявили помірну чутливість до  БЕГ-1, але значно більшу чутливість до БЕГ-2. Висновки. 1. Експериментально встановлено, що обидва досліджувані зразки бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракту густого проявляють антибактеріальну активність. 2. Бедринцю ломикаменевого підземних органів екстракт густий проявляв більш виражену антимікробну активність по відношенню до грампозитивної мікрофлори, тому є перспективним для створення лікарського засобу з антимікробними властивостями.


2012 ◽  
pp. 2861-2869
Author(s):  
Julián Martínez G ◽  
Carlos Garcia P ◽  
Diego Durango R ◽  
Jesús Gil G

RESUMENObjetivo. Determinar las características fisicoquímicas y la actividad antimicrobiana de propóleos de Apis mellifera, provenientes del municipio de Caldas, obtenidos por dos métodos de recolección. Materiales y métodos. Se utilizaron dos métodos de recolección: de raspado y trampa plastica. Se estableció el contenido de cera, ceniza, material insoluble y resina de los propóleos crudos. Al extracto etanólico de los propóleos se les determinó el perfil cromatográfico (GC-MS) y el espectro UV; además, se evaluó la actividad antimicrobiana in vitro frente a hongos (Aspergillus sp., Penicillium sp., Colletotrichum acutatum y C. gloesporioides), y bacterias (Salmonella tiphy, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus y Escherichia coli). Resultados. El material obtenido mediante malla matrizada presentó un perfil químico amplio, buena actividad antimicrobiana y mejores parámetros de calidad, de acuerdo con estándares establecidos por normas internacionales que los propóleos obtenidos por el método de raspado. Además, pudo observarse que la acción antimicrobiana de los propóleos fue dependiente de la concentración del extracto y del hongo o bacteria evaluada. Conclusiones. La composición química y la actividad antibacteriana y antifúngica de los propóleos están relacionadas con el método de recolección. El presente estudio aporta información para la selección de la técnica de cosecha del propóleo de acuerdo con la aplicación que se desee dar.


2021 ◽  
Vol 10 (9) ◽  
pp. e22610918051
Author(s):  
Soraya Castro Trindade ◽  
Jurandi Nery Pereira-Filho ◽  
Laerte Oliveira Barreto Neto ◽  
Thais Brito de Oliveira Moura ◽  
Antonio Pedro Fróes de Farias ◽  
...  

As espécies do gênero Lippia (Verbenaceae) possuem diversas moléculas bioativas, oriundas do seu metabolismo secundário, que apresentam atividade antimicrobiana, analgésica, antifúngica e imunomoduladora. Este estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana in vitro do extrato metanólico das folhas de L. alnifolia, L. origanoides, L. insignis e L. thymoides frente a microrganismos de importância clínica.  Foi realizada uma triagem fitoquímica dos extratos das plantas e a avaliação da atividade antimicrobiana pelo método de difusão em disco, além da determinação da concentração inibitória mínima (MIC) frente às bactérias Bacillus subtilis, Escherichia coli, Micrococcus luteus, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Salmonella choleraesuis, e os fungos Candida albicans e Candida glabrata. A presença de saponinas, terpenos, esteroides, cumarinas, ácidos fenólicos e flavonoides foi observada na análise fitoquímica. Os extratos metanólicos das folhas de L. alnifolia, L. origanoides e L. insignis apresentaram atividade antimicrobiana contra todas os microrganismos testados. O extrato metanólico da L. thymoides apresentou atividade antimicrobiana frente aos microrganismos M. luteus, P. aeruginosa, S. aureus, C. albicans e C. glabrata. A maioria dos extratos apresentou atividade bacteriostática e todos os extratos apresentaram atividade fungistática para C. albicans e fungicida para C. glabrata. A utilização dos extratos de Lippia pode ser uma alternativa viável no tratamento de doenças infecciosas de origem bacteriana e fúngica.


Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document