Данные крупных проспективных исследований демонстрируют корреляционную связь уровня С-реактивного белка (СРБ) в крови и риска
развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий. Однако остаются малоизученными уровень экспрессии СРБ клетками пери-
ферической крови и их способность синтезировать СРБ.
Цель исследования. Определение уровней экспрессии СРБ циркулирующими клетками периферической крови. Исследование экспрессии
мРНК СРБ макрофагами, полученными из моноцитов периферической крови.
Материал и методы. Исследовали эритроциты, тромбоциты и лейкоциты периферической крови 6 добровольцев в возрасте от 30 до 60 лет.
Для идентификации фенотипа клеток крови применяли метод проточной цитофлюориметрии с использованием панели моноклональных ан-
тител, конъюгированных с различными флюорохромами, а именно CD235a-PE-Cy7, CD41-APC, CD45-PerCP-Cy5.5 и CD14-APC-Cy-7. Уровень
экспрессии клетками крови СРБ определяли по уровню флюоресценции связанных с целевыми клетками FITC-конъюгированных моноклональ-
ных антител к СРБ («ИМТЕК», Россия). Для определения мРНК СРБ применяли метод количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР)
с последующим анализом специфичности амплификаций с помощью электрофореза в агарозном геле. Об экспрессии СРБ макрофагами,
полученными из моноцитов периферической крови, судили по количеству мРНК, выделенной после их активации липополисахаридом (ЛПС).
Результаты. Результаты исследования показали, что СРБ экспрессируют 85,0±10,5% моноцитов; лимфоциты, тромбоциты и эритроци-
ты — 7,5±0,6, 3,0±0,3 и 4,3±0,5% соответственно. Методом количественной ПЦР в небольших количествах мРНК СРБ была зарегистри-
рована в макрофагах, активированных ЛПС. Ее уровень незначительно, в 0,79±0,73 раза (p=0,96, n=6), отличался относительно гена
«домашнего хозяйства».
Заключение. Обнаружено, что СРБ присутствует на внешней клеточной мембране до 90% циркулирующих моноцитов и до 10% лимфо-
цитов, в то время как эритроциты и тромбоциты не несут на своей поверхности СРБ. Установлена возможность синтеза СРБ стимулиро-
ванными ЛПС макрофагами, полученными из моноцитов периферической крови.
Data from major prospective studies demonstrate a correlation between blood C-reactive protein (CRP) levels and the risk of adverse cardiovascular
events. However, the level of expression of CRP by peripheral blood cells and their ability to synthesize CRP remains poorly studied.
The purpose of the study. Determination of CRP expression levels by circulating peripheral blood cells. Investigation of expression of CRP mRNA by
macrophages obtained from peripheral blood monocytes.
Material and methods. erythrocytes, platelets and leukocytes of peripheral blood were studied in 6 volunteers aged 30 to 60 years.
To identify the blood cell phenotype, the method of flow cytofluorimetry was used using a panel of monoclonal antibodies conjugated with
different fluorophores, namely, CD235a-PE-Cy7, CD41-APC, CD45-PerCP-Cy5.5 and CD14-APC-Cy-7. Blood cell expression level of CRP was
determined by fluorescence level of FITC-conjugated monoclonal antibodies to CRP associated with target cells (IMTEK, Russia). The method of
quantitative polymerase chain reaction (PCR) with the subsequent analysis of specificity of amplifications by electrophoresis in agarose gel was used
for determination of mRNA of CRP. The expression of DRR by macrophages derived from peripheral blood monocytes was judged by the amount of
mRNA isolated after their activation by lipopolysaccharide (LPS).
The results. The results of the study showed that CRP express 85.0±10.5% monocytes, lymphocytes, platelets and red blood cells — 7.5±0.6,
3.0±0.3 and 4.3±0.5% respectively. The method of quantitative PCR in small amounts of CRP mRNA was registered in macrophages activated by
LPS. Its level was insignificant, by 0.79±0.73 times (p=0.96, n=6), differed from the "household" gene.
Conclusion. It was found that CRP is present on the outer cell membrane up to 90% of circulating monocytes and up to 10% of lymphocytes, while
red blood cells and platelets do not carry CRP on their surface. The possibility of synthesis of CRP by stimulated LPS macrophages obtained from
peripheral blood monocytes has been established
Modification of the Method for Determining Myeloperoxidase in Blood Neutrophils
