Συνδυασμός αντιβιοτικών με μεταλλικά ιόντα σε μια ενιαία οντότητα για στοχευμένη θεραπεία στον καρκίνο του μαστού

Mapping Intimacies ◽

10.12681/eadd/49610 ◽

2021 ◽

Author(s):

Μαρία Χρυσούλη

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Staphylococcus Epidermidis ◽

Artemia Salina ◽

E Coli ◽

Ft Ir ◽

Cetrimonium Bromide ◽

Mcf 7

Συντέθηκε και χαρακτηρίστηκε πλήρως το νέο μεταλλοθεραπευτικό Ph2Sn(CIP)2 (CIPTIN) (HCIP = σιπροφλοξασίνη) από την αντίδραση του εμπορικά διαθέσιμου αντιβιοτικού υδροχλωριωμένη σιπροφλοξασίνη (HCIP·HCl) με το άλας του διφαινυλοδιχωροκασσιτέρου (Ph2SnCl2 DPTD). Επίσης απομονώθηκε και λύθηκε η κρυσταλλική δομή του εσωτερικού άλατος της σιπροφλοξασίνης (HCIP). Στη συνέχεια, με σκοπό να ενισχυθεί η υδατοδιαλυτότητα και κατ’ επέκταση η βιολογική δράση και η βιοδιαθεσιμότητα του CIPTIN και του DPTD, παρασκευάστηκαν τα μικκύλια SLS@CIPTIN, CTAB@CIPTIN, SLS@DPTD και CTAB@DPTD (SLS = sodium lauryl sulphate and CTAB = cetrimonium bromide).Το νέο μεταλλοθεραπευτικό χαρακτηρίστηκε σε στερεά κατάσταση με μελέτη της περίθλασης ακτίνων Χ (XRD), ανάλυση της περίθλασης ακτίνων Χ κόνεως (XRPD), φασματοσκοπία φθορισμού ακτίνων Χ (XRF), φασματοσκοπία υπερύθρου (FT-IR), φασματοσκοπία 119Sn Mössbauer, θερμική ανάλυση (TG / DTA), διαφορική θερμιδομετρία σάρωσης (DSC), μελέτη του σημείου τήξεως και σε υγρή κατάσταση με φασματοσκοπία υπεριώδους-ορατού (UV-VIS), φασματοσκοπία πυρηνικού μαγνητικού συντονισμού πρωτονίου (1Η-NMR) και με φασματοσκοπία μάζας ιοντικού ηλεκτροψεκασμού (ESI-MS). Ο χαρακτηρισμός των μικκυλίων πραγματοποιήθηκε με μελέτη του σημείου τήξεως, με φασματοσκοπία φθορισμού ακτίνων Χ, υπερύθρου, 119Sn Mössbauer, πυρηνικού μαγνητικού συντονισμού πρωτονίου, με θερμική ανάλυση και με διαφορική θερμιδομετρία σάρωσης. Η αντιπολλαπλασιαστική δράση του CIPTIN και των μικκυλίων SLS@CIPTIN, CTAB@CIPTIN, SLS@DPTD και CTAB@DPTD, μελετήθηκε έναντι των ανθρώπινων καρκινικών κυτταρικών σειρών του μαστού: MCF-7 (εκφράζουν οιστρογονικούς υποδοχείς) και MDA-MB-231 (δεν εκφράζουν οιστρογονικούς υποδοχείς). Η τοξικότητα των ενώσεων ελέγχθηκε in vitro έναντι φυσιολογικών κυττάρων MRC-5 και in vivo με το ζωικό μοντέλο Artemia Salina, ενώ η πιθανή γονοτοξικότητα ελέγχθηκε in vitro με μελέτη των μικροπυρηνίσκων και in vivo με τη βοήθεια του μοντέλου Allium cepa. Οι μελέτες της μορφολογίας των κυττάρων, του κυτταρικού κύκλου και του κατακερματισμού του πυρηνικού DNA που πραγματοποιήθηκαν σε κύτταρα MCF-7 μετά την επώασή τους με τις ενώσεις που συντέθηκαν και αποδεικνύουν ότι οι νέες ενώσεις προκαλούν κυτταρικό θάνατο μέσω απόπτωσης. Ταυτόχρονα, οι μελέτες της διαπερατότητας της μιτοχονδριακής μεμβράνης αποκάλυψαν ότι οι νέες ενώσεις προκαλούν απόπτωση μέσω της επίδρασής τους στα μιτοχονδριακά μονοπάτια των κυττάρων. Επιπλέον, μελετήθηκε η αλληλεπίδραση των ενώσεων με το DNA, καθώς και η αντιμικροβιακή δράση των νέων ενώσεων έναντι των βακτηριακών στελεχών Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus (S. aureus) και Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis), με προσδιορισμό της ελάχιστης ανασταλτικής συγκέντρωσης (MIC), της ελάχιστης βακτηριοστατικής συγκέντρωσης (MBC), των ζωνών αναστολής (IZs) και της επίδρασης των ενώσεων στο σχηματισμό βακτηριακού βιοφίλμ. Τέλος, διερευνήθηκε η σχέση μεταξύ της αντικαρκινικής και της αντιμικροβιακής δράσης που επιδεικνύουν οι βιοδραστικές ενώσεις.

Download Full-text

Determinación de la cinética, pruebas de crecimiento y efecto de inhibición in vitro de Lactobacillus casei en Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae y Escherichia coli

Revista de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia ◽

10.15446/rfmvz.v62n2.51992 ◽

2015 ◽

Vol 62 (2) ◽

Author(s):

Henry Jurado-Gámez ◽

Manuel Gúzman-Insuasty

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Streptococcus Agalactiae ◽

Staphylococcus Epidermidis ◽

Lactobacillus Casei ◽

E Coli

Se determinó la cinética, pruebas de crecimiento y el efecto de inhibición in vitro de Lactobacillus casei sobre Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae y Escherichia coli. Se usaron cepas de casa comercial y cepas aisladas en la Vereda La Victoria, Corregimiento de Catambuco al suroccidente del municipio de Pasto, Nariño, Colombia. Se evaluó el efecto de los antibióticos Dicloxacilina, Cefepima, Cefalotina, Ciprofloxacina, Gentamicina, Penicilina, Trimetropim Sulfa y Ampicilina. Se evaluó la inhibición producida por L. casei y su sobrenadante sobre las bacterias patógenas. El crecimiento de la bacteria láctica se evaluó con tres niveles de pH (2,5, 4,5 y 7), tres concentraciones de sales biliares (0,5, 1 y 2%) y dos de bilis bovina (1 y 1,2%), y dos temperaturas (38 y 45°C). Igualmente se determinó la cinética de crecimiento y las variables pH, azúcar total, proteína y ácido láctico. Mediante HPLC se determinaron los péptidos y los ácidos orgánicos presentes en el sobrenadante. L. casei mostró susceptibilidad a la Ciprofloxacina y Ampicilina, mientras que S. aureus mostró susceptibilidad y resistencia a todos los antibióticos para la cepa comercial y aislada respectivamente, el mismo comportamiento se presentó con S. epidermidis. Las cepas de S. agalactiae y E. coli aisladas y comerciales mostraron susceptibilidad a los antibióticos. La cepa láctica mostró un efecto de inhibición de S. aureus, S. epidermidis y S. agalactiae, pero no fue efectiva con E. coli, igual comportamiento se observó con el uso del sobrenadante de la bacteria láctica. Se encontró crecimiento de 1 x 1010 y 5,1 x 107 UFC/ml para 1 y 1,2 % de bilis bovina; 2,3 x 107, 1 x 109 y 3 x 108 UFC/ml para 0,5, 1 y 2 % de sales biliares respectivamente; 1,1 x 1011, 2,0 x 1010 y 1,0 x 1010 UFC/ml para pH de 2,5, 4,5 y 7 respectivamente. La fase exponencial se encontró a 16:48 horas con un crecimiento de 3 x 1010 UFC/ml. La variables pH, azúcar, acidez y proteína durante la fase exponencial fueron de 4,94, 0,88 mg/l, 2,89 mg/l y 1,9 mg/l, respectivamente. La prueba de HPLC para péptidos mostró la presencia de una cadena VAL-TIR-VAL y para ácidos orgánicos se encontró una producción de 83,46% de ácido láctico. L. casei mostró buenas características probiótica que permitirían su aplicación en ensayos in vivo para el control de microorganismos causantes de mastitis subclínica en vacas.

Download Full-text

Evaluation du potentiel antimicrobien et de la toxicité des extraits de Jatropha multifida Linn, (Euphorbiaceae)

Journal of Applied Biosciences ◽

10.35759/jabs.151.4 ◽

2020 ◽

Vol 151 ◽

pp. 15550-15558

Author(s):

Amégninou Agban ◽

Yao Hoekou ◽

Passimna Pissang ◽

Tchadjobo Tchacondo ◽

Komlan Batawila

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Antimicrobial Activity ◽

Candida Albicans ◽

Aqueous Extract ◽

E Coli ◽

Toxicological Studies ◽

Jatropha Multifida

Objectif : L’objectif de ce travail était d’évaluer in vitro l’activité antimicrobienne des extraits de feuilles et tige de Jatropha multifida sur la croissance de Candida albicans, Escherichia coli et Staphylococcus aureus, puis d’évaluer in vivo la toxicité de cette plante. Méthodologie et résultats : Les méthodes de diffusion en milieu gélosé et de microdilution en milieu liquide ont été utilisées pour évaluer l’effet antimicrobien. Une étude en subaigüe était réalisée afin d’explorer les effets toxiques de l’extrait aqueux des feuilles. Les résultats des tests antimicrobiens montrent une activité des extraits de feuilles et tige de J. multifida sur la croissance des souches utilisées avec des diamètres de zones d’inhibition allant de 8 à 25 mm et des concentrations minimales inhibitrices (CMI) variant de 0,039 mg/mL à 1,25 mg/mL à l’exception des souches de E. coli qui sont résistantes aux extraits de la tige. L’administration en subaigüe de l’extrait aqueux des feuilles de J. multifida à la dose de 600 mg/kg entraîne une perte significative de poids chez les souris. Conclusion et applications des résultats : Les extraits aqueux, éthanolique et hydroéthanolique des feuilles et tige de J. multifida possèdent d’activité antimicrobienne et pourraient être utilisés dans le traitement des Candidoses à C. albicans et des infections à S. aureus. Mais l’essai de toxicité subaigüe montre que l’extrait aqueux de la plante serait toxique. Des études toxicologiques approfondies restent donc nécessaires sur ces extraits afin de mieux élucider leur inocuité. Mots-clés : Jatropha multifida, extraits de feuilles et de tige, activités antifongique et antibactérienne, toxicité. Agban et al., J. Appl. Biosci. 2020 Evaluation du potentiel antimicrobien et de la toxicité des extraits de Jatropha multifida Linn, (Euphorbiaceae) 15551 Evaluation of antimicrobial potential and toxicity of Jatropha multifida Linn, (Euphorbiaceae) extracts ABSTRACT Objective: The objective of this study was to evaluate in vitro the antimicrobial activity of leaves and stem of Jatropha multifida extracts against Candida albicans, Escherichia coli and Staphylococcus aureus, and then to evaluate in vivo the toxicity of this plant. Methodology and Results: The agar well-diffusion and the NCCLS broth microdilution methods were used to assess the antimicrobial effect. A subacute study was carried out to explore the toxic effects of the aqueous extract of the leaves. The results of the antimicrobial tests show an activity of the extracts of leaves and stems of J. multifida on the growth of the strains used with diameters of inhibitory zones ranging from 8 to 25 mm and minimum inhibitory concentrations (MIC) varying from 0.039 mg/mL to 1.25 mg/mL exception E. coli strains which are resistant to extracts from the stem. Subacute administration of the aqueous extract of the leaves of J. multifida at a dose of 600 mg/kg leads to a significant loss of weight in the mice. Conclusion and application of findings : The aqueous, ethanolic and hydroethanolic extracts of the leaves and stem of J. multifida have antimicrobial activity and could be used in the treatment of Candidiasis and bacterial infections due respectively to C. albicans and S. aureus. But the subacute toxicity test shows that the aqueous extract of the plant would be toxic. Extensive toxicological studies therefore remain necessary on these extracts in order to better elucidate their safety. Keywords: Jatropha multifida extracts of leaves and stem, antifungal and antibacterial activities, toxicity

Download Full-text

Actividad antibacteriana in vitro de aceites esenciales de diferentes especies del género Citrus

Revista Colombiana de Ciencias Químico Farmacéuticas ◽

10.15446/rcciquifa.v46n2.67934 ◽

2017 ◽

Vol 46 (2) ◽

Cited By ~ 2

Author(s):

Miladys Esther Torrenegra Alarcón ◽

Nerlis Paola Pájaro ◽

Glicerio León Méndez

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Pseudomonas Aeruginosa ◽

Klebsiella Pneumoniae ◽

Staphylococcus Epidermidis ◽

E Coli

Se evaluó la actividad antibacteriana in vitro de aceites esenciales de diferentes especiesdel género Citrus frente a cepas ATCC de Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis,Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli, determinandola concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida(CMB). Las bacterias se replicaron en medios de agar y caldos específicos. Se determinóel momento de máxima densidad óptica (DO620) para emplearlo como tiempode incubación; luego se hicieron pruebas de evaluación de sensibilidad con la exposiciónde las cepas a concentraciones a 1000 g/mL del extracto en caldo. Para solubilizarse empleó dimetilsulfóxido (DMSO) al 1%. Posteriormente, se le determinó laconcentración mínima inhibitoria mediante metodologías de microdilución en caldoy la concentración mínima bactericida. Encontrándose una actividad de los aceitesesenciales del género Citrus, con valores de CMI ≥ 600 mg/mL frente a S. aureus,S. epidermidis, K. pneumoniae, P. aeruginosa y E. coli. En función a los resultados obtenidos,se concluye que las diferentes especies del género Citrus son consideradas comopromisorias para el control del componente bacteriano.

Download Full-text

Χημικά τροποποιημένα παράγωγα στεροειδών

10.12681/eadd/47615 ◽

2020 ◽

Author(s):

Μαρία-Ελένη Σταθοπούλου

Keyword(s):

Cholic Acid ◽

Allium Cepa ◽

1H Nmr ◽

Artemia Salina ◽

Sulforhodamine B ◽

119Sn Nmr ◽

Ft Ir ◽

Mcf 7

Συντέθηκαν, χαρακτηρίστηκαν και μελετήθηκε η βιολογική δράση πέντε νέων οργανοκασσιτερικών παραγώγων του χολικού οξέος (cholic acid, CAH). Τα σύμπλοκα 1-5 χαρακτηρίστηκαν με σημείο τήξης, φασματοσκοπίες υπερύθρου (FT-IR), 119Sn Mössbauer, πυρηνικού μαγνητικού συντονισμού πρωτονίου, άνθρακα και κασσιτέρου (1H-,13C-,119Sn-NMR), υπεριώδους ορατού (UV-Vis) και φθορισμού ακτίνων Χ (XRF), καθώς και με τις φασματομετρίες μάζας ιοντικού ηλεκτροψεκασμού (ESI-MS) και υψηλής ανάλυσης (HR-MS), με ανάλυση περίθλασης ακτίνων Χ και με ατομική απορρόφηση. Οι μοριακοί τους τύποι είναι οι Ph3Sn(CA) (1), n-Bu3Sn(CA) (2), Ph2Sn(CA)2 (3), n-Bu2Sn(CA)2 (4) και Me2Sn(CA)2 (5). Επιπλέον ελέγχθηκε η σταθερότητα τους σε διάλυμα με φασματοσκοπία UV-Vis και 1H-NMR. Το χολικό οξύ προσδένεται στον κασσίτερο μέσω της καρβοξυλομάδας. Οι αναλογίες χολικού οξέος/κασσιτέρου στα σύμπλοκα είναι 1:1 (1-2) και 2:1 (3-5). Επιπλέον η γεωμετρία γύρω από το άτομο του κασσιτέρου (Sn) είναι τριγωνική διπυραμίδα για το 1, τετραεδρική για το 2, ενώ τα 3-5 εμφανίζουν οκταεδρική γεωμετρία. Τα σύμπλοκα 1-5 είναι σταθερά σε διάλυμα για χρονικό διάστημα μιας εβδομάδας. Για τον έλεγχο της εκλεκτικής αντικαρκινικής τους δράσης ενάντια στον καρκίνο του μαστού, βρέθηκαν οι τιμές IC50 μέσω της μεθόδου Sulforhodamine B (SRB) σε δύο καρκινικές κυτταρικές σειρές του μαστού: την MCF-7, η οποία εκφράζει υποδοχείς ορμονών, και την MDA-MB-231, όπου απουσιάζουν οι υποδοχείς ορμονών. Όλα τα σύμπλοκα έδειξαν αντικαρκινική δράση, με εξαίρεση το 5. Επιπλέον τα 1-2 έδειξαν εκλεκτική δράση έναντι των κυττάρων MCF-7, και επομένως εκλεκτικότητα έναντι του καρκίνου του μαστού θετικού σε υποδοχείς ορμονών. Το 3 έδειξε εκλεκτικότητα έναντι των κυττάρων MDA-MB-231. Όλα τα σύμπλοκα είναι 4.2-166.9 φορές πιο δραστικά από τη cisplatin έναντι των δυο καρκινικών κυτταρικών σειρών. Επιπλέον τα τρι-οργανοκασσιτερικά σύμπλοκα 1-2 έχουν καλύτερη δράση από τα δι-οργανοκασσιτερικα 3-4. Η τοξικότητά τους ελέγχθηκε in vitro στους φυσιολογικούς ινοβλάστες MRC-5, όπου τα σύμπλοκα εμφάνισαν μεγαλύτερες τιμές IC50 σε σχέση με τις καρκινικές κυτταρικές σειρές. Τα 2 και 3 έχουν καλύτερο θεραπευτικό δείκτη και άρα μειωμένη τοξικότητα, ενώ όλα τα σύμπλοκα έχουν μικρότερη τοξικότητα συγκριτικά με τη cisplatin και τα οργανοκασσιτερικά χλωρίδια. Επιπλέον η τοξικότητά τους ελέγχθηκε και in vivo στον ζωντανό οργανισμό Artemia salina όπου βρέθηκε να μην είναι τοξικά σε συγκεντρώσεις 1.3-25.6 φορές μεγαλύτερες των τιμών IC50 των συμπλόκων. Για την εκτίμηση της γονοτοξικότητας τους χρησιμοποιήθηκε η μέθοδος των μικροπυρήνων, in vitro, και ο ζωντανός οργανισμός Allium cepa, in vivo. Τα σύμπλοκα δεν εμφάνισαν γονοτοξικότητα τόσο in vitro όσο και in vivo στις τιμές IC50, και επιπλέον σε συγκεντρώσεις 1.3-25.6 φορές μεγαλύτερες των τιμών αυτών in vivo. Τέλος, ελέγχθηκε ο μοριακός μηχανισμός δράσης των 1-5 εναντίον του ενζύμου της λιποξυγονάσης (μιτοχόνδριο), του λινελαϊκού οξέος (μεμβράνες) και της πρόσδεσής τους στο DNA (πυρήνας). Τα 1-5 δεν αναστέλλουν το ένζυμο της λιποξυγονάσης, ωστόσο οξειδώνουν το λινελαϊκό προς υπερόξο-λινελαϊκό οξύ και επομένως στοχεύουν τις μεμβράνες. Δευτερευόντως θα μπορούσαν να προσδένουν στο DNA, καθώς δεσμεύονται ασθενώς σε αυτό.

Download Full-text

Análise fitoquímica, toxicidade, potencial antioxidante e atividade antibacteriana da Ceiba speciosa (A.St.-Hil.) Ravenna

Revista Fitos ◽

10.17648/2446-4775.2019.641 ◽

2019 ◽

Vol 13 (1) ◽

pp. 9

Author(s):

Pâmela Milene Dos Santos Braga ◽

Izabel Bárbara Barcelos ◽

Richard Da Silva Pereira Calazans ◽

Alexandra Luiza Silva Bulian ◽

Josiane Cezar Rodrigues Gabler ◽

...

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Artemia Salina ◽

E Coli ◽

Shigella Spp

O presente estudo realizou a prospecção fitoquímica e avaliou a toxicidade aguda, o potencial antioxidante e a atividade antibacteriana das flores da Ceiba speciosa. A triagem dos metabólitos foi realizada por reações colorimétricas, a toxicidade foi avaliada in vitro por meio do teste de letalidade frente ao microcrustáceo Artemia salina, a atividade antioxidante pelo sequestro de radicais livres, utilizando o radical sintético 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH) e a atividade antimicrobiana pela difusão em disco frente às bactérias Escherichia coli, Shigella spp. e Staphylococcus aureus. Os resultados indicaram a presença de flavonoides e saponinas, observou-se a ausência da toxicidade das amostras (DL50=1.067 ug/mL) e a positividade para a atividade antioxidante (EC50=56,7 mg/mL). Em relação à atividade antibacteriana, as soluções hidrometanólicas a 80% (80:20, v/v) apresentaram efeito nas quatro maiores concentrações (100 mg/mL, 50 mg/mL, 25 mg/mL, 12,5 mg/mL) para as cepas de E. coli e Shiguela spp., e para o S. aureus o mesmo ocorreu a partir de 25 mg/mL. Concluiu-se sobre a ausência de toxicidade, positividade para o efeito antioxidante e atividade antibacteriana para as soluções hidrometanólicas. Sugere-se a continuidade das investigações para exploração do potencial biológico das flores de Ceiba speciosa, que pode constituir-se em uma alternativa como recurso terapêutico.

Download Full-text

Determinación de la cinética, pruebas de crecimiento y efecto de inhibición in vitro de Lactobacillus lactis en Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae y Escherichia coli

Revista de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia ◽

10.15446/rfmvz.v62n2.51993 ◽

2015 ◽

Vol 62 (2) ◽

Author(s):

Henry Jurado-Gámez ◽

Manuel Gúzman-Insuasty ◽

V. Jarrín-Jarrín

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Streptococcus Agalactiae ◽

Staphylococcus Epidermidis ◽

E Coli ◽

Lactobacillus Lactis

Se determinó la cinética, pruebas de crecimiento y efecto de inhibición in vitro de Lactobacillus lactis sobre las bacterias patógenas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae y Escherichia coli. Los análisis fueron realizados en el laboratorio de microbiología de la Facultad de Ciencias Pecuarias de la Universidad de Nariño. Las cepas patógenas fueron evaluadas por duplicado, la primera con el uso de cepas de referencia y las segundas, cepas aisladas de la región de Nariño, Colombia. Se determinó la inhibición de los antibióticos Gentamicina, Penicilina, Ciprofloxacina, Dicloxacilina, Cefepime, Cefalotina, Trimetropin Sulfa y Ampicilina mediante la metodología de kirby bauer. Se determinó la inhibición de L. lactis y el sobrenadante sobre todas las bacterias patógenas. Se evaluó el crecimiento de la bacteria láctica a 3 concentraciones de sales biliares (0,5, 1 y 2%) y 2 concentraciones de bilis bovina (1 y 1,2%); 3 pH (2, 4,5 y 7) y 2 temperaturas (38 y 45 °C). Se determinó la fase exponencial de crecimiento de la bacteria láctica y las variables cinéticas pH, azúcar, acidez y proteína. Se analizaron los péptidos presentes en el sobrenadante y la producción de ácidos orgánicos mediante HPLC. Se encontraron los microorganismos S. aureus, S. epidermidis, S. agalactiae y E. coli en leche de vacas con mastitis subclínica en la región de Nariño, Colombia; las cepas fueron aisladas para su análisis. Se encontró susceptibilidad de las cepas de referencia a los anbitióticos evaluados y resistencia de las cepas aisladas. Se observó que únicamente la cepa de referencia de S. aureus fue resistente a la bacteria láctica; ambas cepas de S. agalactiae presentaron resistencia; mientras que S. epidermidis y E. coli mostraron susceptibilidad. Se encontró que el sobrenadante inhibe en mayor proporción a las bacterias patógenas de referencia; mientras que las aisladas posee mayor resistencia. La cepa láctica tuvo un crecimiento de 0 y 5 x 109 UFC/ml a concentraciones de 1 y 1,2%; mientras que con sales biliares se encontró crecimiento únicamente a 0,5% (5 x 108 UFC/ml). La prueba de pH indicó crecimientos de 1,4 x 1012, 6,4 x 1011 y 7,5 x 1011 para pH 2, 4,5 y 7 respectivamente y la temperatura, 2,8 x 1012 y 3,1 x 1012 UFC/ml para 38 y 45°C. Durante la fase exponencial se encontraron valores de: 2 x 1011 UFC/ml a las 14:48 horas; 4,29 de pH, 0,62% de acidez, 2,18 mg/l de azúcar y 0,279 mg/l de proteína. Las pruebas de HPLC indicaron la presencia del péptido VAL-TIRL-VAL y 82,9% de ácido láctico. L. lactis posee características in vitro adecuadas para inhibir cepas patógenas presentes en leche con mastitis subclínica de la región de Nariño, Colombia.

Download Full-text

In vitro synergistic potentials of novel antibacterial combination therapies against Salmonella Typhimurium, Escherichia coli and Staphylococcus aureus

10.21203/rs.2.9511/v1 ◽

2019 ◽

Author(s):

Md Akil Hossain ◽

Hae-Chul Park ◽

Kwang-jick Lee ◽

Sung-Won Park ◽

Seung-Chun Park ◽

...

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Phenolic Compounds ◽

Phenolic Compound ◽

Virulence Factors ◽

In Vitro Cytotoxicity ◽

E Coli ◽

And Staphylococcus Aureus

Abstract Background: Bacteria have remarkable abilities to acquire resistance against antibiotics by several mechanisms. New strategies are needed to block the development of resistance and to prolong the life of traditional antibiotics. This study aimed to increase the efficacy of existing antibiotics by combining them with the opportunistic phenolic compound gallic acid (GA) and its derivatives. Fractional inhibitory concentration (FIC) indexes of phenolic compound-antibiotic combinations against Salmonella enterica serovar Typhimurium, Escherichia coli and Staphylococcus aureus were determined. Based on the FIC indexes and clinical importance, 3 combinations were selected to evaluate their effects on the virulence factors of these bacteria. The in vitro cytotoxicity of GA and hamamelitannin in the Rattus norvegicus (IEC-6) cell line were evaluated. Results: Phenolic compounds demonstrated considerable antibacterial effects as the minimum inhibitory concentrations (MICs) of epigallocatechin, GA and hamamelitannin found against different strains were (32–1024), (128–1024) and (512–≥2048) μg/mL, respectively. The FIC indexes of the combined antibacterials against these strains were 0.281–1.016. The ultrastructural morphology and time-kill assays showed that the GA-ceftiofur combination, and hamamelitannin-erythromycin and GA-ampicillin combinations more efficiently inhibited the growth of S. Typhimurium and E. coli, respectively, compared to the individual antibiotics. Biofilm viability and the swimming and swarming motilities of S. Typhimurium in the presence of GA-ceftiofur and E. coli in the presence of the hamamelitannin-erythromycin and GA-ampicillin combinations were more competently inhibited than individual antimicrobials. The 50% inhibitory concentrations (IC50) of GA and hamamelitannin in IEC-6 cells were 564.55 μM and 988.54 μM, respectively. Conclusions: The phenolic compounds increase the efficacy of existing antibiotics might be by disrupting virulence factors. We can conclude that these antibacterial combinations are safe and can be potential medications to treat S. Typhimurium, E. coli and S. aureus infections in animals and humans. Further study to confirm this effect in in vivo system and to determine the precise mechanism of action should be undertaken to establish these combinations as medications.

Download Full-text

Experimental model of vaginal dysbiosis treatment with fraction of serum antimicrobial peptides

ZHurnal «Patologicheskaia fiziologiia i eksperimental`naia terapiia» ◽

10.25557/0031-2991.2019.03.141-147 ◽

2019 ◽

pp. 141-147

Author(s):

В.Г. Арзуманян ◽

А.М. Иксанова ◽

Т.А. Артемьева ◽

Л.М. Бутовченко ◽

Е.Т. Мальбахова

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Candida Albicans ◽

Antimicrobial Peptides ◽

Drug Treatment ◽

Bromocresol Purple ◽

E Coli ◽

In Vivo Experiments

Широкое использование антибиотиков и противогрибковых препаратов при лечении дисбиозов влагалища сопровождается появлением резистентных штаммов микроорганизмов. В этой связи актуальной является разработка новых препаратов, в частности, основанных на натуральных антимикробных пептидах (АМП), отличающихся более широким спектром действия и высокой активностью. Цель работы - изучение возможности использования сывороточных АМП в лечении вагинальных дисбиозов различной этиологии на мышиной модели. Методика. Активность АМП фракции сыворотки крови кролика оценивали в опытах in vitro и in vivo. В первом случае проверяли действие АМП на клетки Candida albicans, Escherichia coli и Staphylococcus aureus спектрофотометрическим методом. Данный метод основан на поглощении красителя бромкрезолового пурпурного клетками с нарушенной цитоплазматической мембраной и, как результат, снижении оптической плотности надосадочной жидкости в опытных вариантах по сравнению с контрольными. Во втором случае оценивали лечебный эффект концентрированного препарата сывороточных АМП на мышах, зараженных интравагинально теми же культурами. После заражения мышей пролечивали введением препарата тем же путем, а результат оценивали методом высевов из влагалища на селективные среды. Результаты. Установлено, что наиболее выраженное действие в опытах in vitro сывороточные АМП оказывали на клетки C. albicans (активность составила 32,9 % от контроля), тогда как менее выраженный эффект имел место в отношении E. coli (23,3 %) и S. aureus (14,4 %). Аналогичная закономерность имела место и в опытах in vivo: высев C. albicans после лечения препаратом АМП составил 44,6% от исходного в сравнении с 42,2% после лечения пимафуцином и 90,2% без лечения (плацебо); высев E. coli - 65,6% от исходного в сравнении с 26,3% после лечения метронидазолом и 94,8% в варианте плацебо; высев S. aureus - 76,9% от исходного в сравнении с 11,4% после лечения клиндамицином и 73,0% в варианте плацебо. Заключение. Наибольшей чувствительностью к сывороточным АМП среди изученных видов обладали клетки C. albicans, а наименьшей - S. aureus, причем как в опытах in vitro, так и in vivo. Препарат на основе АМП фракции сыворотки крови можно рассматривать как альтернативу традиционным препаратам при лечении вагинальных дисбиозов, особенно вульвовагинального кандидоза. Extensive use of antibiotics and antimycotics in the treatment of vaginal dysbiosis may result in emergence of resistant microbial strains. Therefore, development of new, broad-spectrum and highly active drugs, particularly based on antimicrobial peptides (AMP) is relevant. The aim of the present study was to evaluate a possibility of using serum AMP in the treatment of vaginal dysbiosis of different etiology on a murine model. Methods. Activity of the AMP fraction of rabbit serum was evaluated in in vitro and in vivo experiments. In the in vitro experiment, the effect of AMP on Candida albicans, Escherichia coli, and Staphylococcus aureus cells was measured spectrophotometrically. This method was based on uptake of the bromocresol purple stain by cytoplasmic membranes of destroyed cells, which resulted in decreased optical density of the supernatant in experimental variants compared to the control. In the in vivo experiments, the therapeutic effect of concentrated serum AMP was evaluated in mice intravaginally infected with the same microbial cultures. The infected mice were treated similarly with the AMP preparation, and the outcome was evaluated using the inoculation of plates with selective media by vaginal material. Results. The serum AMP fraction exerted the most noticeable effect in in vitro experiments on C. albicans cells (activity 32.9 % of control) vs. lower effects on E. coli (23.3 %) and S. aureus (14.4 %). Consistently in the in vivo experiments, the abundance of C. albicans colonies was 44.6% of the initial value after the AMP drug treatment compared to 42.2% after the pimafucin treatment and 90.2% in placebo. The abundance of E. coli colonies after the AMP drug treatment was 65.6% of the initial compared to 26.3% after the metronidazole treatment and 94.8% in placebo; for S. aureus, the abundance was 76.9% (AMP) compared to 11.4% (clindamycin) and 73.0% (placebo). Conclusion. Among the studied microorganisms, C. albicans had the highest susceptibility to serum AMP while S. aureus was the least susceptible both in in vitro and in vivo experiments. Drugs based on the serum AMP preparation may be considered as a possible alternative to traditional medications for the treatment of vaginal dysbiosis, especially for vulvovaginal candidiasis.

Download Full-text

AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK METANOL BATANG BIDARA LAUT (Strychnos ligustrina) TERHADAP BAKTERI PATOGEN

JURNAL BIOLOGI TROPIS ◽

10.29303/jbt.v19i1.1040 ◽

2019 ◽

Vol 19 (1) ◽

Author(s):

Edy Kurniawan ◽

Dwi Soelistya Dyah Jekti ◽

Lalu Zulkifli

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Antibacterial Activity ◽

Pathogenic Bacteria ◽

Inhibitory Concentration ◽

Methanol Extract ◽

Klebsiella Pneumonia ◽

E Coli

Abstract : Strychnos ligustrina stem has been empirically used by the people of West Nusa Tenggara and Bali in the treatment of malaria, tooth ache and diarrhea, but there is no scientific data that supports it. This study aims to determine and prove the antibacterial activity of Strychnos ligustrina methanol extract to pathogenic bacteria in vitro and in vivo. This research is an experimental study conducted by measuring the inhibition zone (mm) growth of pathogenic bacteria, determining minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum killing concentration (MKC) in vitro, and determining the percentage of antibacterial activity of methanol extract of S. ligustrina stem in vivo. The experiment was conducted using 4 groups of concentrations of S. ligustrina stem methanol extract in an in vitro study of 25, 50, 75, and 100% with ciprofloxacin as a positive control and aquadest as a negative control. In vivo studies experiments were carried out using 6 treatment groups of test animals male mice Balb / c (Mus musculus). The in vitro test results showed that methanol extract of S. ligustrina stems was able to inhibit the growth of pathogenic bacteria with medium categories of clinical isolates of Staphylococcus aureus and categories of weaks to Klebsiella pneumonia and Escherichia coli isolates. The minimum inhibitory concentration (MIC) for S. aureus and K. pneumonia bacteria isolates was at a concentration of 25% while for E. coli isolates at a concentration of 30%. The methanol extract of the S. ligustrina stem has no killing power against the pathogenic bacteria tested. Antibacterial activity in vivo was able to inhibit the growth of S. aureus pathogenic bacteria by 6.60% (at 25% concentration), 8.62% (at 50% concentration), and 17.31% (at 100% concentration), against K. pneumonia was 11.85% (at 25% concentration), 51.21% (at 50% concentration), and 65.92% (at 100% concentration), against E. coliat 19.18% (at concentration 25%), 29.98% (at 50% concentration), and 40.88% (at 100% concentration). Methanol extract of S. ligustrina stem proved to have antibacterial activity in vitro and in vivo. Key words: Srychnos ligustrina, pathogenic bacteria, antibacterial, in vitro, in Vivo. Abstrak : Strychnos ligustrina secara empiris telah digunakan oleh masyarakat Nusa Tenggara Barat dan Bali dalam pengobatan penyakit malaria, sakit gigi, dan diare, tetapi belum ada data ilmiah yang mendukung. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan dan membuktikan aktivitas antibakteri ekstrak metanol batang bidara laut terhadap bakteri patogen secara in vitrodan in vivo. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang dilakukan dengan mengukur zona hambat (mm) pertumbuhan bakteri patogen, menentukan konsentrasi hambat minimum (KHM) dan konsentrasi bunuh minimum (KBM) secara in vitro, serta menentukan persentase aktivitas antibakteri ekstrak metanol batang bidara laut secara in vivo. Percobaan dilakukan menggunakan 4 kelompok konsentrasi ekstrak metanol batang bidara laut pada penelitian in vitro yaitu 25, 50, 75, dan 100% dengan ciprofloxacin sebagai kontrol positif serta aquadest sebagai kontrol negatif. Pada penelitian in vivo percobaan dilakukan menggunakan 6 kelompok perlakuan hewan uji mencit jantan galur Balb/c (Mus musculus). Hasil uji in vitro menunjukkan ekstrak metanol batang bidara laut mampu menghambat pertumbuhan bakteri patogen dengan kategori sedang terhadap Staphylococcus aureus isolat klinis dan kategori lemah terhadap Klebsiella pneumonia dan Escherichia coli isolat klinis. Nilai konsentrasi hambat minimum (KHM) untuk isolat bakteri S. aureus dan K. pneumoniae adalah pada konsentrasi 25% sedangkan untuk isolat E. coli pada konsentrasi 30%. Ekstrak metanol batang bidara laut tidak memiliki daya bunuh terhadap bakteri patogen yang diuji. Aktivitas antibakteri secara in vivo mampu menghambat pertumbuhan bakteri patogen S. aureus sebesar 6,60% (pada konsentrasi 25%), 8,62% (pada konsentrasi 50%), dan 17,31% (pada konsentrasi 100%), terhadap K. pneumonia sebesar 11,85% (pada konsentrasi 25%), 51,21% (pada konsentrasi 50%), dan 65,92% (pada konsentrasi 100%), terhadap E. coli sebesar 19,18% (pada konsentrasi 25%), 29,98% (pada konsentrasi 50%), dan 40,88% (pada konsentrasi 100%). Ekstrak metanol batang bidara laut terbukti memiliki aktivitas antibakteri secara in vitro dan in vivo. Kata kunci: Srychnos ligustrina, bakteri patogen, antibakteri, in vitro, in vivo

Download Full-text

Σύνθεση συµπλόκων στοιχείων μετάπτωσης µε βιολογικής σηµασίας μόρια

10.12681/eadd/44051 ◽

2015 ◽

Author(s):

Αναστασία Γαλάνη

Keyword(s):

Escherichia Coli ◽

Staphylococcus Aureus ◽

Pseudomonas Aeruginosa ◽

Mcf 7

Το αντικείµενο της παρούσας διδακτορικής διατριβής αφορά την µελέτη συµπλόκων ενώσεων του χαλκού, του ψευδαργύρου, του µολυβδαινίου και του βαναδίου µε µόρια βιολογικής και φαρµακολογικής σηµασίας. Συγκεκριµένα µελετάται η σύνθεση, ο χαρακτηρισµός και η ταυτοποίηση συµπλόκων ενώσεων του χαλκού, ψευδαργύρου,µολυβδαινίου και βαναδίου µε τους υποκαταστάτες λεβοφλοξασίνη, 1.10-φαινανθρολίνη, 2.2΄-διπυριδίνη, καρνιτίνη, µαλονικό οξύ και καφεϊκό οξύ. Οι υποκαταστάτες αυτοί είναι σηµαντικοί διότι εµπλέκονται σε βιολογικές διεργασίες και έχουν φαρµακολογικές εφαρµογές. Τα προαναφερθέντα στοιχεία µετάπτωσης, είναι απαραίτητα για τον άνθρωπο και τα φυτά, συµµετέχοντας σε πολλές βιολογικές δράσεις. Οι κινολόνες είναι µια κατηγορία συνθετικών φαρµάκων, τα οποία είναι παράγωγα της 4-κινολόνης, και είναι γνωστά για την αντιβακτηριακή τους δράση κυρίως λόγω της παρεµπόδισης σχηµατισµού του δεοξυριβονουκλεικού οξέος. Στο πλαίσιο αυτό αναφέρεται η σύνθεση, η µελέτη και ο χαρακτηρισµός µε στοιχειακή ανάλυση και διάφορες φασµατοσκοπικές µεθόδους (IR, UV-Vis, EPR, NMR, TGA) των συµπλόκων ενώσεων της λεβοφλοξασίνης. Παρασκευάσθηκαν σύµπλοκες ενώσεις της τρίτης γενεάς φθοροκινολόνης, λεβοφλοξασίνης, παρουσία και µη υποκαταστατών δοτών ετεροκυκλικών ατόµων αζώτου όπως 2.2-διπυριδίνης και 1.10-φαινανθρολίνης. Σε ορισµένα από αυτά πραγµατοποιήθηκε η επίλυση της δοµής µε περίθλαση ακτίνων Χ. Μελετήθηκε περαιτέρω ο τρόπος αλληλεπίδρασης των συµπλόκων αυτώνµε DNA καθώς και η δράση τους έναντι τριών διαφορετικών µικροοργανισµών, των Escherichia Coli, Pseudomonas Aeruginosa και Staphylococcus Aureus. Πραγµατοποιήθηκε επίσης προσδιορισµός της κυτταροτοξικής τους δράσης έναντι της κυτταρικής σειράς, MCF-7. Περαιτέρω στα σύµπλοκα της λεβοφλοξασίνης µε τον ψευδάργυρο πραγµατοποιήθηκαν πειράµατα µικροσκοπικής φθορισµοµετρίας (confocal fluorescent). Η καρνιτίνη, είναι ένα µόριο που εµπλέκεται σε βιολογικές οξειδώσεις. Επιπλέον είναι γνωστή για την αντικαρκινική και αντιδιαβητικήτης δράση όπως και τα µόρια µαλονικό και καφεϊκό οξύ. Στο πλαίσιο αυτό αναφέρεται η σύνθεση, η µελέτη και ο χαρακτηρισµός µε στοιχειακή ανάλυση και διάφορες φασµατοσκοπικές µεθόδους (IR, UV-Vis, NMR, TGA) συµπλόκων ενώσεων των προαναφερθέντων υποκαταστατών. Σε ορισµένα από αυτά πραγµατοποιήθηκε επίλυση της κρυσταλλικής δοµής µε περίθλαση ακτίνων Χ. Περαιτέρω πραγµατοποιήθηκε προσδιορισµός της αντικαρκινικής και εν µέρει της αντιδιαβητικής τους δράσης in vitro και in vivo. Στα σύµπλοκα της καρνιτίνης πραγµατοποιήθηκαν επίσηςπειράµατα µικροσκοπικής φθορισµοµετρίας (confocal fluorescent).

Download Full-text