Anxiolytic Effect and Improved Sleep Quality in Individuals Taking Lippia citriodora Extract

The current fast-moving, hectic lifestyle has increased the number of individuals worldwide with difficulties in managing stress, which in turn is also affecting their sleep quality. Therefore, the objective of the current study was to assess a natural plant-based dietary supplement comprised of lemon verbena (Lippia citriodora) extract, purified in phenylpropanoids, in alleviating stress and improving quality of sleep. A double-blind, placebo-controlled study was conducted for 8 weeks, followed by a 4-week washout period. Both validated questionnaires and functional tests were performed during the study, whereas questionnaires were used after the washout. As a result, the group taking the lemon verbena extract significantly reduced their perception of stress after 8 weeks, which was corroborated by a significant decrease in cortisol levels. After the washout period, the subjects reported to present even lower stress levels, due to the lasting effect of the ingredient. As for sleep quality, the subjects taking the supplement reported feeling better rested, with a stronger effect observed in women. Sleep tracking using a wearable device revealed that the supplement users improved their times in the deeper stages of sleep, specifically their percentage of time in deep sleep and REM. In conclusion, lemon verbena extract purified in phenylpropanoids is revealed as a natural solution to help individuals to improve their stress and sleep quality.

Zmiany właściwości antyoksydacyjnych ekstraktów z liści werbeny cytrynowej (Lippia citriodora (Palau) Kunth) w trakcie przechowywania

Oznaczono zmiany zawartości polifenoli ogółem i aktywność antyoksydacyjną metodą z DPPH oraz FRAP ekstraktów: metanolowych, etanolowych, wodnych oraz acetonowych, otrzymanych z werbeny cytrynowej (Lippia citriodora (Palau) Kunth.) w czasie ich przechowywania (3, 6, 9 i 12 miesięcy). Największą zawartość polifenoli ogółem zanotowano w ekstrakcie metanolowym, najniższą zaś w wyciągu acetonowym. Ekstrakt metanolowy charakteryzował się największą aktywnością antyoksydacyjną, oznaczoną zarówno metodą z DPPH, jak i FRAP. Wydłużenie czasu przechowywania wszystkich ekstraktów, niezależnie od czynnika ekstrahującego, powodowało spadek zarówno zawartości polifenoli ogółem, jak i aktywności antyoksydacyjnej.

Effectiveness of a polyphenolic extract (Lippia citriodora and Hibiscus sabdariffa) on appetite regulation in overweight and obese grade I population: an 8-week randomized, double-blind, cross-over, placebo-controlled trial

Introduction Polyphenols have shown capacity to improve appetite sensation, leading to enhanced control of body weight. However, despite being related with hunger-related hormones, metabolic and mechanism are not well known. Methods The effectiveness of a nutraceutical composed of extract to Lippia citriodora and Hibiscus sabdarrifa (Lc-Hs) for controlling satiety and hunger was analyzed in a cross-over, placebo-controlled (Pla) clinical intervention. The study was divided in two 60-day periods separated by 30-day length wash-out period. At the end of each period, overweight and obese subjects (n = 33; age = 33.76 ± 12.23; BMI = 28.20 kg/m2 ± 2.47; fat mass 30.65 ± 8.39%; both sexes were proposed to eat an ad-libitum meal. Meanwhile, appetite sensation was determined by visual analog scales at different times. Moreover, blood extraction was performed to determine biochemical parameters (lipid and glucidic profile and safety parameters) and to evaluate hunger-related hormones (insulin, leptin, ghrelin, adiponectin, GLP-1 and peptide YY). Results A decrease in appetite sensation was observed in Lc-Hs treatment, showing higher satiety quotient (Pla = 3.36 ± 2.33%mm/kcal; Lc-Hs = 5.53 ± 2.91%mm/kcal; p < 0.0001). Area under the curve was higher in Pla compared to Lc-Hs during the test, from baseline to minute 240 (240 (Pla 9136.65 ± 2261.46% x min−1; Lc-Hs 8279.73 ± 2745.71% x min−1; p < 0.014). Energy consumption was lower for subjects treated with Lc-Hs (774.44 ± 247.77 kcal) compared to those treated with Pla (849.52 ± 246.54 kcal) (p < 0.004). Leptin values varied from baseline (Pla 12.36 ± 1.98 ng/mL; Lc-Hs 13.13 ± 1.99 ng/mL) to the end of the study (Pla 12.60 ± 2.02 ng/mL; Lc-Hs 12.06 ± 2.05 ng/mL; p < 0.047). GLP-1 values varied (p < 0.001) in Lc-Hs treatment from baseline (4.34 ± 0.49 ng/mL) to the end of the study (3.23 ± 0.52 ng/mL). Conclusion The supplementation with the Lc-Hs extract decreases appetite sensation in overweight and obese population, reducing calorie intake after an ad-libitum meal. Due to variation on hunger-related hormones and the relationship between satiety feeling, it would be interesting to develop future research focused on the variation of the hormones themselves.

Antitumor Potential of Lippia citriodora Essential Oil in Breast Tumor-Bearing Mice

Lippia citriodora is a flowering plant cultivated for its lemon-scented leaves and used in folk medicine for the preparation of tea for the alleviation of symptoms of gastrointestinal disorders, cold, and asthma. The oil extracted from the plant leaves was shown to possess antioxidant potential and to exert antiproliferative activity against breast cancer. The aim of this study was to further investigate potential antitumor effects of L. citriodora oil (LCO) on breast cancer. The in vitro antiproliferative activity of LCO was examined against murine DA3 breast cancer cells by the sulforhodamine B assay. We further explored the LCO’s pro-apoptotic potential with the Annexin-PI method. The LCO’s anti-migratory effect was assessed by the wound-healing assay. LCO was found to inhibit the growth of DA3 cells in vitro, attenuate their migration, and induce apoptosis. Finally, oral administration of LCO for 14 days in mice inhibited by 55% the size of developing tumors in the DA3 murine tumor model. Noteworthy, in the tumor tissue of LCO-treated mice the apoptotic marker cleaved caspase-3 was elevated, while a reduced protein expression of survivin was observed. These results indicate that LCO, as a source of bioactive compounds, has a very interesting nutraceutical potential.

Μελέτη αντιμικροβιακής δράσης φυσικών προϊόντων

Τελευταία, γίνεται προσπάθεια για τη δραστική μείωση ή και εξάλειψη των χημικών συντηρητικών από τα τρόφιμα και την αντικατάστασή τους από φυσικά συντηρητικά, όπως τα αιθέρια έλαια. Τα αιθέρια έλαια είναι σύνθετα μίγματα πτητικών δευτερογενών μεταβολιτών από φυτά, με σημαντική αντιμικροβιακή δράση. Στην παρούσα διατριβή, μελετήθηκε η αντιμικροβιακή δράση των αιθέριων ελαίων που απομονώθηκαν από φυτά της οικογένειας Lamiaceae και συγκεκριμένα των Origanum onites, Origanum dittamnus, Origanum vulgare ssp. hirtum (δύο χημειότυποι), Thymus capitatus, Satureja thymbra, Mentha spicata, Ocimum basilicum, Siseritis raeseri subsp. raeseri, της οικογένειας Anacardiaceae, (Pistacia lentiscus), της οικογένειας Apiaceceae (Pimpinella anisum), της οικογένειας Rutaceae (Citrus medica και Fortunella margarita) και της οικογένειας Verbenaceae (Lippia citriodora). Επίσης, μελετήθηκαν ως προς την αντιμικροβιακή τους δράση και ορισμένες από τις κύριες ενώσεις των αιθέριων ελαίων.Επιπλέον, τα στερεά υποπροϊόντα της υδροατμοαπόσταξης των Origanum onites, Origanum vulgare, Thymus capitatus και Satureja thymbra υποβλήθηκαν σε διαδοχική εκχύλιση Soxhlet με οξικό αιθυλεστέρα και αιθανόλη και τα εκχυλίσματα που ελήφθησαν μελετήθηκαν στη συνέχεια για πιθανή αντιμικροβιακή δράση. Επίσης, εξετάστηκαν τα υδατικά υπολείμματα υδροατμοαπόσταξης των Satureja thymbra, Pistacia lentiscus, Pimpinella anisum, Citrus medica, Mentha spicata, Ocimum basilicum, Lippia citriodora και Fortunella margarita. Η αντιμικροβιακή δράση των αιθέριων ελαίων, των εκχυλισμάτων και των υδατικών υπολειμμάτων μελετήθηκε αρχικά με τη δοκιμασία διάχυσης με χρήση δισκίων έναντι των κοινών αλλοιογόνων και τροφιμογενών παθογόνων μικροβιακών ειδών Salmonella Enteritidis, Salmonella Typhimurium, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Listeria monocytogenes, Pseudomonas fragi, Clostridium difficile, Saccharomyces cerevisiae και Aspergillus niger. Στη συνέχεια, προσδιορίστηκαν οι τιμές ελάχιστης ανασταλτικής συγκέντρωσης (Minimum inhibitory concentration, MIC) και μη ανασταλτικής συγκέντρωσης (Νon-inhibitory concentration, NIC), συνδυάζοντας τις μετρήσεις της οπτικής πυκνότητας με τη κοινή μέθοδο των αραιώσεων και τη μη γραμμική ανάλυση παλινδρόμησης (non-linear regression analysis), χρησιμοποιώντας το μοντέλο LPM.Το μοντέλο LPM δεν ήταν δυνατό να εφαρμοστεί στην περίπτωση των Saccharomyces cerevisiae και Aspergillus niger λόγω της καθίζησης των κυττάρων ζυμομύκητα και της επίπλευσης των κονιδίων του Aspergillus niger. Γι' αυτό, χρησιμοποιήθηκαν τα πρωτόκολλα που περιγράφονται από την Ευρωπαϊκή Επιτροπή (EUCAST) για τον προσδιορισμό των τιμών MIC των Saccharomyces cerevisiae και Aspergillus niger. Επίσης, προσδιορίστηκαν οι τιμές ελάχιστης βακτηριοκτόνου συγκέντρωσης (MBC) ή ελάχιστης θανατηφόρου συγκέντρωσης (MLC). Όλα τα αιθέρια έλαια εμφάνισαν αξιοσημείωτη αντιμικροβιακή δράση έναντι όλων των μικροβιακών ειδών που μελετήθηκαν, εκτός από το αιθέριο έλαιο Pistacia lentiscus, το οποίο δεν είχε δράση έναντι των Salmonella Enteritidis και Salmonella Typhimurium, το αιθέριο έλαιο Lippia citriodora που ήταν ενεργό μόνο έναντι gram (+) βακτηρίων και τα αιθέρια έλαια Fortunella margarita και Pimpinella anisum που είχαν αντιμικροβιακή δράση μόνο κατά των Saccharomyces cerevisiae και Aspergillus niger. Τα εκχυλίσματα που προέκυψαν από τα στερεά υποπροϊόντα των Origanum onites, Origanum vulgare, Thymus capitatus και Satureja thymbra εμφάνισαν μόνο αντιβακτηριακή δράση. Απεναντίας, τα υδατικά εκχυλίσματα Satureja thymbra, Pistacia lentiscus, Pimpinella anisum, Citrus medica, Mentha spicata, Ocimum basilicum, Lippia citriodora και Fortunella margarita δεν είχαν αντιμικροβιακή δράση. Αξίζει να σημειωθεί ότι τα αιθέρια έλαια ήταν πιο δραστικά από τα βασικά συστατικά τους, καθώς προσδιορίστηκαν σημαντικά χαμηλότερες τιμές MIC, NIC και MBC ή MLC. Τα εκχυλίσματα οξικού αιθυλεστέρα (EAc) και αιθανόλης (EtOH) και το υδατικό υπόλειμμα της υδροατμοαπόσταξης (Aq) του φυτού Satureja thymbra και το αιθέριο έλαιο Origanum vulgare spp. hirtum επιλέχθηκαν για περαιτέρω μελέτη ως πιθανά βιοσυντηρητικά σε τρόφιμα, καθώς έδειξαν σημαντικές αντιμικροβιακές ιδιότητες. Τα εκχυλίσματα Satureja thymbra ενσωματώθηκαν σε γαλακτώματα που προσομοιάζουν σάλτσες για σαλάτες (salad dressings), ενώ το αιθέριο έλαιο Origanum vulgare spp. hirtum σε γαλακτωμάτων που μπορούν να ενσωματωθούν σε τελικά προϊόντα, όπως ο χυμός τομάτας και μελετήθηκε η φυσική αλλοίωση των προϊόντων, καθώς και η ανασταλτική δράση κυτταρικής ανάπτυξης μετά από εσκεμμένη επιμόλυνση των γαλακτωμάτων με 2 log cfu/mL Listeria monocytogenes και του τοματοχυμού με 4 log cfu/mL Listeria monocytogenes, Clostridium difficile, Saccharomyces cerevisiae ή 10000 σπόρια/mL Aspergillus niger. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τόσο τα εκχυλίσματα, εκτός από το υδατικό όσο και το αιθέριο έλαιο Origanum vulgare spp. hirtum παρέτειναν το χρόνο ζωής των προϊόντων και κατέστειλαν την μικροβιακή ανάπτυξη μετά από σκόπιμη επιμόλυνση. Η ενσωμάτωση αιθέριου ελαίου Origanum vulgare spp. hirtum στον τοματοχυμό σε συγκέντρωση χαμηλότερη από την τιμή MIC ή μόνο ελαφρώς υψηλότερη από την τιμή NIC που προσδιορίστηκε για το C. difficile ήταν αρκετή για να καταστείλει την ανάπτυξη των σκόπιμα εμβολιασμένων μικροβίων, γεγονός που υποδηλώνει συνεργιστική δράση ανάμεσα στο αιθέριο έλαιο και τη χαμηλή θερμοκρασία συντήρησης. Οι μικροοργανισμοί πολύ συχνά αδυνατούν να ξεπεράσουν το συνδυασμό πολλών συστημάτων συντήρησης και ως εκ τούτου τα πολλαπλά εμπόδια μπορούν να οδηγήσουν σε ένα σταθερό και ασφαλές προϊόν χωρίς αλλοίωση των οργανοληπτικών χαρακτηριστικών. Επιπλέον, το μίγμα (Mix) των αιθέριων ελαίων Pistacia lentiscus και Fortunella margarita, καθώς και το υδατικό υπόλειμμα της υδροατμοπόσταξης του Fortunella margarita δοκιμάστηκε ως πιθανό βιοσυντηρητικό σε προϊόντα παγωτών και χυμών φρούτων. Στα παγωτά το αιθέριο έλαιο Pistacia lentiscus λειτούργησε ως πιθανό βιοσυντηρητικό ενώ το αιθέριο έλαιο Fortunella margarita, καθώς και το υδατικό υπόλειμμα της υδροατμοπόσταξης του Fortunella margarita χρησιμοποιήθηκαν ως βελτιωτικά γεύσης. Στους χυμούς, σαν βιοσυντηρητικά χρησιμοποιήθηκαν το αιθέριο έλαιο Pistacia lentiscus και το αιθέριο έλαιο Fortunella margarita ενώ το υδατικό υπόλειμμα της υδροατμοπόσταξης του Fortunella margarita ως βελτιωτικό γεύσης. Αρχικά, εξετάστηκε η φυσική αλλοίωση των προϊόντων και στη συνέχεια μελετήθηκε η αναστολή κυτταρικής ανάπτυξης μετά από σκόπιμη επιμόλυνση των παγωτών με 4 log cfu/mL Escherichia coli, Listeria monocytogenes, ή Pseudomonas fragi και των χυμών με 4 log cfu/mL Saccharomyces cerevisiae ή 100 σπόρια Aspergillus niger/mL. Τα αποτελέσματα έδειξαν σημαντική καθυστέρηση της αλλοίωσης των τροφίμων και επέκταση της διάρκειας ζωής των προϊόντων, καθώς και αναστολή κυτταρικής ανάπτυξης σε όλες τις περιπτώσεις. Η χρήση αιθέριων ελαίων μπορεί επομένως να θεωρηθεί ένας πρόσθετος εγγενής ανασταλτικός παράγοντας (εμπόδιο) ανάπτυξης για τη διασφάλιση της ασφάλειας των τροφίμων, ξεπερώντας τους περιορισμούς που σχετίζονται με την έντονη οσμή τους σε αποτελεσματικές δόσεις όταν προστίθενται σε περίπλοκα συστήματα τροφίμων. Τα αιθέρια έλαια των αρωματικών φυτών που μελετήθηκαν μπορούν να χρησιμοποιηθούν σαν βιοσυντηρητικά ή να αποτελέσουν σημαντικές πηγές αντιμικροβιακών παραγόντων χαμηλού κόστους που μπορούν να αξιοποιηθούν από την βιομηχανία τροφίμων.

Effects of Lippia citriodora Leaf Extract on Lipid and Oxidative Blood Profile of Volunteers with Hypercholesterolemia: A Preliminary Study

Lippia citriodora is a plant traditionally used for its anti-inflammatory, antioxidant and antispasmodic effects, as well as for additional biological activities proven in cell culture, animal studies and a small number of human clinical trials. The plant has also shown a marked improvement in blood lipid profile in some animal species. In the present preliminary study, we investigated the effect of a leaf extract on lipid and oxidative blood profile of hypercholesterolemic volunteers. Twelve adults received Lippia citriodora extract caps, containing 23% phenylpropanoids, (100 mg, once a day) for 16 weeks. Selected blood lipids and plasma oxidative markers were measured at baseline and after 4, 8 and 16 weeks of treatment. Compared with baseline, total cholesterol levels significantly decreased and high-density lipoprotein cholesterol increased, while low-density lipoprotein cholesterol and triglycerides showed only a downward trend. Oxidative status was improved due to a decrease in the concentration of total oxidant status, reactive oxygen metabolites and malondialdehyde, and a significant increase in ferric reducing ability of plasma, vitamin A and vitamin E. These preliminary results suggest that dietary supplementation with Lippia citriodora extract can improve the lipid profile, enhance blood antioxidant power, and could be a valuable natural compound for the management of human hypercholesterolemia.