Expression of proliferation markers in laryngeal squamous cell carcinoma: an association with clinico-pathological factors and treatment outcomes

<p class="abstract"><strong>Background:</strong> The study was done with the objective to study the expression of epidermal growth factor receptor (EGFR), cyclin D1 and Ki-67 in laryngeal squamous cell carcinoma and to assess the correlation of all three proliferation markers with various clinic-pathological parameters, the treatment outcomes as well as survival.</p><p class="abstract"><strong>Methods:</strong> We prospectively evaluated the surgical specimens of 72 laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC) patients, treated with primary surgery and post-operative adjuvant therapy. Tumor tissue samples were analysed for the expression of EGFR, cyclin D1 and Ki-67 markers and analysis were done by immune-histochemistry and western blot test. </p><p class="abstract"><strong>Results:</strong> EGFR showed significant expression in 67.6% and was insignificant in 31.9% patients in our analysis of 72 tumor samples. Cyclin D1 showed intense expression in 43%, and was insignificant in 57% patients. Ki-67 was intensely expressed in 43% patients. There was no correlation between expression of these markers with age, T-stage and N-stage. However, all the three markers showed significantly intense expression in tumours with extra capsular disease as well as perineural invasion (PNI) both of which are features of invasiveness of the tumor.</p><p class="abstract"><strong>Conclusions:</strong> Estimation of biomarkers such as EGFR, cyclin Dl, and Ki-67 could be beneficial in predicting tumor aggressiveness, prognosis and survival in LSCC patients. Thus, all the three proliferation markers can be categorized as markers of invasiveness. Combination of proliferation markers-EGFR, cyclin D1 and Ki-67 is useful pre-operatively in planning surgical strategies so as to decide a more radical approach for the resection of the primary as well as neck dissection.</p>

Correlation between cyclin D1 expression and standard clinicopathological variables in invasive breast cancer in Eastern India

Introduction: Breast cancer is the leading oncogenic threat in South-East Asian women showing an inexplicable biological aggressiveness. High expression of cyclin D1, a key molecule in breast cancer pathogenesis, has been shown by previous studies in the Western world to be associated with favorable tumoral characteristics. Apart from determining the correlation between cyclin D1 expression and standard clinicopathological variables in invasive breast cancer in Eastern India, questions that we aimed to answer through this study included: Is there a significant regional difference in expression patterns of this protein? And if yes, can it possibly account for the epidemiological differences in breast cancer occurrence and biological behavior? Finally, is testing for overexpression of this protein in regions with limited resources beneficial? Materials and Methods: The present study was carried out on 110 previously untreated, female patients with primary breast carcinoma. Cyclin D1 expression was determined by immunohistochemistry using specific anti-cyclin D1 monoclonal antibodies. Results: Overexpression of cyclin Dl was found in 78 of 110 cases (70.9%). High expression of cyclin D1 showed a significant negative correlation with tumor size (P = 0.023) and tumor grade (P = 0.045). Estrogen receptor and progesterone receptor positive cases showed a significantly positive correlation with cyclin D1 overexpression (P = 0.026 and 0.046, respectively). Interestingly, cyclin D1 positivity showed a strong correlation with the type of surgical procedure performed (P = 0.002). Conclusion: Cyclin D1 overexpression in breast cancer is associated with less aggressive tumoral characteristics. Furthermore, its potential epidemiological role and utility as a prognostic marker have been discussed.

Μορφολογική, ανοσοϊστοχημική και μοριακή διερεύνηση των αναπλαστικών λεμφωμάτων (ALCL)

Το συστηματικό αναπλαστικό λέμφωμα από μεγάλα κύτταρα (Σ-ΑΛΜΚ) αποτελεί σπάνιο Τ-κυτταρικής αρχής λέμφωμα, από μεγάλα λεμφοειδή κύτταρα και χαρακτηριστικά εκφράζει το αντιγόνο CD30/Ki-1. Μεγάλο ποσοστό των Σ-ΑΛΜΚ εκφράζουν την κινάση του αναπλαστικού λεμφώματος (ALK-anaplastic lymphoma kinase). Το πρωτοπαθές δερματικό αναπλαστικό λέμφωμα από μεγάλα κύτταρα (ΠΔΑΛΜΚ) είναι επίσης ένα Τ-κυτταρικής αρχής λέμφωμα του δέρματος, το οποίο ανήκει στις λεγάμενες πρωτοπαθείς δερματικές CD30+ Τ-κυτταρικής αρχής λεμφοϋπερπλασίες. Πρόσφατα, τα ΑΛΜΚ, ALK+ αποτελούν αυτόνομη κατηγορία στη νεώτερη κατάταξη της Π.Ο.Υ., όπου και διαχωρίσθηκαν από τα ΑΛΜΚ, ALK-. Τα ΑΛΜΚ, ALK+ εμφανίζουν πολύ συχνά την μετάθεση t(2;5)(p23;q35) μεταξύ των ΝΡΜ και ALK γονιδίων που οδηγεί στην δημιουργία ενός νέου «χιμαιρικού» γονιδίου, του ΝΡΜ-ALK, που δύναται να προκαλέσει ογκογένεση. Εκτός από την παραπάνω μετάθεση, έχουν αναφερθεί σε ποσοστό περίπου 20% των Σ-ΑΛΜΚ και άλλες 9 μεταθέσεις που εμπλέκουν το γονίδιο της ALK. Ο σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να διερευνηθούν σε μια σειρά 45 περιπτώσεων ΑΛΜΚ, T-Null-κυτταρικής αρχής, από 42 ασθενείς το προφίλ των γενετικών/μοριακών αλλαγών σε σχέση με κλασσικές παραμέτρους που μελετιόνται στα ΑΛΜΚ. Ειδικότερα μελετήθηκαν με μεθόδους ανοσοϊστοχημείας (ΑΙΧ) η ALK πρωτεΐνη, ανάστροφης αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (RT-PCR) η μετάθεση t(2;5)(p23;q35) και φθορίζοντος υβριδισμό in situ (FISH) οι μεταθέσεις και χρωμοσωμικές ανωμαλίες του ALK γονιδίου. Διερευνήθηκε επίσης, με PCR, η παρουσία ανασυνδυασμού του Τ-κυτταρικού υποδοχέα τύπου γ (TCR-γ, T-cell receptor γ). Επιμέρους στόχους αποτέλεσαν η διερερεύνηση της έκφρασης των ισομορφών (mRNA) και της πρωτεΐνης hTERT, η διερεύνηση του γονιδιακού προφίλ του CCND1 γονιδίου, της έκφρασης του mRNA της cyclin Dl και της πρωτεΐνης Cyclin Dl με ΑΙΧ, καθώς και η ανίχνευση της πρωτεϊνικής έκφρασης των Fascin και MUC-1 (EMA, CD227) με ΑΙΧ. Επιπρόσθετα, στην περίπτωση της μελέτης του CCND1, εφαρμόσθηκε η μέθοδος της ταυτόχρονης φθορίζουσας ανοφαινοτυπικής και γονιδιακής ανάλυσης (FICTION). Οι ανοσοϊστοχημικές και in situ τεχνικές πραγματοποιήθηκαν στην πλειονότητα των περιπτώσεων σε ιστικές μικροσυστοιχίες (ΤΜΑ), μία σύγχρονη τεχνική, η οποία επέτρεψε την σημαντική μείωση του κόστους, του χρόνου, και του χρησιμοποιούμενου βιοπτικού υλικού της μελέτης. Τα αποτελέσματα συσχετίσθηκαν με γνωστές κλινικοπαθολογικές παραμέτρους. Από την μελέτη μας προέκυψαν οι εξής παρατηρήσεις και συμπεράσματα: 1) Οι μοριακές τεχνικές ανίχνευσης (RT-PCR και FISH) των ανωμαλιών του ALK γονιδίου συνδυαστικά ή και μεμονωμένα εμφανίζουν υψηλή ειδικότητα και μπορούν να αναδείξουν θετικές περιπτώσεις, οι οποίες είναι αρνητικές στην ανοσοϊστοχημεία για την ALK1. 2) Τα ΑΛΜΚ και ειδικότερα τα Σ-ΑΛΜΚ εμφανίζουν συχνά επαύξηση του χρωμοσώματος 2 με τη μέθοδο FISH χωρίς διευκρινισμένη έως τώρα παθογένεση και κλινική σημασία. 3) Η χρωμοσωμική ανωμαλία που σχετίζεται με την πολυσωμία του γονιδίου CCND1 και η τρισωμία/πολυσωμία του χρωμοσώματος 11 που ανευρέθη στο 39% των ΑΛΜΚ της μελέτης μας, πιθανώς είναι συνέπεια της συνήθους παρατηρούμενης ανευπλοειδίας σε αυτά τα νεοπλάσματα. 4) To mRNA της Cyclin Dl εκφράζεται σε υψηλό ποσοστό των ΑΛΜΚ (71%), συχνότερα στην ομάδα των ΑΛΜΚ με χρωμοσωμικές ανωμαλίες του ALK γονιδίου καθώς και στις περιπτώσεις συστηματικής νόσου. 5) Παρά την επαύξηση του CCND1 γονιδίου και την έκφραση του mRNA της Cyclin Dl, δεν παρατηρήθηκε σε καμία ΑΛΜΚ περίπτωση λειτουργική Cyclin Dl πρωτεΐνη, η οποία επομένως, δεν φαίνεται να διαδραματίζει ρόλο στην ανάπτυξη των ΑΛΜΚ. 6) Στη μελέτη μας παρατηρήσαμε μειωμένη έκφραση του Bdel hTERT mRNA και υψηλότερη συχνότητα του Bplus hTERT mRNA. Λαμβάνοντας υπόψη την γενικά καλή πρόγνωση των ΑΛΜΚ, ALK+, φαίνεται απίθανο ότι η έκφραση της hTERT σχετίζεται με την πρόγνωση αυτών των νεοπλασμάτων. Η απουσία έκφρασης της hTERT σε περισσότερο από το ένα τρίτο των ΑΛΜΚ, ALK - μπορεί να βοηθήσει στην περαιτέρω κατηγοριοποίηση της ετερογενούς αυτής ομάδας λεμφωμάτων. Στα σημαντικά στοιχεία της μελέτης μπορεί να θεωρηθεί και η ανίχνευση των εναλλακτικά ματισμένων μορφών της hTERT με in situ τεχνικές. Οι τεχνικές αυτές μπορούν να χρησιμοποιηθούν περαιτέρω σε μελέτες λεμφωμάτων, όπου η αξιολόγηση της hTERT στα εκχυλίσματα ιστών με βασισμένες στην RT-PCR τεχνικές είναι πιθανό να παράγουν λανθασμένα αποτελέσματα. 7) Η υπερέκφραση της Fascin κατά κύριο λόγο στα Σ-ΑΛΜΚ έναντι των ΠΔΑΛΜΚ, πιθανότατα αποτελεί ένδειξη της επιθετικότερης βιολογικής συμπεριφοράς του νεοπλάσματος. 8) Στη μελέτη μας παρατηρήσαμε διαφορά ως προς την έκφραση της πρωτεΐνης MUC-1 σε όγκους ασθενών νεαρής ηλικίας (≤35 έτη) σε σχέση με τους >35 έτη και στα Σ-ΑΛΜΚ, ALK+ έναντι των Σ-ΑΛΜΚ, ALK-. Οι παραπάνω διαφορές ίσως σχετίζονται με δυσμενέστερη βιολογική συμπεριφορά, θεωρητικά λόγω της αντίστασης στα χημειοθεραπευτικά των νεοπλασμάτων που εκφράζουν την ως άνω πρωτεΐνη.

The blastic variant of mantle cell lymphoma arising in Waldeyer's tonsillar ring

We present three cases of blastic mantle cell lymphoma with an unusual initial manifestation in Waldeyer's ring with methods for differentiating it from other blastic neoplasms of the head and neck. All cases presented with a feeling of fullness inthe area of the mass. Morphologically, the tumours were blastic with a high mitotic rate (three to nine per high power field). All were B-cell phenotype with coexpression of CD43. In all cases cyclin Dl and bcl-2 were positive and CD23 negative. Blastic mantle cell lymphoma occurring in Waldeyer's tonsillar ring may be mistaken for other high grade haematopoietic neoplasms. Immunohistochemistry and awareness of this type of lymphoma arehelpful in differentiating it from other neoplasms.

Cyclin Dl expression as a prognostic factor in advanced hypopharyngeal carcinoma

Hypopharyngeal carcinoma (HPC) has a poor prognosis. We investigated the expression of cyclin D1 in 34 advanced HPCs, and the value of cyclin D1 expression was evaluated as a predictive marker in terms of the prognosis of HPC, compared with other clinical factors. Using immunohistochemical staining, 20 of 34 patients showed positive immunoreactivity for cyclin D1. The statistical trend of the survival rate was lower in the cyclin Di-positive patients than in the cyclin D-negative ones (p = 0.0805). The predictive factors for the survival rate were effectiveness of neo-adjuvant chemotherapy (F = 8.698) (p = 0.0066), cyclin D1 expression (F = 6.244) (p = 0.0191) and N classification (F = 5.037) (p = 0.0335). The cyclin D1-positive patients had approximately four-fold higher mortality than the cyclin D1-negative ones. These data indicate that the expression of cyclin D1 in advanced patients with hypopharyngeal carcinoma is a useful marker for prognosis.